王家玉，李 琳，陳 琳

（重慶醫(yī)科大學(xué)附屬婦女兒童醫(yī)院（重慶市婦幼保健院） 藥學(xué)部，重慶 401147）

雙嘧達(dá)莫（dipyridamole，Dim）臨床用于防治心絞痛和抗血小板凝集、防治血栓形成，通常需長期服用。但Dim具有pH溶解依賴性，在胃中酸性條件（37 ℃，pH 1.0）下溶解度較高，而在腸道堿性條件（37 ℃，pH 7.0）下溶解度極低，這種特性造成口服Dim在胃腸道中吸收、溶出不規(guī)則，個(gè)體吸收差異性大。這種pH溶解依賴性是造成Dim生物利用度較低的主要原因[1-2]。

胃漂浮型制劑是一類能延長制劑在胃內(nèi)滯留時(shí)間，增加藥物胃吸收程度的新型制劑[3]。果膠（pectin，Pct）是一種以多聚D-半乳糖醛酸為主鏈的水溶性多糖，具有良好的生物相容性和安全性。Pct分子中的羧基可與一些二價(jià)、三價(jià)金屬離子反應(yīng)形成網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的凝膠。Pct金屬離子凝膠結(jié)構(gòu)在胃中酸性條件下較穩(wěn)定[4-5]。

本文以Pct為載體材料，鋇離子為交聯(lián)劑，碳酸氫鈉為制泡劑，制備了果膠鋇凝膠胃漂浮微丸（Dim-Ba）。為改善Dim在酸性條件中的突釋，我們選取不同類型的聚丙烯酸樹脂材料用于制備Dim固體分散體，再將載藥固體分散體包入果膠鋇凝膠微丸中。通過實(shí)現(xiàn)Dim在胃內(nèi)持續(xù)釋藥，有望解決藥物的pH溶解依賴性問題，實(shí)現(xiàn)藥物在胃部的靶向緩釋，長時(shí)間維持有效血藥濃度，提高生物利用度。

1 儀器與材料

1.1 儀器

UV-3150型紫外分光光度儀（日本島津公司）；AR2140精密電子天平（美國OHAUS公司）；85-2數(shù)顯恒溫磁力攪拌儀（上海司樂儀器有限公司）；SHZ-88臺(tái)式水浴恒溫振蕩儀（江蘇太倉市實(shí)驗(yàn)設(shè)備廠）；實(shí)驗(yàn)用水為超純水，其他試劑均為分析純。

1.2 試藥

Dim（芮城縣虹橋藥用中間體有限公司）；Pct（衢州果膠有限公司，酯化度15 %～25 %，黏度為0.015 Pa/s）；Eudragit L100（L100，德國ENOVIK公司）；Eudragit RLPO（RLPO，德國ENOVIK公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 載藥胃漂浮微丸的制備

2.1.1 Dim果膠鋇凝膠胃漂浮微丸（Dim-BaPct）的制備 精密稱取適量Dim和碳酸氫鈉（1.75 %，w/v），溶解于適當(dāng)濃度的Pct溶液中，攪拌使其充分分散，然后將混懸液經(jīng)9號(hào)針頭滴入快速攪拌中的氯化鋇醋酸溶液中，針頭距液面8 cm，固化交聯(lián)15 min，漏斗過濾，超純水洗滌多次，40 ℃烘箱干燥1 h，即制得Dim-BaPct[6]。

2.1.2 載Dim固體分散體胃漂浮微丸（DimSD-BaPct）的制備 稱取Dim，L100和RLPO適量，溶于甲醇和二氯甲烷（1:1，v/v）混合溶液，55 ℃水浴蒸干，40 ℃真空干燥12 h，充分碾磨后過100目篩，制得雙嘧達(dá)莫固體分散體（DimSD）[7-8]。精密稱取適量DimSD和碳酸氫鈉（1.75 %，w/v），按2.1.1項(xiàng)下方法操作，制得載DimSD胃漂浮微丸（DimSD-BaPct）。

2.2 微丸粒徑的測(cè)定

取適量DimSD-BaPct，使用標(biāo)尺測(cè)量微丸直徑，計(jì)算平均粒徑和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。見圖1。其外觀圓整，大小均勻。將多顆微丸平行排列后測(cè)得其平均粒徑（1.6±0.11）mm。

圖1 微丸外觀

2.3 溶脹率的測(cè)定

分別稱取適量Dim-BaPct、DimSD-BaPct，投入盛有100 ml人工模擬胃液（HCl溶液，pH 1.2）的錐形瓶中。將錐形瓶置于恒溫振蕩儀中，轉(zhuǎn)速75 r/min，溫度37 ℃，測(cè)定兩種微丸的溶脹情況。分別于15 min、30 min、1 h、2 h、3 h、4 h、5 h取出微丸，用濾紙吸干微丸表面水分，記錄微丸此時(shí)質(zhì)量Wt。按下式計(jì)算微丸溶脹率。結(jié)果見圖2。

圖2 Dim-BaPct和DimSD-BaPct在人工模擬胃液中的溶脹曲線（n=3）

其中，S為溶脹率，W0為微丸初始質(zhì)量，Wt為溶脹過程中微丸不同時(shí)間點(diǎn)的質(zhì)量。

由圖2可見，在人工模擬胃液中，DimSDBaPct和Dim-BaPct均在1 h左右達(dá)到溶脹平衡。同時(shí)，固體分散體對(duì)于微丸的溶脹行為沒有顯著影響。

2.4 微丸漂浮性的測(cè)定

隨機(jī)選取100顆Dim-BaPct和100顆DimSDBaPct，分別放入有100 ml人工模擬胃液的錐形瓶中，并將錐形瓶置于恒溫水浴振蕩儀，設(shè)置轉(zhuǎn)速為75 r/min，溫度為37 ℃，分別在1，2，3，4，5，6，7，8，9 h觀察漂浮于液面的微丸數(shù)量，按公式計(jì)算漂浮率。

漂浮率（%）=漂浮的微丸數(shù)/100×100

Dim-BaPct和DimSD-BaPct在人工模擬胃液中持續(xù)9 h的漂浮率為96.33 %±1.15 %（n=3），Dim-BaPct和DimSD-BaPct均具有良好的漂浮性。固體分散體對(duì)微丸的漂浮性能沒有顯著影響。

2.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

以人工模擬胃液配制Dim溶液，經(jīng)紫外掃描確定Dim最大吸光度波長為283 nm，輔料在此波長處基本無吸收，因此以283 nm作為Dim的測(cè)定波長。精密稱取Dim 10.0 mg，置于50 ml量瓶中，加人工模擬胃液至刻度，制得儲(chǔ)備液。精密移取100，200，300，400，500，600，700 μl儲(chǔ)備液至5 ml量瓶中，用人工模擬胃液稀釋至刻度，搖勻，在283 nm波長處測(cè)定紫外吸收度（A）值，以A對(duì)相應(yīng)的濃度（C，μg/ml）做線性回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程：A=19.67C+0.0078（r=0.9991）。

2.6 體外釋放度的測(cè)定

取適量微丸，置于有100 ml人工模擬胃液的錐形瓶中，置于水浴恒溫振蕩儀，轉(zhuǎn)速75 r/min，溫度37 ℃，分別在0.5，1，2，3，4，5，6，9 h取出3 ml釋放介質(zhì)，同時(shí)補(bǔ)入同溫介質(zhì)3 ml。樣品在4000 r/min下離心10 min，取上清0.5 ml，用人工模擬胃液定容至5 ml，于283 nm處測(cè)定樣品的吸光度（A）值。按2.5項(xiàng)下標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程計(jì)算樣品中Dim濃度及微丸在不同時(shí)間點(diǎn)的累積釋放率。

2.6.1 Pct濃度對(duì)Dim-BaPct中藥物釋放行為的影響分別取4 %，7 %，10%Pct溶液10 ml，按2.1.1項(xiàng)下方法制備胃漂浮微丸（4%Dim-BaPct，7%Dim-BaPct，10%Dim-BaPct），測(cè)定Dim在人工模擬胃液中的累積釋放度。結(jié)果見圖3。3種微丸中的藥物在1 h之內(nèi)均基本釋放完全，不同濃密Pct交聯(lián)制備的載藥微丸在人工模擬胃液中釋藥無明顯差異，表明增加Pct濃度對(duì)Dim釋放曲線無顯著影響。產(chǎn)生這種現(xiàn)象最可能的原因是凝膠骨架結(jié)構(gòu)空隙較大，難以阻滯Dim從微丸中快速釋放。Dim-BaPct中的藥物釋放為擴(kuò)散型，酸易溶性小分子藥物在人工模擬胃液中表現(xiàn)為速釋。

圖3 Dim-BaPct在人工模擬胃液中釋放曲線（n=3）

2.6.2 L100用量對(duì)DimSD-BaPct釋藥行為的影響 為改善Dim-BaPct在人工模擬胃液中的藥物突釋，酸性條件下不溶的L100被選為載體材料用于制備Dim固體分散體。按1:1，2:1，3:1的載體材料與藥物摩爾比，分別精密稱取L100和Dim，按2.1.2項(xiàng)下方法制備DimSD-BaPct，測(cè)定藥物在人工模擬胃液中的累積釋放度。結(jié)果見圖4。

圖4 按不同L100:Dim制備的DimSD-BaPct在人工模擬胃液中的釋放曲線（n=3）

由圖4可見，隨著L100:Dim的質(zhì)量比增加，Dim釋放速率和累積釋放度均隨之下降，持續(xù)釋放時(shí)間超過6 h，表明L100固體分散體可有效延緩Dim在人工模擬溶液中的釋放，延長藥物釋放時(shí)間。造成該現(xiàn)象的可能原因是L100為腸溶性材料，能阻滯酸性溶液的滲入，減慢Dim在人工模擬胃液中的溶解。當(dāng)L100:Dim=1:1時(shí)，Dim 9 h的累積釋放率為55 %左右， L100:Dim=3:1時(shí)，9 h的累積釋放度下降至15 %左右，分析原因是Dim被L100固體分散體包埋較深，導(dǎo)致Dim難以從微丸中擴(kuò)散并釋放出來。L100的比例越高，累積最大釋放率越低。

2.6.3 L100、RLPO用量對(duì)DimSD-BaPct釋藥行為的影響 為提高DimSD-BaPct在人工模擬胃液中的最大藥物累積釋放率，親水性材料RLPO和酸性條件下不溶的L100共同作為載體材料用于制備Dim固體分散體。按1:1:1，1:1:2，1:1:3的比例，分別精密稱取L100、Dim和RLPO，按2.1.2項(xiàng)下方法制備DimSD-BaPct，考察Dim-SD-BaPct在人工模擬胃液中的釋放行為。結(jié)果見圖5。

圖5 不同用量L100、RLPO制備的DimSD-BaPct在人工模擬胃液中的釋放曲線（n=3）

由圖5可見，隨著RLPO用量的增加，Dim最大累積釋放率顯著提高。當(dāng)L100:Dim:RLPO=1:1:3，6 h的藥物累積釋放率可升高至70 %左右。RLPO是一種親水性材料，通過在固體分散體中添加RLPO，使人工模擬胃液更易滲入微丸內(nèi)部，藥物更容易從微丸中擴(kuò)散并釋放出來。

基于L00和RLPO的特性，通過調(diào)整固體分散體中兩種材料的比例，可按照治療需要和藥物性質(zhì)獲得理想的藥物釋放速率、藥物持續(xù)釋放時(shí)間和最大累積釋放率。

2.7 DimSD-BaPct釋放率-時(shí)間曲線模型擬合

取DimSD-BaPct（L100:Dim=1:1）、DimSDBaPct（L100:RLPO:Dim=1:1:1）和Dim-BaPct的藥物釋放數(shù)據(jù)，分別用零級(jí)、一級(jí)、Higuchi、Korsmeyer-Peppas釋放模型擬合，結(jié)果見表1。D i m-B a P c t 釋放曲線較符合一級(jí)釋放模型，擬合r值為0.99901。而以L100作為載體材料和聯(lián)用L100和RLPO作為載體材料所獲微丸的釋放曲線較符合Higuchi模型，DimSD-BaPct（L100:Dim=1:1）的擬合r值為0.99914，DimSDBaPct（L100:RLPO:Dim=1:1:1）的擬合r值為0.99855。

表1 DimSD-BaPct體外釋放數(shù)據(jù)的模型擬合

3 討論與結(jié)論

前期試驗(yàn)中，研究者分別用1 %，1.5 %，1.75 %，2 %，2.5 %碳酸氫鈉制備微丸并考察其漂浮性能。預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，5種微丸在外觀品質(zhì)和漂浮性能方面存在顯著差異。在漂浮性能方面，隨著碳酸氫鈉濃度從1 %升高至1.75 %，微丸9 h漂浮率從84 %提升至93 %，微丸具備了良好的漂浮性能。當(dāng)碳酸氫鈉濃度超過1.75 %后，微丸持續(xù)9 h的漂浮率均未超過94 %。在外觀品質(zhì)方面，當(dāng)碳酸氫鈉濃度小于1.75 %時(shí)，微丸成形性和一致性較好。碳酸氫鈉濃度超過1.75 %后，一部分微丸發(fā)生破裂，造成該現(xiàn)象原因可能是過多氣泡的產(chǎn)生使微丸不易成形，外觀一致性不佳。綜合考慮，選擇最優(yōu)碳酸氫鈉濃度為1.75 %。

本研究中采用的載體材料是低酯果膠，酯化度小于50 %。前期實(shí)驗(yàn)中分別用5 %，6 %，7 %，8 %，9 %果膠溶液制備微丸。結(jié)果顯示，果膠濃度大于8 %時(shí)，或小于6 %時(shí)，微丸的成形性均不理想。因此，選擇果膠溶液濃度為7 %。

載藥果膠鋇凝膠胃漂浮微丸，可實(shí)現(xiàn)藥物主要在胃部釋放，解決Dim溶解pH依賴性的問題，但果膠鋇凝膠微丸難以延遲酸易溶性藥物在酸性條件下的快速釋放。因此，在本次研究中，具備不同溶解特性的載體材料被用于制備載藥固體分散體，并用于制備載藥的胃漂浮微丸。這種多單元胃漂浮給藥系統(tǒng)具有較高的安全性、生物相容性及釋放可調(diào)節(jié)性，具有良好的應(yīng)用前景。