郭予濤?黃楚君?張利濱?林明祥

【摘要】目的 探討血清S100B蛋白測(cè)定對(duì)兒童自身免疫性腦炎（AE）早期識(shí)別的臨床意義。方法 選取30例AE患兒為AE組、30例病毒性腦炎患兒為病毒性腦炎組、30名健康兒童為健康對(duì)照組，分別檢測(cè)3組的血清S100B蛋白、神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）、基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）水平，使用受試者操作特征（ROC）曲線分析血清S100B蛋白、NSE、MMP水平對(duì)兒童AE早期識(shí)別的預(yù)測(cè)價(jià)值。比較不同分期、不同病情程度和不同預(yù)后AE患兒的血清S100B蛋白水平。結(jié)果 AE組的血清S100B蛋白、NSE、MMP水平高于病毒性腦炎組、健康對(duì)照組，且病毒性腦炎組的血清S100B蛋白、NSE、MMP水平高于健康對(duì)照組（P < 0.05）。血清S100B蛋白、NSE、MMP水平預(yù)測(cè)AE時(shí)，血清S100B蛋白的AUC最高，為0.881，明顯高于NSE（ Z= 2.142，P = 0.032）和MMP（Z = 2.360，P = 0.018）。急性發(fā)作期、重癥、預(yù)后不良的AE患兒血清S100B蛋白水平分別高于恢復(fù)期、輕癥、預(yù)后良好的AE患兒（P <

0.05）。結(jié)論 血清S100B蛋白測(cè)定對(duì)兒童AE的早期診斷有較高價(jià)值，且S100B蛋白測(cè)定對(duì)兒童AE病情評(píng)估、治療監(jiān)測(cè)和預(yù)后判斷有一定參考意義。

【關(guān)鍵詞】自身免疫性腦炎；兒童；S100B蛋白；早期；診斷

Clinical significance of serum S100B protein level in early identification of autoimmune encephalitis in children Guo Yutao， Huang Chujun， Zhang Libin， Lin Mingxiang. Department of Pediatrics， Shantou Central Hospital， Shantou 515040， China

Corresponding author， Lin Mingxiang， E-mail： mingxlin@sina.com

【Abstract】Objective To explore the clinical significance of serum S100B protein level in early identification of autoimmune encephalitis （AE） in children. Methods 30 children with AE were selected in the AE group， 30 children with viral encephalitis were allocated in the viral encephalitis group， and 30 healthy children were assigned in the healthy control group. The levels of serum S100B protein， neuron-specific enolase （NSE） and matrix metalloproteinase （MMP） were measured in three groups. The predictive values of serum S100B protein， NSE and MMP in early identification of AE in children were analyzed using the receiver operating characteristic （ROC） curve. Serum S100B protein levels in children with different stages AE， different severity of AE and different prognosis were comparatively analyzed. Results The levels of serum S100B protein， NSE and MMP in the AE group were significantly higher than those in the viral encephalitis and healthy control groups， and the levels of serum S100B protein， NSE and MMP in the viral encephalitis group were significantly higher than those in the healthy control group （all P < 0.05）. The area under the ROC curve （AUC） of serum S100B protein for predicting AE was 0.881， significantly larger than those of NSE （Z = 2.142， P = 0.032） and MMP （Z = 2.360， P = 0.018）. The serum S100B protein levels in AE patients with acute attack， severe disease and poor prognosis were significantly higher than those in their counterparts in recovery stage， with mild disease and good prognosis， respectively （all P < 0.05）. Conclusions Serum S100B protein level is of significant value for early diagnosis of pediatric AE. In addition， it provides certain reference value for evaluation of AE severity， treatment monitoring and prognostic assessment of children with AE.

【Key words】Autoimmune encephalitis； Child； S100B protein； Early stage； Diagnosis

自身免疫性腦炎（AE）是近年發(fā)現(xiàn)的一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥性疾病，發(fā)病率占腦炎總數(shù)的10%～20%，以急性或亞急性記憶障礙、精神行為異?；虬d癇發(fā)作、各種運(yùn)動(dòng)障礙等為主要臨床特征，嚴(yán)重威脅人類(lèi)生命健康［1］。AE好發(fā)于兒童，發(fā)病機(jī)制尚不明確，多認(rèn)為與病毒感染、腫瘤及自身免疫有關(guān)，腦損傷較嚴(yán)重，進(jìn)展快，早期診斷與治療對(duì)患兒預(yù)后舉足輕重［2］。2016年國(guó)外學(xué)者發(fā)表了AE臨床診斷及排除標(biāo)準(zhǔn)，參照該標(biāo)準(zhǔn)并結(jié)合我國(guó)臨床工作實(shí)際情況，我國(guó)神經(jīng)病學(xué)領(lǐng)域?qū)＜矣?017年頒布了《中國(guó)自身免疫性腦炎診治專(zhuān)家共識(shí)》，為國(guó)內(nèi)AE臨床診斷和治療提供了重要依據(jù)［3-4］。病毒性腦炎是小兒腦炎最常見(jiàn)的類(lèi)型，臨床診斷容易將AE與病毒性腦炎混淆，如何準(zhǔn)確鑒別AE與病毒性腦炎是臨床難點(diǎn)。目前AE相關(guān)診斷研究多為神經(jīng)自身抗體及免疫因子等，AE早期識(shí)別、早期篩選的客觀指標(biāo)較少［5-7］。現(xiàn)階段臨床醫(yī)師主要依靠神經(jīng)自身抗體檢測(cè)診斷AE，但神經(jīng)自身抗體檢測(cè)時(shí)間經(jīng)濟(jì)成本高、早期假陰性高及普及率低等，在臨床大量疑似病例中無(wú)法起到初篩作用，在較大程度上限制了早期AE的準(zhǔn)確診斷［8］。S100B蛋白是神經(jīng)組織蛋白的一種，以高水平特異性地存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)及周?chē)窠?jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、某些神經(jīng)元細(xì)胞中［9］。報(bào)道指出中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染后患者腦脊液和血清中S100B蛋白水平呈明顯增高趨勢(shì)，可作為一種檢測(cè)中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的標(biāo)志性蛋白［10］?；诖吮尘?，本研究探討血清S100B蛋白測(cè)定對(duì)兒童AE早期識(shí)別的臨床意義，旨在為兒童AE疾病的有效診治提供更多的參考。

對(duì)象與方法

一、研究對(duì)象

采用回顧性分析的研究方法，選取2018年1月1日至2021年12月31日汕頭市中心醫(yī)院兒科收治的30例AE患兒為AE組、30例病毒性腦炎患兒為病毒性腦炎組、30名健康兒童為健康對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：參照《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)（第8版）》診斷標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格篩選AE、病毒性腦炎患兒；患兒均經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢查及影像學(xué)檢查明確診斷；年齡1個(gè)月至14歲；臨床資料及隨訪資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并上呼吸道感染者；合并先天性腦部疾病者；合并小兒急危重癥。通過(guò)查閱電子病歷收集患兒性別、年齡、BMI、臨床表現(xiàn)等基礎(chǔ)資料。所有患兒入院后均接受規(guī)范化治療。本研究經(jīng)汕頭市中心醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過(guò)（批件號(hào)：2022科研067號(hào)）。所有患兒監(jiān)護(hù)人均知曉本研究?jī)?nèi)容和目的，并簽署書(shū)面知情同意書(shū)。

二、研究方法

1. 血清S100B蛋白測(cè)定

收集研究?jī)和朐寒?dāng)日所采集的肘部靜脈血

3 mL， AE患兒收集急性期（入院24 h內(nèi)）及恢復(fù)期（治療后7～10 d）所采集的肘部靜脈血3 mL，常規(guī)離心后收集上清液凍存于?20 ℃冰箱待測(cè)。采用研域生物技術(shù)（上海）有限公司的雙抗體夾心試劑盒檢測(cè)血清S100B蛋白、神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）、基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）水平，酶標(biāo)儀型號(hào)為Bioelisa ELX-800，操作按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

2. 疾病分期、病情嚴(yán)重程度和預(yù)后評(píng)估

依據(jù)《中國(guó)自身免疫性腦炎診治專(zhuān)家共識(shí)》標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分期和病情程度及預(yù)后判斷，分期分為急性期、恢復(fù)期，病情嚴(yán)重程度分為輕癥和重癥，預(yù)后分為預(yù)后良好和預(yù)后不良［4］。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用SPSS 20.0軟件對(duì)本研究所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料采用例（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料均符合正態(tài)分布，以表示，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，3組間比較采用單因素方差分析，進(jìn)一步兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

一、AE組、病毒性腦炎組、健康對(duì)照組兒童的基本資料比較

3組兒童的性別、年齡、BMI比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均>0.05）。見(jiàn)表1。

二、3組的血清S100B蛋白、NSE、MMP水平比較

AE組的血清S100B蛋白、NSE、MMP水平高于病毒性腦炎組和健康對(duì)照組（P均 < 0.05），病毒性腦炎組的血清S100B蛋白、NSE、MMP水平高于健康對(duì)照組（P < 0.05）。見(jiàn)表2。

三、血清S100B蛋白、NSE、MMP水平對(duì)兒童AE早期識(shí)別的預(yù)測(cè)價(jià)值

血清S100B蛋白（診斷界值1.02 μg/L）、NSE（診斷界值6.94 μg/L）、MMP （診斷界值5.13 μg/L）水平預(yù)測(cè)AE時(shí)，血清S100B蛋白的ROC曲線下面積（AUC）最高，為0.881，明顯高于NSE（Z = 2.142、P = 0.032）和MMP（Z = 2.360、P = 0.018），血清S100B蛋白預(yù)測(cè)AE的約登指數(shù)及特異度高于NSE、MMP。見(jiàn)表3和圖1。

四、不同分期、病情嚴(yán)重程度、預(yù)后的AE患兒血清S100B蛋白水平比較

急性發(fā)作期、重癥、預(yù)后不良的AE患兒血清S100B蛋白水平分別高于恢復(fù)期、輕癥、預(yù)后良好的AE患兒（P均 < 0.05）。見(jiàn)表4。

討論

兒童AE在早期的臨床表現(xiàn)無(wú)特異性，易誤診、漏診，且患兒病情嚴(yán)重，常遺留嚴(yán)重的后遺癥，早期準(zhǔn)確診斷和及時(shí)治療可明顯改善患兒的預(yù)后，早期診斷對(duì)兒童AE有重要的臨床意義［11］。S100蛋白是1965年由Moore等在牛腦中發(fā)現(xiàn)的，其中S100B蛋白又稱(chēng)為中樞神經(jīng)特異蛋白，主要由星形膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生，通過(guò)半胱氨酸殘基形成二硫鍵，以二聚體活性形式大量存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)中，其作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)的特異性蛋白可早期就反映腦炎的病情及預(yù)后［12］。范敬醫(yī)等（2015年）和Undén等（2004年）研究發(fā)現(xiàn)，不同病因引起的腦炎患兒血清S100B蛋白有不同程度上升。另外，早期梁景云等（2013年）研究證實(shí)病毒性腦膜炎患兒血清S100B、NSE及MMP水平較健康兒童升高，提示腦膜炎病情程度可能與S100B、NSE及MMP表達(dá)水平相關(guān)。本研究顯示，血清S100B蛋白、NSE、MMP水平由高至低依次為AE組、病毒性腦炎組、健康對(duì)照組，其中AE患兒血清S100B蛋白、NSE、MMP水平較高，提示上述指標(biāo)水平的高低與患兒腦損傷程度、范圍和持續(xù)時(shí)間等多種因素相關(guān)，尤其是病因決定了腦損傷的特點(diǎn)。AE是自身產(chǎn)生了攻擊腦細(xì)胞的自身抗體，從而使中樞神經(jīng)受到抑制，并損害腦組織的一種疾病，病毒性腦膜炎是病毒所導(dǎo)致的中樞神經(jīng)及腦組織受損［13-15］。因此AE患兒血清S100B蛋白、NSE、MMP水平高于病毒性腦膜炎。

本研究ROC曲線分析顯示，血清S100B蛋白、NSE、MMP水平預(yù)測(cè)AE時(shí)，血清S100B蛋白的AUC最高，為0.881，高于NSE和MMP，血清S100B蛋白預(yù)測(cè)AE的約登指數(shù)及特異度高于NSE、MMP檢測(cè)。腦損傷的生化標(biāo)志物包括S100B蛋白、MMP、NSE等，這3項(xiàng)指標(biāo)作為神經(jīng)系統(tǒng)受損的重要標(biāo)志物，在神經(jīng)受損患兒中表現(xiàn)出明顯升高的趨勢(shì)，同時(shí)其升高幅度與神經(jīng)系統(tǒng)受損嚴(yán)重程度密切相關(guān)，S100B蛋白作為腦損傷生化標(biāo)志物在腦損傷后有一定的時(shí)間變化規(guī)律，且與腦損傷程度及預(yù)后又密切相關(guān)，穩(wěn)定性較好，其水平有助臨床醫(yī)師判斷神經(jīng)組織的病灶大小、治療效果和評(píng)估患者預(yù)后等，此外S100B蛋白有檢測(cè)快速、高效、特異及靈敏等優(yōu)勢(shì)［16］。本研究表明，血清S100B蛋白在預(yù)測(cè)早期兒童AE發(fā)病中的有較高價(jià)值，可作為兒童AE早期識(shí)別的特異性標(biāo)志物。

S100B蛋白有廣泛生物學(xué)活性，在細(xì)胞增生、分化、基因表達(dá)、細(xì)胞凋亡中有重要作用［17］。生理狀態(tài)下腦中S100B蛋白在胚胎期第14日即有微弱表達(dá)，隨后與神經(jīng)系統(tǒng)生長(zhǎng)發(fā)育呈平行增加關(guān)系，生理狀態(tài)下是一種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，影響神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖、分化，維持鈣穩(wěn)態(tài)，促進(jìn)腦的發(fā)育，當(dāng)人出現(xiàn)腦損傷或神經(jīng)損傷時(shí)，S100B蛋白從細(xì)胞液中滲出進(jìn)入腦脊液，再經(jīng)受損的血腦屏障進(jìn)入血液，從而導(dǎo)致血液中S100B蛋白水平升高，特別是在疾病急性發(fā)作期、重癥和預(yù)后不良情況下血清中S100B蛋白表達(dá)水平明顯升高［18］。亦有研究顯示，S100B蛋白作為腦損傷生化標(biāo)志物，與腦損傷程度和患者預(yù)后緊密相關(guān)，穩(wěn)定性較好，其濃度值的檢測(cè)有助于臨床上判斷神經(jīng)組織病灶大小、治療效果和判斷腦損傷患兒的預(yù)后［19］。本研究顯示，急性發(fā)作期、重癥、預(yù)后不良的AE患兒血清S100B蛋白水平分別高于恢復(fù)期、輕癥、預(yù)后良好的AE患兒，說(shuō)明AE患兒分期、病情程度和預(yù)后與血清S100B蛋白水平相關(guān)。

綜上所述，血清S100B蛋白水平在兒童AE早期識(shí)別和疾病分期、病情程度和預(yù)后評(píng)估中有一定參考價(jià)值。S100蛋白的檢測(cè)費(fèi)用較低，要求的檢測(cè)技術(shù)不高，且可于床邊快速檢測(cè)，適合危重癥患者及基層醫(yī)療單位常規(guī)開(kāi)展，可作為兒童AE的初篩檢查，以減少對(duì)神經(jīng)自身抗體的盲目檢測(cè)，有較高的經(jīng)濟(jì)性及實(shí)用性，建議在臨床推廣應(yīng)用。

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（收稿日期：2022-09-07）

（本文編輯：林燕薇）