何瑞華，黃 瑾，徐 熠

（上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬岳陽中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，上海 200437）

腦缺血是由于腦組織缺少血液的供應(yīng)所致腦細(xì)胞缺氧甚至出現(xiàn)腦組織壞死的疾病，又稱缺血性腦血管疾病或缺血性腦卒中。由于局部腦血流暫時或永久性阻塞，引發(fā)如偏癱等各種病理、生理變化。缺血性腦損傷機制包括炎性反應(yīng)、氧化應(yīng)激、細(xì)胞壞死和凋亡、興奮性氨基酸毒性等，特別是氧化應(yīng)激和炎性反應(yīng)是對血管的結(jié)構(gòu)和功能造成破壞的主要途徑和危險因素［1］。缺血性腦卒中在中醫(yī)學(xué)理論屬“中風(fēng)”范疇，瘀滯是中風(fēng)的主要病因和病理，故活血化瘀是治療中風(fēng)的基本原則，活血化瘀類中藥配伍主要通過拮抗炎性反應(yīng)、氧化應(yīng)激等發(fā)揮治療作用［2］。中醫(yī)藥復(fù)方的多靶點、多途徑發(fā)揮作用與網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)整體性、系統(tǒng)性的特點相互契合，越來越多的研究者通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)技術(shù)探討中藥復(fù)方的作用機制。為進(jìn)一步推動中醫(yī)藥走向現(xiàn)代化、科學(xué)化奠定基礎(chǔ)，本研究中檢索中國知網(wǎng)、PubMed等數(shù)據(jù)庫2005 年至2022 年的相關(guān)文獻(xiàn)，探討網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法在中藥復(fù)方治療腦缺血作用機制中的應(yīng)用，為深入系統(tǒng)研究防治腦缺血的中藥復(fù)方提供參考?，F(xiàn)報道如下。

1 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)在中藥復(fù)方作用機制研究中的應(yīng)用

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)基于系統(tǒng)生物學(xué)的技術(shù)理論，通過搜索網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫，構(gòu)建藥物-靶點-疾病網(wǎng)絡(luò)關(guān)系，進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)拓?fù)浞治?，尋找治療疾病的藥物，預(yù)測藥物治療疾病的機制（圖1）。從多靶點研究策略入手，多層次、多角度實現(xiàn)藥物作用的綜合網(wǎng)絡(luò)分析［3］。本研究中檢索相關(guān)文獻(xiàn)，總結(jié)中藥復(fù)方治療腦缺血的功效、作用機制及臨床應(yīng)用。詳見表1。

表1 中藥復(fù)方治療腦缺血的功效、作用機制及臨床應(yīng)用Tab.1 Efficacy，mechanism and clinical application of Chinese medicine compound preparations

圖1 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究流程Fig.1 Research flow chart of the network pharmacology

2 中藥復(fù)方治療腦缺血的作用機制

2.1 改善炎性反應(yīng)

炎性反應(yīng)被認(rèn)為是腦缺血發(fā)生的主要病理生理機制，在缺血性神經(jīng)元損傷中起著至關(guān)重要的作用。研究表明，腫瘤壞死因子（TNF）、白細(xì)胞介素（IL）-1、IL-6等炎性因子在實驗性中風(fēng)24 h 內(nèi)小鼠腦中大量增加［25］，即腦缺血損傷引起強烈的炎性反應(yīng)，釋放大量炎性因子，誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞表面黏附分子表達(dá)、黏附分子和中性粒細(xì)胞表面的補體受體反應(yīng)，中性粒細(xì)胞在微血管內(nèi)聚集，釋放炎性介質(zhì)，同時大量的中性粒細(xì)胞聚集后浸潤到組織中，釋放溶酶體酶，使組織發(fā)生蛋白水解性破壞，并產(chǎn)生自由基，引發(fā)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，破壞膜的結(jié)構(gòu)和功能，導(dǎo)致腦細(xì)胞損傷。抑制炎性反應(yīng)是缺血性腦卒中的有效治療方法。

三花湯：由銀花、菊花、紅花、蒲公英、薄荷、蟬蛻、白蒺藜、赤芍、熟地黃等組方，有辛涼宣肺、祛風(fēng)清熱、化瘀通絡(luò)等功效，是治療缺血性腦卒中的經(jīng)典中藥方劑。HUANG 等［4］采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法研究三花湯治療缺血性腦卒中的作用機制，通過網(wǎng)絡(luò)分析確定了12 個關(guān)鍵靶點，其主要有效成分大黃素蒽酮、異歐前胡素和東莨菪堿可能通過調(diào)節(jié)IL - 6、淀粉樣β 前體蛋白（APP）、絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶（AKT）1、血管內(nèi)皮生長因子A（VEGF-A）等多個分子表達(dá)調(diào)控相關(guān)信號通路，從而減輕腦損傷和炎性損傷，發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。

舒腦欣丸：主要功效為理氣活血、化瘀止痛，已廣泛用于治療腦血管疾病。CHANG等［5］采用超高效液相色譜串聯(lián)四極桿-飛行時間-質(zhì)譜（UPLC/Q-TOF-MS）法和雙熒光素酶報告基因檢測篩選舒腦欣丸的抗炎活性成分，采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法預(yù)測出舒腦欣丸參與治療慢性腦缺血的關(guān)鍵途徑，發(fā)現(xiàn)其重要抗炎活性物質(zhì)藁本內(nèi)酯可減弱小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞（bEnd3）中TNF-α誘導(dǎo)的絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）14和丙酮酸脫氫酶激酶1（PDK1）磷酸化，從而發(fā)揮抗炎作用。

谷紅注射液：主要成分為紅花、乙酰谷酰胺等，臨床用于治療腦血管疾病如腦供血不足、腦血栓、腦栓塞及腦出血恢復(fù)期。WANG 等［6］采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)合實驗驗證方法預(yù)測了谷紅注射液的活性物質(zhì)為羥基紅花黃A、黃芩苷、燈盞花乙素等，篩選出參與炎性反應(yīng)和細(xì)胞凋亡的核心靶點，如核因子-κB（NF-κB）p65、TNF-α、IL - 6、IL - 1β、B 細(xì)胞淋巴瘤2（Bcl - 2）關(guān)聯(lián)X 蛋白（Bax）、Bcl-2、胱天蛋白酶3（CASP3）等。免疫熒光和酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）結(jié)果顯示，谷紅注射液減少了NF-κB p65 核轉(zhuǎn)位，降低了在受損的皮層組織中異常升高的促炎因子（TNF-α，IL-6，IL-1β）水平，顯著下調(diào)了缺血皮層中原位末端標(biāo)記（TUNEL）陽性凋亡細(xì)胞的數(shù)量，有效恢復(fù)了Bax，Bcl-2，Caspase-3 等的異常表達(dá)，表明谷紅注射液對改善亞急性中風(fēng)模型小鼠中風(fēng)后功能恢復(fù)的治療作用是通過調(diào)節(jié)皮質(zhì)炎性反應(yīng)和細(xì)胞凋亡來實現(xiàn)的。

芪參益氣方：由黃芪、丹參、三七、降香油組方［7］，具有補氣活血功效，配方及其滴丸已廣泛用于治療氣虛血瘀證，如冠狀動脈粥樣硬化性心臟病（簡稱冠心?。⑿慕g痛、心肌梗死等心血管疾病。已有研究表明，芪參益氣方中的主要活性成分如黃芪甲苷、花萼苷、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1、丹酚酸A、丹酚酸B、丹參酮ⅡA等通過多功能機制保護(hù)大腦免受缺血再灌注損傷。WANG 等［7］通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法結(jié)合Fisher 精確檢驗算法分析得出，芪參益氣方對腦缺血再灌注損傷的治療作用與神經(jīng)炎癥信號通路密切相關(guān)，同時篩選出7 種與炎性反應(yīng)密切相關(guān)的關(guān)鍵靶點γ 干擾素（IFN - γ）、IL - 1β、IL - 6、TNF - α、NF - κB p65、轉(zhuǎn)化生長因子β1（TGF-β1）、Toll樣受體4（TLR-4）。動物實驗表明，芪參益氣方預(yù)處理能下調(diào)小鼠體內(nèi)炎性介質(zhì)IFN - γ，TLR - 4 和促炎因子IL - 6，TNF - α，NF - κB p65，上調(diào)抗炎因子TGF-β1，對腦缺血再灌注損傷的神經(jīng)保護(hù)作用與抑制神經(jīng)炎癥的作用相關(guān)。

黃連解毒湯：是清熱解毒藥的代表方，由黃連、黃芩、黃柏和梔子組方，具有解毒、清熱、化濕功效，主治三焦熱盛，有熱盛、口干、語無倫次、失眠、發(fā)熱、吐血、癰腫、舌紅、苔黃、脈細(xì)數(shù)等證，臨床用于治療感染、腦血管疾病和糖尿病。LI 等［8］通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)構(gòu)建藥物-成分- 靶點- 疾病網(wǎng)絡(luò)，通過度值和介度中心性篩選出黃連解毒湯抗腦缺血的關(guān)鍵靶點［前列腺素內(nèi)過氧化物合酶2（PTGS2）、前列腺素內(nèi)過氧化物合酶1（PTGS1）等］和活性成分（槲皮素、山柰酚、漢黃芩素等）。分子對接技術(shù)研究發(fā)現(xiàn)，黃連解毒湯中的黃芩苷、鹽酸小檗堿、梔子苷等活性成分與環(huán)氧合酶2（COX-2）和5 - 脂氧合酶（5 - LOX）結(jié)合活性較好。采用高效液相色譜（HPLC）法測定含量，建立大腦中動脈閉塞大鼠模型，驗證黃連解毒湯的療效可能是通過抑制5-LOX通路相關(guān)蛋白、白三烯D4（LTD4）、白三烯B4（LTB4）、半胱氨酰白三烯（CysLTs）的表達(dá)發(fā)揮抗炎效應(yīng)，從而降低腦損傷程度。

2.2 抗氧化應(yīng)激損傷

急性缺血性腦卒中發(fā)生時，一氧化氮合酶、氧自由基等在缺血、缺氧刺激下會大量合成，進(jìn)一步誘導(dǎo)炎性因子表達(dá)，加劇炎性反應(yīng)和局部腦組織損傷。特別是產(chǎn)生的大量活性氧，可通過脂質(zhì)過氧化、核酸和蛋白質(zhì)直接破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)［26］，使神經(jīng)元細(xì)胞和腦組織受到氧化應(yīng)激損傷。

通圣片：經(jīng)古方安宮牛黃丸和防風(fēng)通圣散化裁而成，主要由大黃、梔子、牛黃、赤芍、虎杖等組方，臨床用于治療腦卒中。LIU 等［9］通過建立通圣片成分的指紋圖譜發(fā)現(xiàn)梔子苷、芍藥苷、大黃素、虎杖苷等11種化合物，將網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析與生物信息學(xué)相結(jié)合，預(yù)測出通圣片能調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激、炎性反應(yīng)和細(xì)胞凋亡，以及關(guān)鍵靶點如核紅細(xì)胞相關(guān)因子2（Nrf2）、IL-1β、TNF、Bcl-2、細(xì)胞色素C 等。動物實驗發(fā)現(xiàn)，通圣片能顯著下調(diào)促炎因子（IL - 1β，TNF - α）和促氧化產(chǎn)物［脂質(zhì)過氧化物（LPO）、丙二醛（MDA）］的表達(dá)，上調(diào)抗氧化產(chǎn)物［一氧化氮（NO）、超氧化物歧化酶（SOD）］及Nrf2 和血紅素氧合酶1（HO-1）蛋白表達(dá)，表明通圣片可能通過減少氧化應(yīng)激、抑制炎性反應(yīng)等機制減輕腦缺血再灌注損傷。

生脈散：是中國傳統(tǒng)方劑，主要用于防治缺血性心腦疾病。LI 等［10］通過對生脈散的研究篩選出4 種化合物（人參皂苷Rb1、人參皂苷Rg1、五味子素和DT - 13）組合而成生脈制劑，基于化學(xué)結(jié)構(gòu)、藥理學(xué)信息、系統(tǒng)生物學(xué)功能數(shù)據(jù)分析等方法，構(gòu)建靶點- 通路相互作用網(wǎng)絡(luò)，分析和尋找生脈制劑治療心腦缺血的潛在通路和靶點。體外實驗結(jié)果表明，生脈制劑不僅劑量依賴性地抑制TNF - α 處理的EA. hy926 細(xì)胞中NF - κB p50、NF-κB p65、kappa B 抑制因子激酶（IKK）α、IKKβ等分子的磷酸化，以及過氧化氫（H2O2）激活的PC12 細(xì)胞中Nrf2/血紅素加氧酶1（HO - 1）通路，發(fā)揮抗氧化應(yīng)激作用。

舒血寧注射液：主要成分來自銀杏葉，能擴(kuò)張血管，改善微循環(huán)，用于治療缺血性心腦血管疾病、冠心病、心絞痛、腦栓塞、腦血管痙攣等。CUI等［11］結(jié)合網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析和動物實驗發(fā)現(xiàn)，黃酮類活性化合物山柰酚、槲皮素和木犀草素與海馬組織中PTGS2 等靶蛋白親和力較強，可抑制炎性反應(yīng)并調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激水平，減少腦組織中神經(jīng)元細(xì)胞的凋亡，從而保護(hù)大鼠的腦組織。

2.3 抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡

氧化應(yīng)激或鈣離子超載可促進(jìn)細(xì)胞凋亡和壞死［27］。腦缺血損傷發(fā)生時，一系列的氧化應(yīng)激反應(yīng)會促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞凋亡。故有效緩解氧化應(yīng)激和保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞也是腦缺血疾病防治的重要環(huán)節(jié)。

腦泰方：由黃芪、地龍、僵蠶、川芎4味中藥組方，行益氣活血、化痰通絡(luò)功效。YANG 等［12］基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)與實驗驗證的綜合分析結(jié)果顯示，腦泰方可提高Bcl- 2 的表達(dá)水平，同時降低Bax 的表達(dá)水平，以有效抑制神經(jīng)細(xì)胞的凋亡。

黃連解毒湯：SHANG 等［28］通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對接技術(shù)及蛋白質(zhì)組學(xué)分析對黃連解毒湯治療腦缺血的作用機制進(jìn)行研究，基于中藥-化合物-靶點網(wǎng)絡(luò)的度值和接近度，初步確定黃芩苷、白楊素、梔子苷、黃連素等為其核心生物活性成分。在蛋白互作（PPI）網(wǎng)絡(luò)中利用CytoHubba 插件篩選出包括AKT1，PTGS2，TLR-4在內(nèi)的8個核心靶點。通過藥理研究檢索和網(wǎng)絡(luò)拓?fù)渲岛Y選，選擇梔子苷、黃芩苷和鹽酸小檗堿作為關(guān)鍵生物活性成分，采用HPLC 法檢測黃連解毒湯中3 種成分的含量。動物實驗研究發(fā)現(xiàn)，RAS 癌基因家庭成員1A（Rap1A）和AKT 表達(dá)顯著上調(diào)，N-甲基-D-天冬氨酸離子能谷氨酸受體1（GRIN1）表達(dá)顯著下調(diào)。提示黃連解毒湯在抗炎、抗氧化作用的基礎(chǔ)上可能通過調(diào)節(jié)Rap1信號通路介導(dǎo)多種生物學(xué)功能，如抑制細(xì)胞凋亡，調(diào)節(jié)氧平衡，抑制興奮性毒性，維持細(xì)胞基本功能，從而改善腦缺血。

血脈通：由肉桂、丹參、川芎、葛根、梔子和澤瀉組方，行活血化瘀功效。ZHANG 等［13］采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法研究發(fā)現(xiàn)，TNF信號通路可能是血脈通膠囊治療腦出血的關(guān)鍵信號通路；通過體內(nèi)外實驗研究發(fā)現(xiàn)，血脈通通過調(diào)節(jié)TNFR1 介導(dǎo)的CASP3/NF - κB/MAPK 軸減輕神經(jīng)元凋亡、缺血區(qū)炎性反應(yīng)、水腫和灌注損傷。

丹紅注射液：由丹參和紅花提取而成，是目前治療缺血性腦卒中最常用的中藥，具有活血化瘀功效和促再生作用。QI等［14］通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，丹紅注射液可能通過二萜醌類化合物如脫氫丹參酮ⅡA、丹參酚A、丹參醛等調(diào)節(jié)90 kDa熱休克蛋白（HSP）αA1（HSP90αA1）誘導(dǎo)的磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/AKT信號傳導(dǎo)和其他下游分子如髓系細(xì)胞白血病1 蛋白（MCL- 1）和胱天蛋白酶9（CASP9）的表達(dá)，發(fā)揮抗細(xì)胞凋亡作用。

2.4 促血管生成

缺血性腦卒中發(fā)生后，新的血管生成是一系列復(fù)雜的生物和分子過程，受促血管生成和抗血管生成因子［如VEGF、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF）和堿性成纖維細(xì)胞生長因子（bFGF）］的精確調(diào)節(jié)［29］，促進(jìn)血管生成，有助于患者在缺血性損傷后的恢復(fù)［30］。

通竅活血湯：由赤芍、川芎、桃仁、大棗、紅花等8味中藥組方，是以通竅為主的活血散結(jié)方，主要活性成分為芍藥苷、阿魏酸和麝香酮，臨床已用于治療中風(fēng)。WU等［15］基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法，預(yù)測TNF，AKT1，IL - 6，VEGF-A，JUN，IL-1β，TGF-β1及胰島素樣生長因子1（IGF1）、表皮生長因子受體（EGFR）、基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP - 9）為關(guān)鍵靶點。經(jīng)動物體內(nèi)實驗驗證，通竅活血湯可能通過激活VEGF-A/血管內(nèi)皮生長因子受體（VEGFR）2 - 黏著斑激酶（FAK）- 樁蛋白（Paxillin）信號通路促進(jìn)血管生成，從而對大鼠腦缺血再灌注損傷提供保護(hù)。

補陽還五湯：為理血劑，具有補氣、活血、通絡(luò)功效，主治氣虛血瘀證中風(fēng)，臨床廣泛用于防治缺血性心腦血管疾病。WANG 等［16］通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，補陽還五湯中的16 種潛在活性成分黃芩素、β - 胡蘿卜素、黃芩苷等能升高缺氧誘導(dǎo)因子（HIF）-1α、VEGF-A等促血管生成因子的水平。

黃芪- 川芎復(fù)方：YANG 等［17］通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法分析并驗證發(fā)現(xiàn)，黃芪- 川芎復(fù)方可調(diào)節(jié)腦缺血再灌注損傷相關(guān)靶點（如AKT1，MAPK1，CASP3，EGFR）的表達(dá)、生物學(xué)過程（如血管生成、神經(jīng)元軸突損傷、凝血、鈣穩(wěn)態(tài)）和多個相關(guān)信號通路［如HIF - 1、VEGF、Ras、叉頭轉(zhuǎn)錄因子（FoxO）］等，其中的活性化合物黃芪甲苷和阿魏酸、川芎嗪之間存在協(xié)同調(diào)節(jié)靶點的作用。實驗表明，黃芪-川芎復(fù)方可改善神經(jīng)功能缺損評分，減少腦梗死體積，上調(diào)HIF-1α/VEGF 和VEGFR 蛋白及mRNA 的表達(dá)，促進(jìn)血管生成，最終達(dá)到防治缺血再灌注損傷的作用。

熟地黃-山茱萸藥對：最早出自《金匱要略》，常用于治療腎病。王瀚澤等［18］通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對接技術(shù)探討了熟地黃-山茱萸對在缺血性腦卒中后遺癥期的治療機制，通過數(shù)據(jù)分析預(yù)測AKT1、VEGF-A、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子3（STAT3）為核心靶點，驗證了該藥對中成分與潛在靶點具有較好的結(jié)合活性，表明熟地黃-山茱萸藥對中梓醇可促進(jìn)腦缺血后血管生成。

2.5 改善凝血

缺血性腦卒中的發(fā)生主要是由于大腦中動脈等腦血管的血栓形成，導(dǎo)致部分大腦供血中斷。血小板活化功能出現(xiàn)問題可能導(dǎo)致血液循環(huán)內(nèi)形成閉塞性血栓，從而封閉腦動脈，最終誘發(fā)缺血性腦卒中。故抗血小板治療、改善腦血管的凝血狀態(tài)已成為防治缺血性腦卒中的有效手段。

桃紅四物湯：為中醫(yī)經(jīng)典方，由桃仁、紅花、地黃、當(dāng)歸、白芍、川芎組方，用于祛瘀、補血、疏通身體的輔助治療。PAN 等［19］對桃紅四物湯的39 種入血成分進(jìn)行靶點預(yù)測研究，確定了腦缺血的靶點及成分靶點和疾病靶點間的交集，構(gòu)建PPI 網(wǎng)絡(luò)，確定其主要活性成分為牡丹皮苷H、芍藥苷、乳花苷、苯甲酰芍藥苷等，可逆轉(zhuǎn)補體系統(tǒng)和凝血級聯(lián)信號通路相關(guān)蛋白如人補體1qB（C1qB）、人補體1qC（C1qc）、人補體3A 受體1（C3AR1）、人補體5A 受體1（C5AR1）、補體因子D（CFD）的表達(dá)水平，從而發(fā)揮對缺血性腦卒中的有效治療作用。

復(fù)方丹蛭片：由黃芪、丹參、水蛭、地龍、川芎組方，臨床用于治療缺血性腦卒中。CHENG 等［20］通過UPLC/Q-TOF-MS 法測定了復(fù)方丹蛭片中的15種指標(biāo)成分如丹參素、丹酚酸B 等，通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析并結(jié)合動物實驗驗證發(fā)現(xiàn)，復(fù)方丹蛭片可降低模型大鼠體內(nèi)血栓素A2（TXA2）的水平，表明其治療缺血性腦卒中損傷的部分機制可能為其抗血小板凝血功能和通過血小板活化途徑抑制血栓形成。

2.6 其他

除了上述作用機制外，基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探索的中藥復(fù)方還可通過調(diào)節(jié)腦血管功能、改善代謝功能、保護(hù)血腦屏障等對缺血性腦卒中產(chǎn)生保護(hù)作用。

小續(xù)命湯：為出自《備急千金要方》的經(jīng)典名方，廣泛用于治療中風(fēng)。SHEN 等［21］基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)對5 種血管G 蛋白偶聯(lián)受體（GPCR）和小續(xù)命湯的各種化合物成分進(jìn)行分子對接研究發(fā)現(xiàn)，沒食子丹寧、甘草苷、蕓香柚皮苷作為活性成分與核心靶點具有較好的結(jié)合活性，小續(xù)命湯可劑量依賴性地誘導(dǎo)5 - HT1A受體（5-HT1AR）表達(dá)，使預(yù)收縮的大鼠基底動脈環(huán)松弛，表明小續(xù)命湯可能通過GPCR 調(diào)節(jié)血管張力，改善腦血管功能，從而實現(xiàn)對缺血性腦卒中的治療作用。

桃仁-大黃藥對：為化瘀清熱的經(jīng)典藥對，行清熱涼血、泄熱解毒功效，用于治療各種血瘀證疾病。LI等［22］通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)篩選出花生四烯酸（AA）代謝途徑中的關(guān)鍵靶點腺苷受體A2A（ADORA2A），并結(jié)合代謝組學(xué)分析及藥理實驗方法，證實桃仁- 大黃藥對可通過調(diào)節(jié)ADORA2A 的降解，減輕AA 代謝功能障礙和炎性反應(yīng)，從而改善腦缺血再灌注損傷。

腦栓通膠囊：由香蒲花粉、赤芍、姜黃、天麻和連翹組方，臨床主要用于腦缺血急性期及機體恢復(fù)期。LUO等［23］通過質(zhì)譜鑒定腦栓通膠囊中的主要成分，運用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測出芹菜素為其發(fā)揮抗缺血性腦卒中作用的核心成分。腦栓通膠囊對缺血性腦卒中的預(yù)防和保護(hù)作用主要表現(xiàn)在抗炎、抗氧化和抗凋亡活性，以及降低興奮性氨基酸（EAA）毒性等。

消栓通絡(luò)方：為臨床經(jīng)驗方，由川芎、丹參、黃芪、澤瀉等11 味中藥組方，具有活血化瘀、溫經(jīng)通絡(luò)之功效，主治血脂異常和由腦血栓引起的精神呆滯、舌質(zhì)發(fā)硬、言語遲澀、發(fā)音不清、手足發(fā)涼和活動疼痛。鄭一夫等［24］利用機器學(xué)習(xí)算法、分子對接、虛擬篩選、數(shù)據(jù)挖掘、網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)等方法，構(gòu)建化學(xué)成分-靶點-通路網(wǎng)絡(luò)，對消栓通絡(luò)方的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)作用機制進(jìn)行了深入研究，發(fā)現(xiàn)潛在的作用靶點如凝血因子Ⅺ（F11）、MMP - 9、VEGF - A 等，以及姜黃素、肉桂醛、丹酚酸等活性成分，表明消栓通絡(luò)方可能通過血管再通和神經(jīng)保護(hù)等多種途徑治療腦卒中。

3 分析與展望

中藥復(fù)方治療腦缺血具有獨特優(yōu)勢，也是該領(lǐng)域研究的熱點。目前，多數(shù)研究通過現(xiàn)代藥理學(xué)實驗動物模型對復(fù)方的作用機制進(jìn)行探討，但由于中藥成分復(fù)雜，并未能深入厘清其作用機制和明晰其干預(yù)的信號通路，也未能對復(fù)方中起主要作用的活性成分進(jìn)行分析，這也是限制中藥復(fù)方制劑不能得到國際廣泛認(rèn)同的主要原因之一［31-32］。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)不僅能快速預(yù)測藥物作用靶點和機制，還能挖掘出中藥復(fù)方的主要活性成分。研究發(fā)現(xiàn)，各中藥復(fù)方中活性成分較多，如槲皮素、山柰酚、丹酚酸、梔子苷、黃芩苷等可能是治療腦缺血的潛在有效單體化合物，主要通過抗炎、抗凋亡、抗氧化應(yīng)激、保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞等機制發(fā)揮作用，主要作用于TNF，NF-κB，Nrf2/HO-1，Bax/Bcl- 2，PI3K/AKT，VEGF-A等靶點或通路，發(fā)揮防治腦損傷的作用。

中藥復(fù)方治療腦缺血并非只作用于某一靶點或腦部，而是對其他組織器官甚至全身系統(tǒng)均有調(diào)理作用。如芪參益氣配方及其滴丸還應(yīng)用于氣虛血瘀證如冠心病、心絞痛等心血管疾病的臨床治療［33］，表明其對心臟及血液循環(huán)有保護(hù)作用。炎性反應(yīng)、氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡不僅發(fā)生于腦缺血中風(fēng)過程，同樣參與血管損傷和動脈粥樣硬化的發(fā)生。動脈粥樣硬化可導(dǎo)致血栓栓塞，是造成腦梗死或缺血性腦卒中的重要危險因素［34］。血脈通等中藥復(fù)方目前已用于治療動脈粥樣硬化［13］，對身體機理具有良好的協(xié)同調(diào)節(jié)作用。桃紅四物湯用于治療心腦血管疾病的同時對身體慢性疼痛也有緩解作用，也可用于貧血的治療［19］。中藥復(fù)方對多種疾病的有效治療充分表明了其具有多靶點、多途徑發(fā)揮作用的優(yōu)勢。

通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)開展的不同研究發(fā)現(xiàn)，對靶點的發(fā)現(xiàn)和活性成分的挖掘存在不盡相同的情況，這可能與生物靶標(biāo)數(shù)據(jù)庫更新較慢、現(xiàn)有活性成分?jǐn)?shù)據(jù)庫的準(zhǔn)確性、完整性不足相關(guān)，跨數(shù)據(jù)平臺篩選的結(jié)果也可能出現(xiàn)偏差［35］。在同一中藥復(fù)方如黃連解毒湯［8，28］的研究中，由于研究者選擇了不同插件、不同方法篩選關(guān)鍵靶點和活性成分，得到的結(jié)果并不完全一致。此外，中藥復(fù)方也可能由于通過口服進(jìn)入血液循環(huán)，在體內(nèi)組織分布不均，對靶點的親和力不穩(wěn)定，導(dǎo)致篩選的成分、靶點完整性欠佳［36］。故仍需進(jìn)一步拓展網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的研究應(yīng)用，將其與中藥藥動學(xué)、中藥藥效學(xué)、中藥血清藥理學(xué)及代謝組學(xué)等學(xué)科結(jié)合，提高篩選作用靶點和發(fā)現(xiàn)活性成分的有效性和準(zhǔn)確性。

近年來，網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)聯(lián)合其他方法或技術(shù)為研究中藥復(fù)方的作用機制提供了新的思路。如UPLC/ Q -TOF-MS［20］等分析技術(shù)的運用可明確中藥復(fù)方的物質(zhì)基礎(chǔ)，機器學(xué)習(xí)算法、虛擬篩選等技術(shù)［24］能進(jìn)一步縮小篩選范圍，分子對接方法可聚焦到單個化合物的預(yù)測，代謝組學(xué)［22］和蛋白質(zhì)組學(xué)［28］可對預(yù)測的核心靶點進(jìn)行驗證，從而闡明中藥復(fù)方治療腦缺血等疾病的物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機制，進(jìn)一步證明中藥復(fù)方的科學(xué)性和可靠性。

綜上所述，網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)在中藥復(fù)方治療腦缺血研究中的應(yīng)用廣泛，為中藥復(fù)方應(yīng)用的有效性和科學(xué)性提供了依據(jù)。