徐海龍，趙明波

（1. 威海市藍(lán)色經(jīng)濟(jì)研究院有限公司，山東 威海 264300；2. 威海市海洋生態(tài)經(jīng)濟(jì)研究院，山東 威海 264300）

鐵超負(fù)荷是一種漸進(jìn)性的、可危及生命的疾病，是頻繁輸血的并發(fā)癥。鐵超負(fù)荷的征象可能在10～20次輸血后即可呈現(xiàn)。如果不加以治療，體內(nèi)過(guò)量的鐵會(huì)損害肝臟、心臟和內(nèi)分泌腺[1]。地拉羅司，別名去鐵斯若（商品名：Exjade），化學(xué)名4-[3, 5-雙（2-羥基苯基）-[1, 2, 4]三唑-1-基]苯甲酸，由瑞士諾華制藥公司研究開發(fā)，于2005年11月獲得美國(guó) FDA 批準(zhǔn)，用于2歲及以上因輸血導(dǎo)致的慢性鐵過(guò)載患者。2012年12月去鐵斯若獲歐盟委員會(huì)批準(zhǔn)，用于因甲磺酸去鐵胺療法禁忌或不足而需螯合療法的10歲及以上非輸血依賴性地中海貧血（NTDT）綜合征患者慢性鐵過(guò)載的治療。2013年1月23日FDA批準(zhǔn)其新適應(yīng)癥，用于10歲及以上NTDT患者的慢性鐵過(guò)載治療，以降低與鐵有關(guān)的發(fā)病率和死亡率。4-[3, 5-雙（2-羥基苯基）-[1,2, 4]三唑-1-基]苯甲酸還可用于治療血色素沉著病，被認(rèn)為是鐵螯合治療領(lǐng)域的重大突破[2-7]。

去鐵斯若的合成工藝是以水楊酸、水楊酰胺為起始原料，經(jīng)酰胺化-縮合、加成-消除反應(yīng)得到產(chǎn)品[8-11]。質(zhì)量控制研究中發(fā)現(xiàn)一類與去鐵斯若結(jié)構(gòu)相似的衍生物[12]，但這類雜質(zhì)的合成方法未見文獻(xiàn)報(bào)道，故對(duì)這類雜質(zhì)進(jìn)行合成研究，以便作為雜質(zhì)對(duì)照品，為去鐵斯若原料藥的質(zhì)量控制提供指導(dǎo)和幫助。

1 儀器與試劑

1.1 儀器

Agilent 1260高效液相色譜儀（美國(guó)Agilent公司）；Agilent 6460液質(zhì)聯(lián)用儀（美國(guó)Agilent公司）；Varian INOVA-300 核磁共振波譜儀（美國(guó)瓦里安公司）。

1.2 試劑

水楊酸（鎮(zhèn)江高鵬藥業(yè)，純度：＞99.0 %）；水楊酰胺（鎮(zhèn)江高鵬藥業(yè)，純度：＞98.5 %)；對(duì)肼基苯甲酸（常州市陽(yáng)光藥業(yè)，純度：＞98.5 %）；氯化亞砜，吡啶，三乙胺，二甲苯，碳酸氫鈉，氫氧化鈉，甲醇，乙醇，異丙醇（分析純，國(guó)藥集團(tuán)）。

2 方法與結(jié)果

2.1 合成路線

去鐵斯若衍生物結(jié)構(gòu)及合成路線及見圖1、圖2。

圖1 去鐵斯若衍生物結(jié)構(gòu)式

圖2 去鐵斯若衍生物的合成路線

2.2 1, 3-噁嗪酮（6）的制備

取水楊酸（360 mmol）和水楊酰胺（325 mmol），溶于100 ml二甲苯中，室溫下加入5 ml吡啶，120 ℃下加熱至固體完全溶解，然后緩慢滴加SOCl2（500 mmol），滴加速度0.1～0.2 ml/min，滴加完成后體系140 ℃下回流3 h，TLC（展開劑：苯:石油醚:冰醋酸:甲醇=120:60:10:2）檢測(cè)反應(yīng)完成，待反應(yīng)液冷卻后過(guò)濾，無(wú)水乙醇（300 ml×2）洗滌，60 ℃烘干，得到50 g淺黃色固體化合物6。采用HPLC [色譜柱：Hypersil Hypersil BDS C18，流動(dòng)相乙腈-1 %醋酸緩沖液（35:65），流速：1 ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)：245 nm，柱溫：15 ℃] 測(cè)定化合物6純度。

2.3 4-[3-(2-羥基苯酰氧基苯基)-5-(2-羥基苯基)-[1,2, 4]三唑-1-基]苯甲酸（2）的制備

將水楊酸（200 mmol）溶于200 ml二甲苯中，再加入幾滴DMF，28～35 ℃下緩慢滴加SOCl2（250 mmol），滴加完成后繼續(xù)反應(yīng)1 h，再將化合物6（200 mmol）緩慢加入上述反應(yīng)液中，升溫至65～70 ℃反應(yīng)8 h，反應(yīng)完成后減壓蒸餾得固體產(chǎn)物，然后加入600 ml無(wú)水乙醇攪拌、過(guò)濾，三乙胺調(diào)節(jié)pH 4.5～5.5，減壓濃縮，然后將化合物3（對(duì)肼基苯甲酸，150 mmol）加入上述濃縮液中，添加400 ml甲醇，反應(yīng)溫度80～100 ℃，反應(yīng)3 h ，待反應(yīng)液冷卻后直接過(guò)濾，甲醇洗滌（200 ml×2），得到淡黃色固體，將其溶于異丙醇中，加入5 g活性炭，加熱回流1 h，趁熱過(guò)濾脫色，濾液靜置沉淀，減壓抽濾，即得30 g高純度去鐵斯若衍生物（2）。純度99.93 %[HPLC面積歸一化法：色譜柱：Symmetry Shield C18，流動(dòng)相：0.05 mol/L磷酸二氫鈉-乙腈（55:45），流速：1 ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)：245 nm，柱溫30 ℃]；MS（ESI）m/z：494.2[(M+H)+]；1H NMR（300 MHz，DMSO-d6）：δ6.99（d，1H），7.02（m，1H），7.30（m，2H），7.42（m，2H），7.54（d，1H），7.60（d，1H），7.70（m，2H），7.80（d，2H），8.01（d，1H），8.10（d，2H），8.31（br，1H），12.35（br，1H）。

2.4 4-[3-(2-羥基苯酰氧基苯基)-5-(2-羥基苯基)-[1,2, 4]三唑-1-基]苯甲酸甲酯的制備

將制備得到的化合物2（20 mmol）溶解于100 ml無(wú)水甲醇中，25 ℃下緩慢滴加1 ml濃硫酸，滴加完畢后，油浴100 ℃加熱回流7 h，反應(yīng)結(jié)束后將混合液體冷卻至室溫，倒入去離子水中，靜置沉淀，減壓抽濾，得到白色固體，甲醇重結(jié)晶，過(guò)濾，烘干，即得8 g白色粉末狀最終產(chǎn)物。純度99.80 %[HPLC面積歸一化法：色譜柱：Symmetry Shield C18，流動(dòng)相：0.05 mol/L磷酸二氫鈉-乙腈（55:45），流速：1 ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)：245 nm，柱溫30 ℃]；MS（ESI）m/z：508.1[(M+H)+]；1H NMR（300 MHz，DMSO-d6）：δ3.97（s，3H），6.98（d，1H），7.20（m，1H），7.29（m，2H），7.62（m，2H），7.40（m，2H），7.76（d，2H），7.80（d，2H），7.92（br，1H），7.99（d，2H）。

2.5 4-[3-(2-羥基苯酰氧基苯基)-5-(2-羥基苯基)-[1,2, 4]三唑-1-基]苯甲酸乙酯的制備

將制備的化合物2（20 mmol）溶解于100 ml無(wú)水乙醇中，25 ℃下緩慢滴加1 ml濃硫酸，待滴加完畢后，油浴100 ℃加熱回流7 h，反應(yīng)結(jié)束后將混合液體冷卻至室溫，倒入去離子水中，靜置沉淀，減壓抽濾，得到白色固體，乙醇重結(jié)晶，過(guò)濾烘干，即得9 g白色粉末狀產(chǎn)物。純度99.70 %[HPLC面積歸一化法：色譜柱：Symmetry Shield C18，流動(dòng)相：0.05 mol/L磷酸二氫鈉-乙腈（55:45），流速：1 ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)：245 nm，柱溫30 ℃]；MS（ESI）m/z：522.1[(M+H)+]；1H NMR（300 MHz，DMSO-d6）：δ1.37（t，3H），4.33（q，2H），6.95（d，2H），7.24（m，2H），7.42（m，1H），7.63（d，1H），7.75（d，2H），7.95（d，2H），7.87（br，1H），8.11（d，1H）。

3 結(jié)論

本文以水楊酸、水楊酰胺、對(duì)肼基苯甲酸等為原料，經(jīng)酰胺化-縮合、加成-消除、提純等步驟合成了一系列去鐵斯若衍生物，并通過(guò)MS、1H MNR方法進(jìn)行了結(jié)構(gòu)確證。該工藝簡(jiǎn)單合理，可操作性強(qiáng)，制得的產(chǎn)品純度達(dá)99.5 %以上，可作為藥物去鐵斯若的雜質(zhì)對(duì)照品。