◎ 朱佳佳

（新鄭市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心，河南 新鄭 451191）

液相色譜技術(shù)具有分辨率和靈敏度高、分析速度快、重復(fù)性好、定量精度高等優(yōu)勢(shì)，將其與其他儀器聯(lián)合使用，能夠極大提高檢測(cè)精度，拓展應(yīng)用范圍。目前，液相色譜技術(shù)在食品檢測(cè)工作中應(yīng)用廣泛，可用于食品添加劑檢測(cè)、有毒害物質(zhì)檢測(cè)及營(yíng)養(yǎng)成分檢測(cè)。隨著人們生活質(zhì)量的不斷提升，對(duì)生活品質(zhì)也提出了更高的要求，不僅僅局限于日常溫飽，更注重營(yíng)養(yǎng)均衡。在此背景下，相關(guān)檢測(cè)部門應(yīng)提高液相色譜技術(shù)應(yīng)用水平，借助液相色譜技術(shù)實(shí)施食品成分分析，為人民群眾創(chuàng)造更加安全的食品環(huán)境。

1 液相色譜技術(shù)概述

1.1 液相色譜技術(shù)原理

液相色譜技術(shù)的原理是利用高壓輸送流動(dòng)相，借助吸附劑分離成分，在專業(yè)檢測(cè)設(shè)備的作用下，實(shí)現(xiàn)持續(xù)檢測(cè)目的。該技術(shù)可通過(guò)色譜柱、記錄儀、進(jìn)樣器等裝置，對(duì)食品進(jìn)行精確、全面的檢測(cè)及分析[1]。

1.2 液相色譜技術(shù)特征

①壓力大、速度快。在食品成分的分離過(guò)程中，液相色譜技術(shù)主要是利用樣本中的不同成分，通過(guò)色譜柱的速度差異，完成成分的分離，從而對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)。在常規(guī)的方法中，液體受到阻隔很難通過(guò)色譜柱，難以進(jìn)行迅速檢測(cè)，而液相色譜技術(shù)采用了高壓傳送設(shè)備，可有效解決這一難題，傳送速度更快。②精度高。在檢測(cè)過(guò)程中，液相色譜技術(shù)分析的靈敏度及精度較高，能夠有效保障檢測(cè)結(jié)果。③適用性強(qiáng)。液相色譜技術(shù)具有極強(qiáng)的實(shí)踐價(jià)值，基本上可以實(shí)現(xiàn)各種類的食品成分檢測(cè)。此外，液相色譜技術(shù)不受揮發(fā)性、氣化等因素干擾，即使對(duì)于高沸點(diǎn)、穩(wěn)定性較差的有機(jī)物，也能夠?qū)崿F(xiàn)快速分離，確保檢測(cè)精度[2]。

1.3 常見液相色譜檢測(cè)方法及設(shè)備儀器

①吸附色譜法。在該方法中，吸附劑是食品成分分離的主要載體，可避免對(duì)固定相的污染。但檢測(cè)人員應(yīng)注意流動(dòng)相對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生的影響，通過(guò)多次試驗(yàn)明確檢測(cè)效率最高的流動(dòng)相與固定相。②分配色譜法。該方法以液體為檢測(cè)載體，食品分子能夠平衡在兩相之間，借助分子成分分配系數(shù)的差異性，快速分離食品分子，從而提高檢測(cè)效率。但該方法檢測(cè)過(guò)程復(fù)雜，檢測(cè)人員需明確檢測(cè)的具體要求及檢測(cè)規(guī)律，按照規(guī)程操作，防止由于人為因素導(dǎo)致的檢測(cè)失效，提升檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。③離子交換色譜法。該方法可借助不同離子的交換能力差異分離食品成分。這種檢測(cè)方法的固定相為離子交換樹脂，且交換過(guò)程具有可逆的特征，一個(gè)樣品可實(shí)施多次檢測(cè)。這類檢測(cè)方法在農(nóng)藥殘留及食品毒素檢測(cè)過(guò)程中應(yīng)用廣泛，可準(zhǔn)確掌握農(nóng)藥殘留量及食品毒素含量。在具體檢測(cè)過(guò)程中，檢測(cè)人員應(yīng)在離子交換平衡后實(shí)施色譜分析，以此提高分析結(jié)果的真實(shí)性和準(zhǔn)確性。

液相色譜檢測(cè)涉及諸多重要的設(shè)備儀器，檢測(cè)過(guò)程中，檢測(cè)人員要做好設(shè)備的檢驗(yàn)工作。①貯藏罐。本裝置主要用于存儲(chǔ)流動(dòng)相，貯藏罐的構(gòu)造由電池?cái)嚢柙O(shè)備和圓錐容器組成，圓錐容器的容積為1 L。在液相色譜檢測(cè)工作實(shí)施前，檢測(cè)人員應(yīng)先展開脫氣處理，避免出現(xiàn)氣泡。此外，在分析過(guò)程中，流動(dòng)相和固定相二者之間的反應(yīng)是重點(diǎn)關(guān)注內(nèi)容，為避免此類問(wèn)題發(fā)生，可添加惰性氣體或?qū)嵤┘訜醄3]。②高壓泵。在液相色譜檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用過(guò)程中，填料大多為細(xì)小顆粒，這就會(huì)產(chǎn)生阻力。為消除這種情況，檢測(cè)人員需采用高壓泵，高壓泵具有極強(qiáng)的抗腐蝕能力。在測(cè)試時(shí)，檢測(cè)人員應(yīng)科學(xué)調(diào)整輸出壓力，一般應(yīng)維持在40～50 MPa。高壓泵流速比較穩(wěn)定，而輸液泵主要是恒流泵和恒壓泵，兩者的作用各有不同。其中，恒流泵負(fù)責(zé)擺正液體流量，恒壓泵可實(shí)現(xiàn)壓力穩(wěn)定輸出。③檢測(cè)器。檢測(cè)器不但具有較高的靈敏度，而且可以重復(fù)使用。當(dāng)前，檢測(cè)器類型多種多樣，檢測(cè)人員要根據(jù)食品特征和檢測(cè)要求，選擇相應(yīng)的檢測(cè)器。

2 液相色譜技術(shù)在食品檢測(cè)中的應(yīng)用

2.1 在食品添加劑檢測(cè)中的應(yīng)用

2.1.1 甜味劑

現(xiàn)階段，人們對(duì)食品口味要求的提高，造成了食品中甜味劑的過(guò)度添加。食品中的甜味劑主要分為營(yíng)養(yǎng)類和非營(yíng)養(yǎng)類2種，食品甜味劑檢測(cè)主要針對(duì)的是無(wú)營(yíng)養(yǎng)類的人造甜味劑。目前，常用方法是借助液相色譜技術(shù)，檢測(cè)甜蜜素、糖精鈉及阿斯巴甜，此類甜味劑成本較低，被食品生產(chǎn)企業(yè)廣泛添加到食品生產(chǎn)中，甚至出現(xiàn)超量使用的情況。利用液相色譜技術(shù)，可對(duì)甜蜜素、糖精鈉和阿斯巴甜等3種甜味劑成分進(jìn)行分析和檢測(cè)，從而判斷3種甜味劑在食品中的含量是否超標(biāo)。通過(guò)液相色譜技術(shù)檢測(cè)飲料及食品中的甜味劑含量是非常有效的。

2.1.2 防腐劑

將防腐劑加入食品中，通常是為延長(zhǎng)食品的保質(zhì)期，使食品實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期存儲(chǔ)而不會(huì)腐爛，這也是現(xiàn)代食品生產(chǎn)加工中常用的防腐方法。以山梨酸為主的防腐劑在食品加工中被廣泛地用于食品保鮮，一旦過(guò)量使用將對(duì)食品衛(wèi)生和群眾生命安全造成嚴(yán)重的威脅。防腐劑的主要成分是鈉鹽、苯甲酸等化學(xué)物質(zhì)，通過(guò)液相色譜技術(shù)可準(zhǔn)確檢測(cè)防腐劑成分，防止有害成分超標(biāo)，保證食品安全。此外，液相色譜技術(shù)具有操作簡(jiǎn)便、靈敏的優(yōu)點(diǎn)，可以對(duì)防腐劑中的成分含量進(jìn)行精確測(cè)定，從而提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2.1.3 抗氧化劑

食品暴露于大氣中，會(huì)產(chǎn)生一系列的氧化現(xiàn)象，對(duì)食品品質(zhì)造成一定的影響。為了使食品在存放一段時(shí)期后仍不發(fā)生氧化現(xiàn)象，可向食品中加入一定量的抗氧化劑。但是，一旦食品中的抗氧化劑添加過(guò)多，就會(huì)對(duì)身體造成負(fù)面作用。現(xiàn)階段，國(guó)家已對(duì)食品中抗氧化劑的添加量制定了標(biāo)準(zhǔn)，利用液相色譜技術(shù)，可以對(duì)食品中的抗氧化劑進(jìn)行檢測(cè)和分析，進(jìn)而確定食品中抗氧化劑的含量[4]。

2.1.4 色素

在進(jìn)行食品色素含量分析時(shí)，液相色譜技術(shù)可以在短時(shí)間內(nèi)對(duì)天然色素和人造色素進(jìn)行快速的識(shí)別。例如，借助液相色譜技術(shù)與C18柱分離梯度洗脫系統(tǒng)，可快速檢測(cè)出色素中的日落黃與檸檬黃，進(jìn)而短時(shí)間內(nèi)區(qū)分人造色素和天然色素。

2.1.5 香料

在食品中加入香料，不僅能提高食品的香氣，還能掩蓋食品的其他風(fēng)味，給食用者帶來(lái)獨(dú)特的味覺(jué)享受。部分不法企業(yè)為增加食品銷量、減少生產(chǎn)費(fèi)用，違背有關(guān)法規(guī)及規(guī)范，在食品中添加大量的調(diào)味品而引發(fā)嚴(yán)重的食品安全問(wèn)題。在食品香料的含量和成分檢測(cè)過(guò)程中，可利用液相色譜技術(shù)對(duì)香料添加情況進(jìn)行全面檢測(cè)，再將其與檢測(cè)指標(biāo)進(jìn)行對(duì)比，進(jìn)而分析食品的安全性，避免不合格食品流入消費(fèi)者的飯桌，引起不良后果。

2.2 在有毒害物質(zhì)檢測(cè)中的應(yīng)用

2.2.1 藥品殘留

我國(guó)是農(nóng)業(yè)大國(guó)，農(nóng)業(yè)種植過(guò)程中過(guò)量使用殺蟲劑及化學(xué)藥劑，會(huì)對(duì)人類健康造成不良影響。與液相色譜技術(shù)相比，常規(guī)的藥品分析方法無(wú)法對(duì)藥品進(jìn)行精確、迅速的分析，而利用液相色譜技術(shù)可對(duì)常用的殺蟲劑及化學(xué)藥劑進(jìn)行成分分析。此外，液相色譜技術(shù)也可用于檢驗(yàn)和分析動(dòng)物藥品和其他相關(guān)藥劑。例如，在獸藥檢驗(yàn)過(guò)程中，可借助液相色譜技術(shù)檢驗(yàn)食用肉類，或檢驗(yàn)促進(jìn)動(dòng)物新陳代謝的藥物，包括抗生素和殺蟲劑等。

2.2.2 霉菌毒素

霉菌毒素主要包括玉米赤霉烯酮、黃曲霉素等。霉菌毒素會(huì)在食品中大量滋生，且易被人類誤食，對(duì)人類健康構(gòu)成巨大的危害。此外，霉菌毒素會(huì)在食品加工中得以繁衍，進(jìn)而對(duì)生產(chǎn)企業(yè)造成一定的經(jīng)濟(jì)損失。在對(duì)霉菌毒素進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，使用高效液相色譜檢測(cè)技術(shù)配合衍生測(cè)試方法，可對(duì)其進(jìn)行色譜的比較分析，精確分析食品中的霉菌毒素含量。

2.3 在食品微生物檢測(cè)中的應(yīng)用

食品中的微生物既有對(duì)人類健康有利的成分，比如酵母，也有對(duì)人類健康不利的成分，比如沙門氏菌。如少量攝取，一般不會(huì)出現(xiàn)明顯的臨床表現(xiàn)；如大量攝取，會(huì)出現(xiàn)嘔吐、腹瀉等嚴(yán)重的中毒癥狀。而借助液相色譜技術(shù)可實(shí)現(xiàn)食品微生物檢測(cè)，例如，借助液相色譜技術(shù)檢測(cè)玉米中的黃曲霉素B1含量，檢測(cè)過(guò)程簡(jiǎn)單、快速，且費(fèi)用低廉。

2.4 在營(yíng)養(yǎng)成分檢測(cè)中的應(yīng)用

2.4.1 糖類

食品的口感很大程度上是由糖分決定的，糖分在食品加工過(guò)程中的應(yīng)用非常廣泛，且極為重要。在食品加工時(shí)，可添加適量的葡萄糖、蔗糖和果糖。在食品檢測(cè)工作中，檢測(cè)人員可根據(jù)不同糖類的特點(diǎn)，使用液相色譜技術(shù)分析糖類[5]。此外，某些糖類具有還原性、遇水即溶解等特點(diǎn)，常規(guī)方法難以實(shí)現(xiàn)對(duì)某些糖類的準(zhǔn)確測(cè)定，故需采用液相色譜技術(shù)對(duì)碳水化合物進(jìn)行測(cè)量和分析，對(duì)各種糖的差異特征進(jìn)行詳細(xì)研究，提升糖類食品的檢測(cè)精度。

2.4.2 維生素

維生素是一種重要的營(yíng)養(yǎng)素，常規(guī)方法大多是采取維生素萃取的方法，然而該方法的檢測(cè)效率不高，而且受外部客觀條件的影響較大。此外，在一定的時(shí)間內(nèi)，食品的質(zhì)量變化也可能會(huì)影響檢測(cè)效果，而利用C18反向色譜柱和液相色譜技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)對(duì)維生素的快速檢測(cè)。因?yàn)榫S生素具有一定的特性，所以在檢測(cè)工作開始前，檢測(cè)人員應(yīng)規(guī)劃好檢測(cè)時(shí)間，科學(xué)把控外部客觀條件，在此基礎(chǔ)上，使用液相色譜技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。

2.4.3 氨基酸

氨基酸的主要成分為酶和蛋白質(zhì)，受氨基酸本身的特性影響，氨基酸在高溫下將會(huì)受到直接的破壞。利用液相色譜技術(shù)和C18反向色譜柱，可以快速高效地分離氨基酸。在檢測(cè)氨基酸內(nèi)在物質(zhì)時(shí)，還可以利用液相色譜技術(shù)對(duì)分離時(shí)間和分離進(jìn)度進(jìn)行細(xì)致的設(shè)定，提高氨基酸檢測(cè)的準(zhǔn)確性。