陳治國

(內(nèi)黃縣婦幼保健院兒科，河南 安陽 456300)

肺炎支原體肺炎（Mycoplasma pneumoniae pneumonia，MPP）處于常見于學(xué)齡前兒童與青少年的疾病之一，其可引起呼吸道感染類疾病之外，還能引起心腦血管疾病以及神經(jīng)系統(tǒng)癥狀的并發(fā)癥，嚴(yán)重危及患兒生長發(fā)育[1-2]。報(bào)道顯示，MPP約占兒童獲得性肺炎10%～40%左右[3]。流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果指出，MPP 發(fā)病率約達(dá)485～794/1 萬人[4]。MPP 發(fā)生可致使患兒肺部發(fā)生實(shí)質(zhì)性損傷，增加膿毒血癥、感染性休克的發(fā)生率，使患兒致殘率與病死率升高[5]。因此需尋找可靠指標(biāo)評估MPP 的病情程度，以期為臨床診斷與預(yù)后評估提供可參考依據(jù)。

一旦患兒發(fā)生MPP，臨床體征除了發(fā)生炎性反應(yīng)，免疫狀況也可產(chǎn)生一定程度的異常改變，而了解體征變化對于臨床診斷與治療具有較高的指導(dǎo)作用。Clara 細(xì)胞分泌蛋白（Clara cell secretory protein，CCSP）為Clara 細(xì)胞主要分泌蛋白，為重要的一種內(nèi)源性抗炎因子，于氣道分化、抗炎免疫、損傷修復(fù)中起到重要作用[6]。共刺激分子可溶性B7-H3（Soluble costimulatory molecule B7-H3，sB7-H3）為趨化因子的家族成員之一，其能通過誘導(dǎo)趨化因子與激活補(bǔ)體成分的途徑，加劇肺上皮細(xì)胞自身的免疫性損傷，促進(jìn)肺炎病情進(jìn)展[7]。目前臨床關(guān)于CCSP、sB7-H3 在MPP 患兒中臨床意義的研究較少。鑒于此，筆者通過對比MPP 患兒、健康體檢兒童的血清 sB7-H3、CCSP、CD4+/CD8+水平來分析上述血清水平在MPP病情進(jìn)展中的作用，以期為臨床早期防治提供可參考依據(jù)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究已通過學(xué)術(shù)委員會(huì)與倫理委員會(huì)審核同意。選取我院2020 年5 月至2022 年5 月收治的80 例MPP 患兒為研究組，根據(jù)病情嚴(yán)重程度將MPP 患兒分為輕癥（47 例）和重癥（33 例）

兩個(gè)亞組，另選同期80 例體檢健康兒童為對照組。研究組：男性39 例，女性41 例，平均年齡7.64±1.13 歲，居住地：農(nóng)村37 例、城鎮(zhèn)43 例，平均身高125.91±6.35 cm，平均體重21.57±3.59 kg，平均病程6.68±1.25 d。對照組：男性36 例，女性44 例，平均年齡7.69±1.27 歲，居住地：農(nóng)村38 例，女性42 例，平均身高125.35±6.46 cm，平均體重21.68±3.66 kg，平均病程6.82±1.31 d。

研究組與對照組一般資料（性別、年齡、居住地、病程等）均衡可比（P＞0.05）。研究組納入標(biāo)準(zhǔn)：

①符合中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)兒童肺炎聯(lián)盟等[8]制定MPP 的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②＜14 歲；③經(jīng)痰培養(yǎng)、血涂片等確診；④患兒家屬知情本次研究，并簽同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①其他病原菌感染；②慢性肺疾病、腎肝疾病、支氣管哮喘等疾病史；③免疫功能異常；④凝血功能異常。病情程度判斷標(biāo)準(zhǔn)[9]：①輕癥：一般狀況良好，無脫水癥或者拒食；意識無障礙；呼吸頻率正?；蚵约涌?；無呼吸困難癥狀，炎癥浸潤區(qū)域不超出1/3 肺；胸腔無積液，脈搏血氧飽和度超出0.96；肺外無并發(fā)癥。②重癥：基礎(chǔ)條件差，存在拒食、脫水以及紫紺表現(xiàn)；脈搏血氧飽和度≤0.92；呼吸頻率異常加快（嬰幼兒超出70 次·min-1，年長兒超出50 次·min-1）；X 線片顯示多肺葉受累或者累計(jì)2/3 肺；合并呻吟、吸氣性三凹征、鼻翼翕動(dòng)等呼吸困難癥狀；合并胸腔積液或者肺不張；產(chǎn)生肺外并發(fā)癥。產(chǎn)生以上任何一項(xiàng)診斷為重癥。

對照組選例標(biāo)準(zhǔn)：①無任何疾??；②家屬知情本研究，并簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 兩組入院時(shí)血清sB7-H3、CCSP、CD4+/CD8+水平采集研究對象入院時(shí)晨起空腹靜脈血3 mL，室溫下靜置約20～30 mL，用3000 rpm 離心速度持續(xù)離心5 min，離心半徑13.5 cm，收集上清液，放于-80℃冰箱中保存待檢；采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清CCSP 含量，試劑盒由捷克Biovendor 公司提供；通過酶聯(lián)免疫吸附法測血清sB7-H3 含量，試劑盒購買于蘇州旭光科星生物技術(shù)有限公司；通過BD 流式細(xì)胞儀對CD4+、CD8+含量予以檢測，后算兩者比值。

1.2.2 輕癥、重癥MPP 患兒入院時(shí)肺功能指標(biāo)（潮氣量、達(dá)峰時(shí)間/呼氣時(shí)間、達(dá)峰容積/潮氣量、呼吸頻率）及臨床肺部感染評分（Clinical pulmonary infection score，CPIS）[10]評分清理鼻腔內(nèi)分泌物，維持上呼吸道通暢，針對配合度欠佳者結(jié)合體質(zhì)量予以10%水合氯醛，0.5 mL·kg-1，口服或者保留灌腸，對于配合度良好兒童可叮囑靜坐；選大小適宜面罩，緊扣兒童口鼻，確保無漏氣；調(diào)節(jié)德國耶格醫(yī)療器械有限公司提供的Master Screen PFT System 型號的肺功能儀參數(shù)，等呼吸平穩(wěn)之后，持續(xù)記錄5 次，每次記100 個(gè)潮氣量、達(dá)峰時(shí)間/呼氣時(shí)間、達(dá)峰容積/潮氣量、呼吸頻率，取平均值。CPⅠS 為一項(xiàng)綜合微生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)、影像學(xué)、臨床等評價(jià)感染嚴(yán)重程度的量表之一，為預(yù)測患者應(yīng)用抗生素時(shí)需要調(diào)整或停用的一個(gè)評分系統(tǒng)，其主要從體溫、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、氧合狀況、X 線胸片、氣管分泌物、肺部浸潤影狀況以及氣管吸取物培養(yǎng)等方面予以評估，最高分是12 分，分值越高則說明病情越嚴(yán)重，當(dāng)CPⅠS 評分≥6 分時(shí)，則說明病死風(fēng)險(xiǎn)較高。CPⅠS 量表內(nèi)部一致性信度Cronbach's α 為0.805，效度系數(shù)為0.776。

1.2.3 血清sB7-H3、CCSP、CD4+/CD8+水平與肺功能指標(biāo)及CPIS 評分相關(guān)性

1.2.4 偏回歸分析重癥MPP 發(fā)生的危險(xiǎn)因素

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 兩組入院時(shí)血清sB7-H3、CCSP、CD4+/CD8+水平比較

與對照組相比，入院時(shí)研究組血清sB7-H3 水平較高、CCSP、CD4+/CD8+水平較低（P＜0.05）；重癥MPP 患兒入院時(shí)血清sB7-H3 水平高于輕癥患兒，CCSP、CD4+/CD8+水平低于輕癥患兒（P＜0.05）。具體見表1。

表1 兩組入院時(shí)血清sB7-H3、CCSP、CD4+/CD8+水平比較（±SD）

表1 兩組入院時(shí)血清sB7-H3、CCSP、CD4+/CD8+水平比較（±SD）

注：與對照組對比，aP＜0.05；與重癥組對比，bP＜0.05。

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2.2 輕癥、重癥MPP 患兒入院時(shí)肺功能指標(biāo)及CPⅠS 評分比較

與輕癥MPP 患兒相比，入院時(shí)重癥患兒潮氣量、達(dá)峰時(shí)間/呼氣時(shí)間、達(dá)峰容積/潮氣量較低，呼吸頻率、CPⅠS 評分較高（P＜0.05）。具體表2。

表2 輕癥、重癥MPP 患兒入院時(shí)肺功能指標(biāo)及CPIS 評分比較（±SD）

表2 輕癥、重癥MPP 患兒入院時(shí)肺功能指標(biāo)及CPIS 評分比較（±SD）

注：與重癥對比，aP＜0.05。

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2.3 血清sB7-H3、CCSP、CD4+/CD8+水平與肺功能指標(biāo)及CPⅠS 評分相關(guān)性分析

入院時(shí)血清sB7-H3 水平與潮氣量、達(dá)峰時(shí)間/呼氣時(shí)間、達(dá)峰容積/潮氣量呈負(fù)相關(guān)，與呼吸頻率、CPⅠS 評分呈正相關(guān)（P＜0.05）；入院時(shí)血清CCSP 水平與潮氣量、達(dá)峰時(shí)間/呼氣時(shí)間、達(dá)峰容積/潮氣量呈正相關(guān)，與呼吸頻率、CPⅠS 評分呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05）；入院時(shí)血清CD4+/CD8+水平與潮氣量、達(dá)峰時(shí)間/呼氣時(shí)間、達(dá)峰容積/潮氣量呈正相關(guān)，與呼吸頻率、CPⅠS 評分呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05），具體見表3。

表3 血清sB7-H3、CCSP、CD4+/CD8+水平與肺功能指標(biāo)及CPIS 評分相關(guān)性分析

2.4 偏回歸分析重癥MPP 發(fā)生的危險(xiǎn)因素

以MPP 患兒入院時(shí)病情程度為因變量，將MPP 患兒入院時(shí)血清sB7-H3、CCSP、CD4+/CD8+水平作為自變量，對自變量進(jìn)行賦值（以80 例的平均值為界：≤平均值=1，＞平均值=2）。Logistic回歸分析顯示，入院時(shí)血清sB7-H3 水平（＞7.72 μg·L-1）、CCSP 水平（≤8.38 μg·L-1）、CD4+/CD8+水平（≤1.32）是重癥MPP 發(fā)生的危險(xiǎn)因素（P＜0.05），具體見表4。

3 討論

以往研究指出，自身免疫屏障紊亂、醫(yī)源性感染或者心肺循環(huán)障礙等均可誘發(fā)MPP，尤其是年齡＜7 歲或者處在季節(jié)交替人群，可進(jìn)一步增加MPP 發(fā)生率[11]。T 淋巴細(xì)胞為免疫系統(tǒng)內(nèi)起到重要功能細(xì)胞群，參與免疫應(yīng)答，發(fā)揮免疫清除、監(jiān)視、防御等功能，一旦功能異常，可致免疫功能紊亂，降低病原菌清除能力，提高感染風(fēng)險(xiǎn)[12]。

本研究中MPP 患兒血清CD4+/CD8+水平偏低，尤其是重癥患兒下降更為明顯，說明免疫功能在MPP 的發(fā)生以及病情進(jìn)展中發(fā)揮重要作用。CD4+/CD8+下降，降低T、B 淋巴細(xì)胞的免疫應(yīng)答效果，無法抑制細(xì)胞毒性細(xì)胞作用，加劇病理性損傷，進(jìn)而促進(jìn)病情進(jìn)展。CCSP 具備重要抗炎與免疫調(diào)節(jié)功能，于肺內(nèi)起到細(xì)胞保護(hù)作用[13]。本研究中重癥MPP 患兒的血清CCSP 水平下降幅度更為顯著，可能為MPP 感染引發(fā)肺部炎性反應(yīng)，減少與破壞分布在細(xì)支氣管處Clara 細(xì)胞，致使CCSP 合成與分泌下降，此外本研究還指出，血清CCSP 水平與潮氣量、達(dá)峰時(shí)間/呼氣時(shí)間、達(dá)峰容積/潮氣量呈正相關(guān)，與呼吸頻率、CPⅠS 評分呈負(fù)相關(guān)，提示監(jiān)測血清CCSP 水平對于判定MPP 病情具有一定意義。sB7-H3 屬于共刺激因子，其可利用刺激下游趨化因子有關(guān)受體，增強(qiáng)相關(guān)因子或補(bǔ)體成分激活度，增加自身免疫類復(fù)合物沉積，促進(jìn)肺泡上皮細(xì)胞變性，同時(shí)加劇肺泡上皮細(xì)胞受損度。基礎(chǔ)研究指出，sB7-H3 可使肺泡的血管內(nèi)皮細(xì)胞出現(xiàn)的凋亡，致血管內(nèi)皮細(xì)胞于遷移方面出現(xiàn)異常，從而使肺泡通氣血流比出現(xiàn)異常[14]。本研究MPP 患兒，尤其重癥MPP患兒的血清sB7-H3 水平明顯升高，提示sB7-H3參與MPP 發(fā)生與進(jìn)展，可能為sB7-H3 含量升高可誘導(dǎo)系統(tǒng)刺激分子激活，增強(qiáng)其對肺泡上皮細(xì)胞吞噬能力，此外血清sB7-H3 水平與潮氣量、達(dá)峰時(shí)間/呼氣時(shí)間、達(dá)峰容積/潮氣量成反比，與呼吸頻率、CPⅠS 評分成正比，進(jìn)一步說明嚴(yán)密監(jiān)測血清sB7-H3 水平變化有助于臨床早期了解病情變化程度。綜上，sB7-H3、CCSP、CD4+/CD8+可作為MPP 患兒病情評估的首選血清學(xué)指標(biāo)，臨床監(jiān)測其水平變化可為臨床病情評估提供依據(jù)，為提高治療效果提供科學(xué)數(shù)據(jù)支持。