馮斐

隨著農(nóng)業(yè)的發(fā)展，為了提高產(chǎn)量、防治病蟲害，農(nóng)藥的使用量越來(lái)越大，農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)殘超標(biāo)現(xiàn)象越來(lái)越多，為了保障農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全，國(guó)家加強(qiáng)了農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留的檢測(cè)力度。由于一些農(nóng)藥在檢測(cè)中存在基質(zhì)效應(yīng)，即在檢測(cè)中，樣品中含有待測(cè)物以外的組分，基質(zhì)樣品常對(duì)待測(cè)物的檢測(cè)有干擾，影響分析檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，這些影響和干擾被稱為基質(zhì)效應(yīng)。在對(duì)有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，若不考慮基質(zhì)效應(yīng)，會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果，導(dǎo)致數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確。

本文選取水果與蔬菜樣品中的蘋果和番茄，通過(guò)實(shí)驗(yàn)分析甲胺磷、毒死蜱和水胺硫磷3種有機(jī)磷農(nóng)藥在蘋果與番茄中的基質(zhì)效應(yīng)，并通過(guò)加標(biāo)回收試驗(yàn)，分析不同樣品基質(zhì)對(duì)回收率的影響，以期為蘋果與番茄中有機(jī)磷類農(nóng)藥基質(zhì)效應(yīng)的研究提供參考。

一、材料與設(shè)備

1.材料。蘋果與番茄，購(gòu)自超市；甲胺磷、毒死蜱、水胺硫磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，購(gòu)自農(nóng)業(yè)部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心，濃度為1000ug/mL；乙腈，色譜純，GRACE；丙酮，色譜純，F(xiàn)isher Chemical；氯化鈉，分析純，天津大茂；0.22μm有機(jī)溶劑濾膜。

2.設(shè)備。氣相色譜儀（安捷倫7890A，配有FPD檢測(cè)器），色譜柱為安捷倫50%聚苯基甲基硅氧烷（DB-17）柱，30m×0.53mm×1.0um；電子天平，梅特勒-托利多儀器有限公司，PL-203；勻漿機(jī)，IKA，T25；恒溫水浴鍋，杰瑞爾電器有限公司，HH-6；旋渦混合器；破壁機(jī)。

二、實(shí)驗(yàn)與方法

1.實(shí)驗(yàn)原理。本實(shí)驗(yàn)采用NY/T 761-2008中的方法，將試樣中的有機(jī)磷類農(nóng)藥加入乙腈進(jìn)行提取，提取液通過(guò)過(guò)濾、濃縮提取液后，用丙酮進(jìn)行定容，注入氣相色譜儀中。農(nóng)藥組分經(jīng)色譜柱分離，用FPD檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，以保留時(shí)間定性，運(yùn)用外標(biāo)法進(jìn)行定量分析。

2.樣品前處理。（1）樣品制備。蘋果屬于仁果類水果，應(yīng)先去柄，番茄屬于茄果類蔬菜，也應(yīng)先去柄，然后進(jìn)行縮分，將縮分后的樣品切碎，充分混勻并放入破壁機(jī)中打碎，制成待測(cè)樣。

（2）提取。準(zhǔn)確稱取25.0g試樣，加入50.0mL乙腈，放在勻漿機(jī)中高速勻漿2min，然后用濾紙過(guò)濾。收集濾液放入100mL具塞量筒中，具塞量筒中稱好5-7g氯化鈉，收集濾液至40-50mL，蓋緊塞子，劇烈震搖1min，在常溫下靜置30min，使乙腈相與水相分層。

（3）凈化。從具塞量筒中準(zhǔn)確吸取10.0mL上層乙腈溶液，移入150mL燒杯中，將燒杯置于80℃水浴鍋上加熱，并在杯內(nèi)緩慢通入氮?dú)饣蚩諝饬?，將溶液蒸發(fā)至近干。向燒杯中加入5.0mL丙酮，迅速蓋上鋁箔，搖勻，用0.22μm有機(jī)濾膜過(guò)濾后轉(zhuǎn)入色譜瓶中，進(jìn)行色譜測(cè)定。

蘋果與番茄試樣的基質(zhì)溶液前處理方法同上，試樣最后定容至5.0mL，在旋渦混合器上混勻，用0.22μm濾膜過(guò)濾后收集到具塞離心管內(nèi)，供配制基質(zhì)標(biāo)液用。

3.標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制。（1）單一標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的配制：分別準(zhǔn)確吸取濃度為1000ug/mL的甲胺磷、毒死蜱、水胺硫磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品1.0mL，分別置于10mL容量瓶中，用丙酮定容，配成100ug/mL的單一標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。再分別準(zhǔn)確吸取濃度為100ug/mL的甲胺磷、毒死蜱、水胺硫磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品1.0mL，分別置于10mL容量瓶中，用丙酮定容，配成10ug/mL的單一標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。

（2）混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的配制：準(zhǔn)確吸取濃度為100ug/mL的甲胺磷、毒死蜱、水胺硫磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液各1.0mL，置于同一10mL容量瓶中，用丙酮定容，配成10ug/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。

（3）混合標(biāo)準(zhǔn)工作液的配制（溶劑標(biāo)液與基質(zhì)標(biāo)液）：準(zhǔn)確吸取濃度為10ug/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0.10mL，置于10mL容量瓶中，分別用丙酮與基質(zhì)溶液定容，各配成0.1ug/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。

4.氣相色譜條件。進(jìn)樣口溫度設(shè)置為220℃；檢測(cè)器溫度設(shè)置為250℃；柱溫設(shè)置采用程序升溫，在150℃下保持2min，以8℃/min的速率升至250℃，并保持12min；載氣為氮?dú)?，純度?9.999%，流速設(shè)置為10mL/min；燃?xì)鉃闅錃?，純度?9.999%，流速設(shè)置為75mL/min；助燃?xì)鉃榭諝?，流速設(shè)置為100mL/min。

5.色譜圖分析。分別吸取1.0uL的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液和提取好的樣品溶液注入氣相色譜儀中，以保留時(shí)間進(jìn)行定性，以樣品溶液出峰面積與標(biāo)準(zhǔn)溶液出峰面積比較進(jìn)行定量。

6.樣品加標(biāo)回收試驗(yàn)。準(zhǔn)確稱取蘋果與番茄樣品各25.0g，分別加入10ug/mL甲胺磷、毒死蜱、水胺硫磷單一標(biāo)準(zhǔn)溶液各0.2mL，使其添加濃度均為0.08mg/kg，蓋上鋁箔。靜置30min后，加入50.0mL乙腈，放在勻漿機(jī)中進(jìn)行高速勻漿2min，用濾紙進(jìn)行過(guò)濾，收集濾液到裝有5-7g氯化鈉的100mL具塞量筒中，濾液至40-50mL，蓋緊量筒塞子，劇烈震搖1min，放在常溫下靜置30min，待乙腈相和水相分層。從具塞量筒中準(zhǔn)確吸取10.00mL乙腈溶液，移入150mL燒杯中，將燒杯放在80℃的水浴鍋上加熱，向杯內(nèi)緩慢通入氮?dú)饣蚩諝饬鳎舭l(fā)至近干，向燒杯中加入5.0mL丙酮，迅速蓋上鋁箔，搖勻，用0.22μm有機(jī)濾膜過(guò)濾至色譜瓶中，供色譜測(cè)定。通過(guò)氣相色譜檢測(cè)后，分別用溶劑標(biāo)液和基質(zhì)標(biāo)液計(jì)算回收率。

7.計(jì)算方法。試樣中待測(cè)農(nóng)藥殘留量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)ω計(jì)，單位用毫克每千克（mg/kg）表示，按以下公式進(jìn)行計(jì)算。

式中：ρ代表標(biāo)準(zhǔn)溶液中農(nóng)藥的質(zhì)量濃度，單位以毫克每升（mg/L）表示；A代表樣品中待測(cè)農(nóng)藥的峰面積；As代表農(nóng)藥標(biāo)液中待測(cè)農(nóng)藥的峰面積；V1代表加入溶劑的總體積，單位以毫升（mL）表示；V2代表吸取出的用于檢測(cè)的提取液體積，單位以毫升（mL）表示；V3代表樣品溶液的定容體積，單位以毫升（mL）表示；m代表試樣的質(zhì)量，單位以克（g）表示。

三、結(jié)果與分析

1.混合標(biāo)準(zhǔn)工作液峰面積的分析。濃度為0.1ug/mL的甲胺磷、毒死蜱、水胺硫磷混合標(biāo)準(zhǔn)工作液，經(jīng)上機(jī)檢測(cè)，蘋果基質(zhì)配制的標(biāo)液與番茄基質(zhì)配制的標(biāo)液的峰面積均比丙酮溶劑配制標(biāo)液的峰面積大。其中，甲胺磷與水胺硫磷在基質(zhì)中的效應(yīng)更為明顯，毒死蜱次之。見表1。

2.加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)的分析。（1）蘋果樣品加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)的分析。通過(guò)在蘋果樣品中加入甲胺磷、毒死蜱、水胺硫磷標(biāo)液，添加濃度均為0.08mg/kg，經(jīng)過(guò)前處理后，上機(jī)檢測(cè)，分析得出用蘋果基質(zhì)配制標(biāo)液計(jì)算得到的回收率分別為：甲胺磷回收率為86.9%、毒死蜱回收率為90.7%、水胺硫磷回收率為103.4%，均比用丙酮配制標(biāo)液計(jì)算得到的回收率更為準(zhǔn)確。見表2。

（2）番茄樣品加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)的分析。通過(guò)在番茄樣品中加入甲胺磷、毒死蜱、水胺硫磷標(biāo)液，添加濃度均為0.08mg/kg，經(jīng)過(guò)前處理后，上機(jī)檢測(cè)，分析得出用番茄基質(zhì)配制標(biāo)液計(jì)算得到的回收率分別為：甲胺磷回收率為79.5%、毒死蜱回收率為96.1%、水胺硫磷回收率為107.9%，均比用丙酮配制標(biāo)液計(jì)算得到的回收率更為準(zhǔn)確。見表3。

3.基質(zhì)配制3種有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)曲線的分析。從10ug/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液中分別吸取0.02mL、0.05mL、0.1mL、0.2mL、0.5mL于10mL容量瓶中，用蘋果基質(zhì)配制甲胺磷、毒死蜱、水胺硫磷混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的不同濃度的梯度，濃度分別為0.02ug/mL、0.05ug/mL、0.1ug/mL、0.2ug/mL、0.5ug/mL，經(jīng)上機(jī)檢測(cè)，分析得出甲胺磷的相關(guān)系數(shù)為0.99982，毒死蜱的相關(guān)系數(shù)為0.99991，水胺硫磷的相關(guān)系數(shù)為0.99937，3種有機(jī)磷農(nóng)藥的線性關(guān)系均良好。

四、結(jié)論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，甲胺磷、毒死蜱、水胺硫磷3種有機(jī)磷農(nóng)藥在蘋果與番茄中均存在基質(zhì)效應(yīng)，其中，水胺硫磷基質(zhì)效應(yīng)最明顯，甲胺磷次之，毒死蜱基質(zhì)效應(yīng)不太明顯。因此，在對(duì)食用農(nóng)產(chǎn)品進(jìn)行農(nóng)殘檢測(cè)時(shí)，需重視基質(zhì)效應(yīng)對(duì)檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確度的影響，可以通過(guò)配制基質(zhì)標(biāo)液的方式消除基質(zhì)效應(yīng)帶來(lái)的不良影響。

不同農(nóng)藥之所以產(chǎn)生的基質(zhì)效應(yīng)不同，原因可能有兩方面：第一，有機(jī)磷農(nóng)藥的提取過(guò)程相對(duì)簡(jiǎn)便，未得到較好的凈化，導(dǎo)致其基質(zhì)含量較高；第二，有機(jī)磷農(nóng)藥含有P=O基團(tuán)，農(nóng)藥更容易被吸附。

由于不同種類的食用農(nóng)產(chǎn)品在基質(zhì)影響方面各有不同，在進(jìn)行樣品種類較多的批量檢測(cè)時(shí)，應(yīng)盡量把相同類別的樣品放在一組進(jìn)行檢測(cè)，由此配制基質(zhì)標(biāo)液得到的檢測(cè)結(jié)果也更為準(zhǔn)確。當(dāng)檢測(cè)結(jié)果超過(guò)限值或處于臨界值時(shí)，應(yīng)用該空白樣品配制基質(zhì)標(biāo)液進(jìn)行分析，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。同時(shí)，批量檢測(cè)時(shí)，應(yīng)加上質(zhì)控樣品，做好加標(biāo)回收試驗(yàn)，保證整個(gè)檢測(cè)過(guò)程的可控性，為出具準(zhǔn)確、可靠的檢測(cè)數(shù)據(jù)提供理論依據(jù)。