毛曉露 盧忠心 陳 莉

武漢市中心醫(yī)院，1檢驗科；2血液科，武漢430014

目的：真性紅細胞增多癥（PV）患者的骨髓中同時存在良性造血祖細胞和惡性造血祖細胞。惡性紅細胞克隆可以在體外無外源性促紅細胞生成素（EPO）存在的情況下，形成紅細胞集落形成單位（BFU-E）。本實驗觀察甲磺酸伊馬替尼對PV患者自發(fā)性紅細胞生成的抑制作用。方法：15例PV患者（PV組），其中14例采集外周血2ml，1例采集骨髓2ml，另選10例無血液病的健康人（對照組），采集外周血2ml，所有樣本均以EDTA-K2抗凝。用密度梯度法分離對照組和PV組外周血和骨髓的單個核細胞（PBMCs），將PBMCs濃度調(diào)整為1×105個／ml，分別在有甲磺酸伊馬替尼（10μM）的半固體培養(yǎng)基和無甲磺酸伊馬替尼的半固體培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)。經(jīng)形態(tài)學分析和臺盼藍染色分析細胞生長狀態(tài)和死亡細胞數(shù)量。結果：1例骨髓中PBMCs的體外實驗表明，BFU-E生長被甲磺酸伊馬替尼完全抑制。14例PV患者外周血中PBMCs均可在無EPO時形成紅細胞克隆，其中6例BFU-E生長部分被抑制，另8例完全被抑制。加入甲磺酸伊馬替尼（10μM）后，BFU-E平均數(shù)較無甲磺酸伊馬替尼時顯著減少（P＜0.05）。將PV細胞與甲磺酸伊馬替尼（10μM）反應24h和48h，不能有效抑制自發(fā)性的BFU-E生長。將反應時間延長到96h，BFU-E平均數(shù)顯著減少（P＜0.05），表明與甲磺酸伊馬替尼接觸導致自發(fā)性的BFU-E生長抑制與反應時間相關。結論：甲磺酸伊馬替尼可以在體外阻斷或者明顯抑制PV患者自身BFU-E的形成，提示PV的發(fā)病機理可能與某種未知的激酶有關。