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        紅花續(xù)斷膏的皮膚安全性研究

        2023-05-11 08:25:04韓苗苗李君霞劉金磊趙曉輝
        食品與藥品 2023年2期
        關(guān)鍵詞:試藥紅斑紅花

        韓苗苗,李君霞,劉金磊,趙曉輝*

        (1. 山東明仁福瑞達(dá)制藥股份有限公司,山東 濟(jì)南 250104;2. 山東古金中醫(yī)藥科技有限公司,山東 濟(jì)南 250104)

        紅花續(xù)斷膏為紅花、續(xù)斷、蜈蚣、象皮、血竭、川烏、草烏等多味中藥制成的黑膏藥,具有活血化瘀,續(xù)筋接骨,消腫止痛,補(bǔ)益肝腎之功,對骨折后愈合具有促進(jìn)作用。本研究采用家兔、大鼠動物試驗(yàn)對紅花續(xù)斷膏的皮膚刺激性、皮膚過敏性進(jìn)行研究,探討其皮膚安全性,為臨床用藥提供理論依據(jù)。

        1 儀器與材料

        1.1 儀器

        HWL-02D全光譜燈(霍尼韋爾)。

        1.2 試藥

        紅花續(xù)斷膏 (山東古金中醫(yī)藥科技有限公司,批號:20200818);空白基質(zhì)(由麻油、鉛丹熬制而成,山東古金中醫(yī)藥科技有限公司);2, 4-二硝基氯苯(DNCB,北京化工廠,批號:20200710);硫化鈉(分析純,天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司,批號:20200109);無水乙醇(分析純,天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司,批號:20190820);麻油(食品級,聊城市金水城油脂食品有限公司,批號:200501)。

        1.3 動物

        新西蘭兔,普通級,雌雄各2只,共4只,2.3~2.8 kg,濟(jì)南西嶺角養(yǎng)殖繁育中心提供,許可證號:SCXK(魯)2015 0001;健康SD大鼠,SPF級,體重200~220 g,雌雄各半,濟(jì)南市朋悅實(shí)驗(yàn)動物繁育有限公司提供,許可證號:SCXK(魯)20190003;飼養(yǎng)環(huán)境:恒溫26 ℃,相對濕度60 %。

        2 方法與結(jié)果

        2.1 家兔皮膚刺激性實(shí)驗(yàn)

        取新西蘭家兔4只,給藥前24 h對其背部脊柱兩側(cè)脫毛,面積約為5 cm×10 cm(相當(dāng)于家兔體表面積的10 %),隨機(jī)分組;采用同體左右側(cè)自身對比法,每只動物左側(cè)背部皮膚給予空白基質(zhì)作為對照組,右側(cè)背部皮膚給予供試品作為供試品組。

        將膏藥加熱,溫度適宜后,貼敷于備皮處,用紗布、膠帶固定。每只動物分籠飼養(yǎng)。空白對照組、供試品組均給藥4次,每周貼敷1次,1次貼敷7日,連續(xù)4周持續(xù)貼敷[1-3]。

        實(shí)驗(yàn)期間每周記錄動物體重情況。觀察給藥前,給藥1,2,3周去除殘留藥物后1 h,以及給藥4周去除殘留藥物后1,24,48,72 h的皮膚情況。肉眼觀察皮膚在各時間點(diǎn)的刺激反應(yīng)包括:紅斑、水腫、色素沉著、出血、皮膚粗糙、皮膚菲薄,并對紅斑、水腫,按表1評分。計算每一觀察時間點(diǎn)各項(xiàng)分值,然后計算皮膚刺激強(qiáng)度分值,按表2評價刺激強(qiáng)度[2]。

        表1 皮膚刺激反應(yīng)評分標(biāo)準(zhǔn)

        表2 皮膚刺激強(qiáng)度評價標(biāo)準(zhǔn)

        實(shí)驗(yàn)期間動物體重穩(wěn)定增長(見表3),未見明顯毒副作用。在全光譜燈光下肉眼觀察皮膚反應(yīng)。給藥前動物皮膚未見異常。給藥1,2,3周去除殘留藥物后1 h及給藥4周并去除殘留藥物后1,24,48,72 h,4只實(shí)驗(yàn)兔均未見色素沉著、出血、皮膚粗糙、皮膚菲?。蝗コ龤埩羲幬锖? h可見輕度紅斑或水腫,癥狀不持久。停藥24,48,72 h后,空白基質(zhì)組無刺激癥狀,供試品組皮膚癥狀恢復(fù)正常。供試品刺激強(qiáng)度積分為0.3125,該值介于無刺激判定標(biāo)準(zhǔn)0~0.49范圍,依據(jù)皮膚刺激強(qiáng)度評價標(biāo)準(zhǔn),認(rèn)為供試品對皮膚無刺激性,結(jié)果詳見表4、表5。

        表3 實(shí)驗(yàn)期間兔體重/kg

        表4 空白對照組皮膚評分統(tǒng)計結(jié)果

        表5 供試品組皮膚評分統(tǒng)計結(jié)果

        2.2 大鼠皮膚刺激性實(shí)驗(yàn)

        取30只SD大鼠,隨機(jī)分為空白組、觀察組(完整皮膚組和破損皮膚組), 每組10只。3組均于實(shí)驗(yàn)前24 h將大鼠脊柱兩側(cè)毛用8 %硫化鈉淀粉糊脫凈,去毛面積約為體表面積的10 %。去毛24 h后,破損皮膚組大鼠用細(xì)砂紙?jiān)诿撁课辉斐刹羵?,以皮膚出現(xiàn)輕度密集滲血點(diǎn)為度。

        空白組使用空白基質(zhì),供試品組局部貼敷紅花續(xù)斷膏,用紗布、膠帶固定,貼敷7 d,7 d后用麻油擦凈藥物,觀察藥物去除后1,24,48,72 h皮膚刺激反應(yīng),查看是否出現(xiàn)紅斑及紅腫,并觀察恢復(fù)情況。結(jié)果見表6。

        表6 大鼠皮膚刺激反應(yīng)實(shí)驗(yàn)評分結(jié)果

        大鼠皮膚刺激反應(yīng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,空白組、供試品組(完整皮膚組和破損皮膚組)部分大鼠皮膚在1,24,48,72 h出現(xiàn)紅斑和水腫,刺激反應(yīng)平均分值分別為0.30,0.37,0.43,0.30,表明供試品無刺激性。

        2.3 大鼠皮膚過敏實(shí)驗(yàn)

        大鼠背部采取常規(guī)脫毛處理,局部碘伏消毒,保持皮膚完整,無損傷。剃毛面積3 cm×3 cm。取符合要求的大鼠30只,隨機(jī)分為空白組,DNCB組和供試品組,每組10只。各組大鼠分別用相應(yīng)試藥進(jìn)行去毛區(qū)皮膚致敏接觸和激發(fā)接觸[2-6]。

        取空白基質(zhì)、DNCB 0.2 ml和供試品,分別涂在空白組、DNCB組和供試品組的大鼠背部左側(cè)去毛區(qū),用紗布、膠帶固定試藥留置6 h。第7,14 d各組大鼠以同樣的方法重復(fù)施用實(shí)驗(yàn)試藥。

        于末次致敏接觸實(shí)驗(yàn)試藥后14 d,用與致敏接觸相同的方法,分別涂在相應(yīng)組別大鼠右側(cè)去毛區(qū),用紗布、膠帶固定試藥留置。6 h后用麻油擦去試藥,觀察并記錄擦去實(shí)驗(yàn)試藥后0,24,48,72 h各組大鼠皮膚過敏反應(yīng)情況。皮膚過敏反應(yīng)評分標(biāo)準(zhǔn)見表7,藥物皮膚致敏性評價標(biāo)準(zhǔn)見表8,各組評分結(jié)果見表9。

        表7 皮膚過敏反應(yīng)評分標(biāo)準(zhǔn)

        表8 皮膚致敏性評價標(biāo)準(zhǔn)

        表9 大鼠皮膚過敏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)評分結(jié)果

        結(jié)果顯示空白組、供試品組及DNCB組大鼠皮膚72 h內(nèi)均未出現(xiàn)水腫,其中空白組擦除試藥48 h后,有1只大鼠皮膚出現(xiàn)紅斑,72 h內(nèi)未消失,無致敏性(致敏率為10 %);供試品組擦除試藥48 h后,有1只大鼠皮膚出現(xiàn)紅斑,72 h內(nèi)未消失,無致敏性(致敏率為10 %);DNCB組擦除試藥24 h后,有1只大鼠皮膚出現(xiàn)紅斑,48 h后有2只大鼠皮膚出現(xiàn)紅斑,72 h內(nèi)未消失,輕度致敏(致敏率為30 %)。研究表明紅花續(xù)斷膏對大鼠皮膚致敏性與空白組相當(dāng),DNCB有輕度致敏性。

        3 結(jié)論

        研究結(jié)果顯示,紅花續(xù)斷膏對兔皮膚無刺激性(評分<0.49),對大鼠皮膚無刺激性(評分<0.49)。紅花續(xù)斷膏對大鼠稍有致敏作用(致敏率為10 %),停藥后致敏反應(yīng)消失,皮膚恢復(fù)正常。研究顯示紅花續(xù)斷膏皮膚局部用藥有較好的安全性。

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