李 輝 趙欣瑤 趙苗苗 甄 嬌 賈可惠 康可心 李富鵬
(1 衡水學院濕地保護與研究中心 河北 衡水 053000; 2 衡水學院生命科學系 河北 衡水 053000)
土壤與微生物的相互作用在生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)循環(huán)和能量流動中起著至關(guān)重要的作用[1]。土壤作為微生物生命活動的場所,土壤結(jié)構(gòu)和特性都會影響微生物群落的類型、數(shù)量、分布和土壤微生物活性[2~3]。有研究發(fā)現(xiàn),在氮、磷含量較高的采樣點,對應(yīng)的細菌豐度也較高,氮磷含量是影響廈門島周圍海域浮游細菌群落的關(guān)鍵因子[4]。土壤微生物作為生態(tài)系統(tǒng)食物鏈中的主要分解者,對維持衡水湖濕地生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)循環(huán)和能量流動起著重要作用。本文采用高通量測序的方法,研究衡水湖濕地土壤理化性質(zhì)對細菌群落多樣性的影響,旨在為衡水湖土壤質(zhì)量狀況與土壤微生物互相作用研究提供一定的數(shù)據(jù)支持。
1.1 樣品采集。在衡水湖濕地荷花公園選取5 個采樣點,分別采集0 ~5 cm、5 ~10 cm、10 ~15 cm 土層的土壤,將3 個土層的土壤混勻,將混勻的土樣裝入滅菌的自封袋中并盡快運回實驗室。取一部分土壤,置于-80 ℃冰箱保存,另取一小部分土樣用于測定氨態(tài)氮和硝態(tài)氮的含量,剩下的土樣自然風干后研磨,用于測定土壤理化指標。
1.2 土壤理化性質(zhì)測定和土壤微生物多樣性的測序方法。土壤理化性質(zhì)測定參照《土壤農(nóng)化分析》[5]進行。土壤細菌總DNA 的提取和純化參照DNeasyPowerSoilPro Kit(QIAGEN,美國)。測序由上海美吉生物醫(yī)藥科技有限公司完成。
2.1 不同土壤樣品的理化性質(zhì)分析。衡水湖濕地荷花公園區(qū)域的不同采樣點土壤,其理化性質(zhì)差異顯著(P<0.05)。由表1 可知,3 號土壤樣品中總磷、總氮、有效磷、有效鉀和有機質(zhì)的含量最高,分別為0.083%、0.213%、169.027 mg/kg、505.541 mg/kg 和3.358%,2 號土壤樣品中氨態(tài)氮的含量最高,為14.883 mg/kg,5 號土壤樣品中硝態(tài)氮的含量最高,為13.452 mg/kg,4 號土壤樣品中全鉀的含量最高,為1.823%;2 號土壤樣品中總磷、總氮、有效磷、有效鉀和有機質(zhì)含量最低,分別為0.060%、0.062%、20.007 mg/kg、155.130 mg/kg 和0.841%,3 號土壤樣品中氨態(tài)氮和全鉀含量最低,分別為9.989 mg/kg 和1.565%,4 號土壤樣品中硝態(tài)氮的含量最低,為3.101 mg/kg。這可能是與采樣地點的環(huán)境有關(guān),3 號和5 號采樣點常年生長著植物,一到秋冬季植物的莖葉枯萎腐爛,經(jīng)土壤微生物分解成可溶性的小分子物質(zhì),從而提高了土壤肥力,導致3 號和5 號土壤樣品中氮磷含量偏高。2 號采樣點是常年裸露的土壤,沒有植被覆蓋。4 號和1 號采樣點位于衡水湖荷花公園湖水的邊上,周圍有漂浮的植物莖葉。
表1 不同土壤樣品理化性質(zhì)分析
2.2 不同土壤樣品中細菌群落在門水平上的相對豐度值分析。衡水湖濕地荷花公園5 個土壤樣品主要有13個細菌門組成,如表2 所示。1 號樣品變形菌門相對豐度值最高,達到35.27%,2 號和5 號變形菌門相對豐度值最低,均小于19%。變形菌門屬于一大類細菌群落,其中α-變形菌多參與固氮作用,δ-變形菌多參與土壤氮、磷、硫及有機質(zhì)的循環(huán)[6],由此可見,變形菌門相對豐度受土壤中N、P 和有機質(zhì)等多種因素影響。擬桿菌門在1 號、3 號和5 號樣品中相對豐度值較高(13%~19%),在2 號和4 號樣品中相對豐度值較低(3%~8%)。擬桿菌門主要分布在未被污染的土壤、水體或者表層沉積物中[7],可見,衡水湖土壤未被污染,仍保持其原有的生態(tài)環(huán)境。2 號、3 號和4號樣品中綠彎菌門相對豐度值較高(11%~19%),1 號和5 號樣品中綠彎菌門相對豐度值在4%~6%。有研究發(fā)現(xiàn),綠彎菌門廣泛分布于淡水湖泊的表層沉積物中,尤其是在富營養(yǎng)化環(huán)境中含量較豐富[8]。浮霉菌門在2號、3 號和4 號樣品中相對豐度值較高(9%~14%),1號和5 號樣品中浮霉菌門相對豐度值較低(1%~3%),有研究表明,浮霉菌門在濕地氮循環(huán)中扮演重要角色,具有厭氧氨氧化作用的生態(tài)學功能[9]。土壤細菌群落相對豐度值主要受氮、磷和有機質(zhì)含量的影響。
表2 不同土壤樣品細菌群落在門水平上的相對豐度值
本文選取衡水湖濕地荷花公園土壤作為研究對象,研究土壤理化性質(zhì)對其細菌多樣性的影響。結(jié)果表明,不同采樣點土壤理化性質(zhì)差異顯著(P<0.05);5個土壤樣品主要有13 個細菌門組成,優(yōu)勢菌門主要有變形桿菌門(Proteobacteria)、放線菌門(Actinobacteriota)、擬桿菌門(Bacteroidota)、綠彎菌門(Chloroflexi)、厚壁菌門(Firmicutes)、浮霉菌門(Planctomycetota)、酸桿菌門(Acidobacteriota)等。5 個樣品在細菌群落組成結(jié)構(gòu)上相似,但細菌群落相對豐度存在較大的差異,這主要受土壤中有機質(zhì)、N 和P 的含量影響。