林杰, 羅瑞英△, 林英娜, 吳露楠, 劉國興

寧德師范學(xué)院附屬寧德市醫(yī)院 1心血管內(nèi)科, 2病案室(福建寧德 352100)

慢性心力衰竭(CHF)是心血管疾病的終末期，病因多樣，發(fā)病機(jī)制復(fù)雜[1]。雖然醫(yī)療水平的提高延長了心血管疾病患者的生存期，但大多數(shù)患者最終會(huì)發(fā)展為CHF[1-2]。研究顯示，左心室肥厚(LVH)是CHF發(fā)生發(fā)展的重要病理基礎(chǔ)，因此預(yù)防LVH發(fā)生對(duì)改善CHF患者預(yù)后有重要價(jià)值[3]。長鏈非編碼RNA肺癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物1(lncRNA LUCAT1)在癌癥發(fā)生發(fā)展中的作用已被廣泛報(bào)道，在肺癌細(xì)胞中表達(dá)水平顯著升高[4]。Li等[5]研究顯示，CHF患者中l(wèi)ncRNA LUCAT1表達(dá)降低，且與心肌細(xì)胞增殖和凋亡有關(guān)。然而lncRNA LUCAT1與CHF患者心功能及LVH的關(guān)系仍需進(jìn)一步探討。因此，本研究著重探究lncRNA LUCAT1在不同心功能CHF患者中的表達(dá)情況及其與CHF患者發(fā)生LVH的相關(guān)性，以期為CHF的臨床診療提供新思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2021年2月至2022年3月因CHF于本院住院的187例患者為研究對(duì)象，根據(jù)美國紐約心臟病協(xié)會(huì)(NYHA)心功能分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)[6]將患者分為NYHA Ⅰ～Ⅱ級(jí)組67例、NYHA Ⅲ級(jí)組72例和NYHA Ⅳ級(jí)組48例，其中NYHA Ⅰ～Ⅱ級(jí)組男30例，女37例，平均年齡(63.92±11.34)歲；NYHA Ⅲ級(jí)組男45例，女27例，平均年齡(64.89±11.44)歲；NYHA Ⅳ級(jí)組男28例，女20例，平均年齡(65.32±11.96)歲。同時(shí)收集CHF患者臨床資料見表1。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審批通過(NSYKYLL-2023-001)，研究對(duì)象均知情同意。

納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)患者均符合CHF診斷標(biāo)準(zhǔn)[7-8]；(2)臨床資料齊全，年齡>18周歲者；(3)可進(jìn)行超聲等影像學(xué)檢查，無禁忌證者。

排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)有呼吸衰竭、休克、急性心肌梗死、急性感染疾病等急性疾病或進(jìn)行過冠脈搭橋等大型手術(shù)治療者；(2)伴有慢性腎臟疾病、慢性呼吸系統(tǒng)疾病、自身免疫疾病等慢性疾病者；(3)伴有結(jié)核、甲狀腺功能亢進(jìn)癥等疾病者；(4)近1個(gè)月內(nèi)有糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑治療史者。

表1 CHF患者臨床資料

1.2 方法

1.2.1 血清lncRNA LUCAT1水平檢測(cè) 收集入院24 h內(nèi)CHF患者靜脈血樣并置于干燥離心管中，待靜置30 min后離心收集血清，置于干燥EP管中，并放于-80℃保存。取血清，采用Trizol試劑盒(上海源葉生物科技有限公司，貨號(hào)：R21086-)對(duì)血清中總RNA進(jìn)行提取，并用MIULAB WM01H001324紫外分光光度計(jì)(杭州米歐儀器有限公司)檢測(cè)樣品純度和濃度(A260/A280≥1.8為合格)，參照逆轉(zhuǎn)錄試劑盒(德國QIAGEN公司，貨號(hào)：205 311)逆轉(zhuǎn)錄合成模板cDNA。采用ABI StepOnePlus熒光定量PCR(qRT-PCR)儀(新加坡Thermo Fisher公司)進(jìn)行qRT-PCR反應(yīng)。lncRNA LUCAT1內(nèi)參為GAPDH，由上海生工生物工程有限公司合成，各樣品均設(shè)置3個(gè)復(fù)孔，用2-ΔΔCT法計(jì)算樣品中l(wèi)ncRNA LUCAT1相對(duì)表達(dá)量，引物序列見表2。

表2 引物序列

1.2.2 LVH評(píng)估及分組 依據(jù)LVH診斷標(biāo)準(zhǔn)[9]：男性LVMI≥125 g/m2，女性LVMI≥120 g/m2，診斷為CHF發(fā)生LVH。根據(jù)是否發(fā)生LVH將CHF患者分為非LVH組119例和LVH組68例。

2 結(jié)果

2.1 不同心功能分級(jí)CHF患者血清lncRNA LUCAT1水平比較 NYHA Ⅳ級(jí)組CHF患者血清lncRNA LUCAT1水平顯著低于NYHA Ⅰ～Ⅱ級(jí)組和NYHA Ⅲ級(jí)組，NYHA Ⅲ級(jí)組血清lncRNA LUCAT1水平顯著低于NYHA Ⅰ～Ⅱ級(jí)組(P<0.05)。見表3。

表3 不同心功能分級(jí)CHF患者血清lncRNA LUCAT1水平比較

2.2 LVH組與非LVH組臨床資料比較 LVH組與非LVH組性別、年齡、BMI、LDL-C、TC、FPG比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，心功能分級(jí)、LVEF、LVMI比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

2.3 LVH組與非LVH組血清lncRNA LUCAT1水平比較 LVH組血清lncRNA LUCAT1水平顯著低于非LVH組(P<0.05)。見表5。

2.4 CHF合并LVH患者血清lncRNA LUCAT1水平與臨床資料的相關(guān)性 Pearson及Spearman相關(guān)分析結(jié)果顯示，CHF合并LVH患者血清lncRNA LUCAT1水平與LVEF呈正相關(guān)(r=0.508，P<0.05)，與心功能分級(jí)、LVMI呈負(fù)相關(guān)(r=-0.524、-0.512，P<0.05)。見表6。

表4 LVH組與非LVH組臨床資料比較

表5 LVH組與非LVH組血清lncRNA LUCAT1水平比較

2.5 血清lncRNA LUCAT1水平對(duì)CHF患者發(fā)生LVH的預(yù)測(cè)效能 繪制ROC曲線分析血清lncRNA LUCAT1水平對(duì)CHF患者發(fā)生LVH的預(yù)測(cè)效能，結(jié)果顯示，血清lncRNA LUCAT1水平預(yù)測(cè)CHF患者發(fā)生LVH的曲線下面積(AUC)為0.866(95%CI: 0.814～0.917)，臨界值為0.70，敏感度為79.0%，特異度為83.8%。見圖1。

2.6 CHF患者發(fā)生LVH的多因素logistic回歸分析 以CHF患者是否發(fā)生LVH為因變量，以lncRNA LUCAT1、心功能分級(jí)、LVEF、LVMI為自變量行多因素logistic回歸分析，結(jié)果顯示，lncRNA LUCAT1是CHF患者發(fā)生LVH的保護(hù)因素(P<0.05)，心功能分級(jí)是CHF患者發(fā)生LVH的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見表7。

圖1 血清lncRNA LUCAT1水平預(yù)測(cè)CHF患者發(fā)生LVH的ROC曲線

表7 CHF患者發(fā)生LVH的多因素logistic回歸分析

3 討論

盡管CHF藥物和非藥物治療已取得極大進(jìn)展，然而其發(fā)病率和病死率仍較高，已被認(rèn)為是最重要的社會(huì)經(jīng)濟(jì)問題[10-11]。因此，在當(dāng)今時(shí)代，需要更好地理解CHF的病理生理學(xué)，并使用各種策略進(jìn)行更好的預(yù)后評(píng)估。LVH、NYHA心功能分級(jí)、LVEF等均是CHF經(jīng)典且重要的預(yù)后變量[12]。LVH是一種左心室質(zhì)量異常增加的病理狀態(tài)，其發(fā)病機(jī)制涉及多方面，目前還存在許多爭議[13]。LVH表現(xiàn)出的舒張功能不全可為CHF患者疾病進(jìn)展和不良預(yù)后提供線索[14]。

本研究結(jié)果顯示，NYHA Ⅳ級(jí)CHF患者血清lncRNA LUCAT1表達(dá)量低于NYHA Ⅰ～Ⅱ級(jí)和NYHA Ⅲ級(jí)CHF患者，NYHA Ⅲ級(jí)CHF患者血清lncRNA LUCAT1表達(dá)量低于NYHA Ⅰ～Ⅱ級(jí)CHF患者。表明隨著CHF疾病進(jìn)展，血清lncRNA LUCAT1表達(dá)降低，lncRNA LUCAT1可能參與CHF病程進(jìn)展。目前越來越多證據(jù)表明，CHF患者中存在lncRNA功能障礙[15]。lncRNA是一種廣泛參與高血壓、心臟發(fā)育、心肌梗死、動(dòng)脈粥樣硬化和動(dòng)脈瘤病理過程的非編碼RNA[16]。多個(gè)研究顯示，lncRNA LUCAT1可通過靶向調(diào)節(jié)miRNA對(duì)H2O2或高糖誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷、炎癥、存活和凋亡起到保護(hù)作用[17-18]。Tao等[19]研究表明，lncRNA LUCAT1基因敲低后心肌細(xì)胞存活率降低，心功能受損，心肌梗死后纖維化增加。據(jù)此推測(cè)lncRNA LUCAT1參與CHF疾病進(jìn)展可能同樣是通過調(diào)控心肌細(xì)胞存活和凋亡，影響患者心功能受損，進(jìn)而在病程進(jìn)展過程中發(fā)揮重要作用。

研究表明，左心室后負(fù)荷不斷增加會(huì)導(dǎo)致左心室代償性做功增加其收縮力，以此來克服或降低外周循環(huán)血管阻力，進(jìn)而引起LVH[20]。本研究結(jié)果顯示，與未合并LVH的CHF患者相比，合并LVH的CHF患者LVEF較低，LVMI較高，與劉姍姍等[3]研究結(jié)果一致。CHF患者中LVEF異常降低、LVMI異常升高提示其心功能受損加重，心室負(fù)荷增加，合并LVH的風(fēng)險(xiǎn)增加。而本研究指標(biāo)lncRNA LUCAT1與LVEF、LVMI均呈顯著相關(guān)性。表明lncRNA LUCAT1表達(dá)量與患者心功能密切相關(guān)。而進(jìn)一步ROC曲線及多因素logistic回歸分析結(jié)果表明，lncRNA LUCAT1不僅可能影響LVH的發(fā)生，還在CHF患者發(fā)生LVH中具有較高的預(yù)測(cè)效能，可作為反映LVH發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的預(yù)估指標(biāo)，當(dāng)血清lncRNA LUCAT1表達(dá)量低于0.70時(shí)，LVH發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)較高。

綜上所述，血清lncRNA LUCAT1表達(dá)水平與CHF患者心功能及LVH均具有顯著相關(guān)性，且可作為預(yù)測(cè)CHF患者發(fā)生LVH的潛在指標(biāo)，今后可作為CHF患者預(yù)后標(biāo)志物進(jìn)一步探究。然而本研究為單中心臨床回顧性研究，納入的病例較為單一，且涉及范圍局限，無法證明lncRNA LUCAT1臨床作用的準(zhǔn)確性。今后可在本研究基礎(chǔ)上加大樣本量，采用多中心的前瞻性研究以驗(yàn)證lncRNA LUCAT1的臨床作用。

利益相關(guān)聲明：論文所有作者共同認(rèn)可論文無利益沖突。

作者貢獻(xiàn)說明：林杰醞釀及設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，參與實(shí)施研究，撰寫論文； 羅瑞英參與設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，指導(dǎo)工作，對(duì)論文的內(nèi)容進(jìn)行審閱；林英娜采集數(shù)據(jù)及分析數(shù)據(jù)，參與統(tǒng)計(jì)分析；吳露楠集數(shù)據(jù)及分析數(shù)據(jù)； 劉國興采集數(shù)據(jù)及分析數(shù)據(jù)，參與統(tǒng)計(jì)分析。