張鳳

(漯河市第三人民醫(yī)院 檢驗科,河南 漯河 462000)

支原體是一種缺乏細胞壁、能在體外培養(yǎng)的原核細胞型微生物,侵入人體后,可黏附在生殖道上皮細胞上引起泌尿生殖道感染。女性感染后可引起宮頸炎、子宮內(nèi)膜炎、卵巢炎、不孕,甚至導致流產(chǎn)、早產(chǎn)等[1]。隨著社會的快速發(fā)展,人們生活理念和生活方式的改變,泌尿生殖道支原體感染率不斷變化。近年來,關(guān)于支原體的感染性和耐藥性已有很多報道,但存在較大的地域差異。本研究旨在探討女性生殖道支原體的感染狀況和藥敏情況,為女性生殖道支原體感染的臨床分析和治療提供數(shù)據(jù)支持。

1 對象與方法

1.1 研究對象

收集2021年1月至2022年12月在漯河市第三人民醫(yī)院婦科門診、生殖門診就診女性患者的臨床資料,主要包括年齡、臨床表現(xiàn)及病原學檢測結(jié)果。納入標準:有生殖道感染的臨床癥狀;采樣前1周內(nèi)未使用抗菌藥物治療。排除標準:臨床資料不完整。本研究經(jīng)過漯河市第三人民醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會審核批準。

1.2 標本采集

女性患者常規(guī)消毒外陰,用陰道窺器擴張暴露宮頸后,用無菌棉球拭去宮頸口分泌物,然后用無菌拭子插入宮頸管內(nèi)2 cm處,旋轉(zhuǎn)3～5圈后置于配套的無菌試管中,立即送檢。

1.3 培養(yǎng)鑒定及藥敏試驗

使用鄭州安圖生物生產(chǎn)的支原體檢測試劑盒,該試劑盒可檢測解脲支原體(ureaplasma urealyticum,Uu)和人型支原體(mycoplasma hominis,Mh),測定藥物分別為米諾環(huán)素(minocycline,MIN)、多西環(huán)素(doxycycline,DOX)、紅霉素(erythromycin,ERY)、阿奇霉素(azithromycin,AZI)、交沙霉素( josamycin,JOS)、甲砜霉素(thiamphenicol,THI)、克林霉素(clindamycin,CLI)、克拉霉素( clarithromycin,CLA)、羅紅霉素(roxithromycin,ROX)、司帕沙星(sparfloxacin,SPA)、左氧氟沙星(levofloxacin,LEV)和加替沙星(gatifloxacin,GAT),每種藥物分別包被高、低兩種濃度。參照試劑說明書進行實驗操作,步驟如下。(1)取出基礎液及藥敏試驗板,平衡至室溫后,吸取100 μL基礎液加入空白對照孔。(2)將采樣拭子置于剩余的基礎液中,攪動數(shù)次,在液面上方瓶壁旋轉(zhuǎn)擠壓數(shù)次,棄去拭子,基礎液加蓋混勻。(3)將含樣本的基礎液加入其余的微孔中,每孔100 μL,輕輕震蕩藥敏試驗板,使包被上的物質(zhì)溶解。(4)試驗板所有微孔各滴加1滴礦物油(使礦物油覆蓋液面,否則培養(yǎng)液蒸發(fā),結(jié)果不準)。(5)將試驗板加蓋后,置于35～37 ℃培養(yǎng)箱中,24～48 h后觀察結(jié)果。(6)培養(yǎng)結(jié)果及藥敏結(jié)果判讀:孔板內(nèi)試劑顏色由橘黃色變?yōu)榍辶恋募t色,表示有支原體生長,判讀結(jié)果為陽性;孔內(nèi)試劑顏色保持橘黃色不變則表示沒有支原體生長,判讀結(jié)果為陰性。上、下兩孔均為陽性判定為耐藥,上孔陽性、下孔陰性判為中介,上、下兩孔均為陰性判為敏感。

1.4 統(tǒng)計學方法

使用excel 2016和SPSS 23.0軟件處理數(shù)據(jù)。計數(shù)資料以例數(shù)(n)和百分數(shù)(%)表示,采用χ2檢驗或Fisher精確概率法。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 支原體檢出情況

1 195例標本共檢出陽性標本706例,陽性率為59.08%。其中單純Uu感染率最高,單純感染Mh率最低。2021年和2022年支原體感染率比較,差異無統(tǒng)計學意義(χ2=0.019,P=0.891),且都以Uu感染為主。見表1。

表1 支原體感染的年度分布情況[n(%)]

2.2 不同年齡組女性支原體感染情況

25～35歲為女性最佳生育年齡,35～45歲為高齡生育年齡,所以將1 195例女性分為≤25歲、>25～35歲、>35～45歲、>45歲4組,4組女性標本支原體檢出率比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 不同年齡組女性標本支原體檢出情況(n,%)

2.3 藥物敏感試驗結(jié)果

Uu對大多數(shù)常用抗菌藥物如JOS、CLA、MIN、DOX、AZI、GAT、ERY較敏感,敏感率均>80%;Mh對JOS、DOX、MIN、CLI的敏感率較高,對其他抗菌藥物敏感率均較低;Uu+Mh混合感染僅對JOS、DOX、MIN的敏感率較高,對其他抗菌藥物敏感率均較低。見表3。

表3 Uu、Mh、Uu+Mh藥敏結(jié)果[n(%)]

2.4 2021—2022年支原體耐藥情況

2021年檢出7例Mh,2022年檢出5例,數(shù)據(jù)較少未納入分析?；颊叽嬖诙嘀啬退幥闆r。2021和2022年相比,單純Uu感染時,對MIN、DOX、ERY、AZI、JOS、CLA、ROX、LEV耐藥率較低且差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),GAT耐藥率上升,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),對THI和CLI耐藥率有所下降,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);Uu+Mh混合感染時,對MIN、DOX、JOS耐藥率較低且差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),對ERY、AZI、CLA、ROX耐藥率較高且差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表4。

表4 2021—2022年Uu和Uu+Mh耐藥情況[n(%)]

3 討論

支原體中的解脲脲原體和人型支原體是人類生殖道最常見的寄生菌,在機體免疫力低下等情況下可致病,是引起生殖道感染的主要病原體之一[2]。女性由于生理結(jié)構(gòu)的特點,較男性更容易發(fā)生支原體感染,對女性健康及妊娠造成嚴重危害。

本研究中,1 195份標本中檢出706份陽性標本,陽性率為59.08%,高于有關(guān)報道[2-3]。感染類型以單純Uu感染為主(檢出率為51.13%),與相關(guān)報道結(jié)果[3-4]一致。但應注意,Uu在女性下生殖道存在正常寄生的情況,是一種條件致病菌,陽性結(jié)果是否有臨床意義,需要結(jié)合臨床癥狀及半定量計數(shù)結(jié)果來解釋。如果半定量計數(shù)結(jié)果>104CFU,則臨床意義較大。Uu+Mh混合感染檢出率6.95%,低于有關(guān)報道[4-5]。2022年女性支原體檢出率同2021年相比,基本無差異,維持在59%左右,持續(xù)高檢出率,也是臨床一直重視支原體病原學檢測的原因。4個年齡組女性支原體檢出率差異無統(tǒng)計學意義,但>25～35歲組標本數(shù)量最多,可能是因為該年齡組處于最佳生育年齡,在生殖門診就診檢測的女性較多。支原體感染對孕婦、胎兒均有不良影響,近年來已引起臨床重視。4個年齡組女性支原體檢出率均較高,可能因為支原體可通過性生活傳播,而男性感染后,可因癥狀不明顯而被忽略,所以建議支原體陽性患者的伴侶,即便無癥狀也應同時采集標本進行檢測,如為陽性應雙方同時治療,避免一方治療后再次重復感染。

本研究藥敏試驗結(jié)果顯示,單純Uu感染和Uu+Mh混合感染的藥敏結(jié)果差異較大。單純Uu感染對四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類藥物有較高的敏感性,對JOS、CLA、MIN、DOX、AZI的敏感率均大于95%。單純Uu感染對GAT的敏感性較高(81.67%),對其他氟喹諾酮類藥物(LEV、SPA)敏感性較低,這與國內(nèi)其他報道[6]基本一致,與其耐藥機制主要與生物膜形成[7]、ParC基因突變[8]等相關(guān)。Uu+Mh混合感染對多數(shù)抗菌藥物敏感率較低,但對JOS、MIN、DOX有較高的敏感性,這與國內(nèi)相關(guān)的報道[9-10]一致。單純Mh感染則對JOS、MIN、DOX、CLI有較高的敏感性。引起感染的支原體的類型不同,對抗菌藥物的敏感性也不同,因此臨床醫(yī)生治療支原體感染時,應根據(jù)每份標本具體的藥敏結(jié)果制定用藥方案。

4 結(jié)論

女性生殖道支原體感染率較高,且各年齡段女性普遍易感,應引起臨床重視。2021—2022年Uu和Uu+Mh對常用抗菌藥物的耐藥率變化不大,但由于Uu和Mh對某些抗菌藥物的敏感性有所不同,臨床還應根據(jù)藥物敏感試驗結(jié)果選擇最佳藥物進行治療。