馬 翼，陳海珍

山西省兒童醫(yī)院/山西省婦幼保健院臨床醫(yī)學(xué)檢驗中心，山西太原 030006

感染性肺炎是指細菌、衣原體等感染引起的肺部感染，是造成新生兒死亡的重要原因之一，感染早期不具典型癥狀，難以區(qū)分感染類別，易造成誤診、漏診，早期診斷、治療可降低患兒病死率[1]。感染性肺炎患兒臨床表現(xiàn)主要為咳嗽、肺部濕羅音、發(fā)熱等，隨著病情發(fā)展可損傷呼吸功能，引起呼吸衰竭甚至死亡，主要以血液病原菌培養(yǎng)結(jié)果作為診斷/評估病情標準，但早期病原菌濃度較低導(dǎo)致時效性不足，C反應(yīng)蛋白等炎性標志物常用與診斷感染性肺炎，但特異度、準確度較低[2]。因而尋找新型血清標志物有助于早期診斷感染性肺炎。載脂蛋白C1(APOC1)是運輸血脂的脂蛋白，且與肝炎、系統(tǒng)性炎性疾病密切相關(guān)，可評估疾病感染程度[3]。趨化因子C-C基元配體5(CCL5)屬于CC類趨化因子家族，可募集巨噬細胞、嗜堿性粒細胞等遷移至炎性部位，并對T細胞分泌相關(guān)因子發(fā)揮趨化作用，研究表明急性期肺炎支原體肺炎(MPP)患兒血清CCL5水平升高，且與病變程度有關(guān)[4]。MMP-9水平升高可能促使呼吸系統(tǒng)病變，可降解呼吸系統(tǒng)細胞外基質(zhì)，破壞呼吸系統(tǒng)結(jié)構(gòu)，參與氣道炎性反應(yīng)，研究表明感染發(fā)生時肺實質(zhì)細胞可產(chǎn)生MMP-9，進一步損傷支氣管、肺組織[5]。目前血清APOC1、CCL5、MMP-9在感染性肺炎患兒中表達狀態(tài)及其臨床意義尚未明確。因此，本研究主要探討感染性肺炎患兒血清APOC1、CCL5、MMP-9表達情況及其與肺功能的相關(guān)性，進一步評價血清各指標對感染性肺炎的診斷價值，并對血清各指標不同表達水平患兒發(fā)生感染性肺炎的危險性進行比較，為臨床治療感染性肺炎患兒提供參考?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2020年2月至2022年2月山西省兒童醫(yī)院108例感染性肺炎患兒作為研究組。研究組根據(jù)感染可能性評分(IPS)分為重癥組49例(IPS≥13分)和輕癥組59例(IPS<13分)[6]。另選取同期65例體檢健康兒童作為對照組。兩組臨床資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。本研究經(jīng)本院倫理委員會批準，所有患者及其家屬知情且簽署知情同意書。

表1 兩組臨床資料比較

1.2納入與排除標準 納入標準：(1)所有患兒均符合感染性肺炎診斷標準[7]；(2)母親足月分娩、自然受孕、單胎妊娠；(3)未合并其他肺部疾病。排除標準：(1)合并先天性疾??；(2)母親早產(chǎn)或其他異常妊娠/分娩；(3)吸入性肺炎；(4)呼吸功能不全；(5)母親合并妊娠期疾病；(6)母親患有艾滋病、病毒性肝炎等；(6)極低體重；(7)重度窒息；(8)合并其他部位感染。

1.3方法 采集研究組患兒入組次日清晨空腹血5 mL，3 000 r/min離心10 min，分離血清置于-80 ℃冰箱保存。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血清APOC1、CCL5水平，美國R&D公司提供APOC1檢測試劑盒(批號：20190603)，美國Sigma公司提供CCL5檢測試劑盒(批號：20190308)。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血清MMP-9水平，上海科興生物工程有限公司提供檢測試劑盒(批號：20190711)。比較兩組血清APOC1、CCL5、MMP-9水平及肺功能指標[第1秒用力呼氣容積(FEV1)/用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼氣容積占預(yù)計值的百分比(FEV1%)]。為保證檢測質(zhì)量，均由同一試驗小組成員完成檢測，且檢測次數(shù)為3次，取其平均數(shù)。

2 結(jié) 果

2.13組血清各指標水平及肺功能比較 輕癥組、重癥組血清APOC1、CCL5、MMP-9水平高于對照組，F(xiàn)EV1/FVC、FEV1%低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；重癥組血清APOC1、CCL5、MMP-9水平高于輕癥組，F(xiàn)EV1/FVC、FEV1%低于輕癥組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 3組血清各指標水平及肺功能比較

2.2血清各指標水平與肺功能相關(guān)性分析 感染性肺炎患兒血清APOC1、CCL5、MMP-9水平與FEV1/FVC、FEV1%均呈負相關(guān)(P<0.05)。見圖1。

注：A為血清APOC1水平與FEV1/FVC相關(guān)性分析；B為血清CCL5水平與FEV1/FVC相關(guān)性分析；C為血清MMP-9水平與FEV1/FVC相關(guān)性分析；D為血清APOC1水平與FEV1%相關(guān)性分析；E為血清CCL5水平與FEV1%相關(guān)性分析；F為血清MMP-9水平與FEV1%相關(guān)性分析。

2.3血清各指標間相關(guān)性分析 感染性肺炎患兒血清APOC1水平與血清CCL5、MMP-9水平呈正相關(guān)，血清CCL5水平與血清MMP-9水平呈正相關(guān)(分別為r=0.836，P<0.000 1；r=0.805，P<0.000 1；r=0.841，P<0.000 1)。見圖2。

注：A為血清APOC1水平與血清CCL5水平相關(guān)性分析；B為血清APOC1水平與血清MMP-9水平相關(guān)性分析；C為血清CCL5水平與血清MMP-9水平相關(guān)性分析。

2.4血清各指標對感染性肺炎的診斷效能 以感染性肺炎兒童血清指標為陽性標本，以體檢健康兒童血清指標為陰性樣本，繪制ROC曲線，結(jié)果顯示，血清APOC1、CCL5、MMP-9聯(lián)合檢測診斷感染性肺炎的AUC高于各指標單項檢測的AUC。見表3、圖3。

表3 血清各指標對感染性肺炎的診斷效能

圖3 ROC曲線分析血清各指標對感染性肺炎的診斷效能

2.5血清各指標不同表達水平患兒發(fā)生感染性肺炎的危險性比較 以2.4結(jié)果中血清APOC1、CCL5、MMP-9的截斷值為界，將感染性肺炎患兒依次分為APOC1、CCL5、MMP-9高表達、低表達。APOC1、CCL5、MMP-9高表達水平患兒發(fā)生感染性肺炎的危險性是其低表達水平患兒的1.589、1.462、1.477倍(P<0.05)，可見APOC1、CCL5、MMP-9高表達水平可增加感染性肺炎發(fā)生風(fēng)險。見表4。

表4 血清各指標不同表達水平患兒發(fā)生感染性肺炎的危險性比較

續(xù)表4 血清各指標不同表達水平患兒發(fā)生感染性肺炎的危險性比較

3 討 論

大部分感染性肺炎患兒確診時已發(fā)展至嚴重階段，血清學(xué)指標具有高度靈敏度、特異度等優(yōu)勢，可用于早期診斷感染性疾病[8-9]。感染性肺炎患兒體內(nèi)炎性反應(yīng)加劇，免疫功能損傷，輔助性T細胞、調(diào)節(jié)性T細胞失衡可促進炎性因子釋放，進而造成肺組織損傷[10]。

APOC1是評估肺部疾病的敏感性指標，可評估疾病感染嚴重程度、預(yù)后轉(zhuǎn)歸[11]。APOC1在難治性肺炎支原體肺炎中表達水平升高，且與肺功能有關(guān)[12]。本研究結(jié)果顯示，輕癥組、重癥組血清APOC1水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；重癥組血清APOC1水平高于輕癥組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。提示APOC1水平與感染性肺炎嚴重程度有關(guān)。APOC1可將血脂運輸至機體各處并進行代謝，調(diào)節(jié)炎性反應(yīng)、免疫功能[13]。本研究發(fā)現(xiàn)APOC1與FEV1/FVC、FEV1%均呈負相關(guān)，表明APOC1水平升高可加劇肺部組織炎性反應(yīng)，引起肺組織損傷，進而減低肺功能。喘息患兒血清APOC1水平升高，可參與氣道炎性反應(yīng)，可能是影響哮喘/反復(fù)哮喘發(fā)生的危險因素[14]。本研究結(jié)果顯示，APOC1高表達水平患兒發(fā)生感染性肺炎的危險性是其低水平的1.589倍，提示不同病原體感染機體后APOC1水平升高，可能引起氣道炎性反應(yīng)，并參與脂質(zhì)代謝、炎性反應(yīng)過程，募集炎性細胞因子轉(zhuǎn)移至肺部組織，促進感染性肺炎發(fā)生發(fā)展。CCL5在缺血缺氧性腦病患兒中表達水平升高，可調(diào)節(jié)細胞生長/分化，且與其患兒預(yù)后不良有關(guān)[15]。本研究結(jié)果顯示，輕癥組、重癥組血清CCL5水平升高，感染性肺炎患兒血清CCL5水平與FEV1/FVC、FEV1%均呈負相關(guān)，這與董天津等[16]報道結(jié)果相似。本研究進一步分析發(fā)現(xiàn)，CCL5高表達水平患兒發(fā)生感染性肺炎的危險性是其低水平患兒的1.462倍，提示CCL5水平升高與肺部功能損傷密切相關(guān)，并可反映感染性肺炎發(fā)生發(fā)展進程。CCL5可與嗜酸性粒細胞表面受體結(jié)合，參與肺部炎性損傷過程，且與肺部功能損傷呈負相關(guān)。CCL5在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者中表達水平升高，且與疾病活動程度有關(guān)[17]。CCL5可參與疼痛信號生成、傳遞過程，中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷后可激活細胞核因子κB(NF-κB)信號通路，促進CCL5表達，進而調(diào)節(jié)炎性細胞因子表達[18]。由此推測，機體感染條件下，星形膠質(zhì)細胞活化后產(chǎn)生CCL5，CCL5可作為核嗜酸性粒細胞、記憶T細胞趨化因子，募集小膠質(zhì)細胞/巨噬細胞，進而促進感染性肺炎發(fā)展。

感染性肺炎血清MMP-9水平升高，機體感染后激活宿主炎性反應(yīng)，MMP-9表達量增高導(dǎo)致炎性反應(yīng)加劇[19-20]。本研究結(jié)果顯示，輕癥組、重癥組血清MMP-9水平高于對照組，提示MMP-9水平升高可能促進感染性肺炎發(fā)生。MMP-9可破壞血腦屏障，反映動脈粥樣硬化等炎性疾病活躍狀態(tài)，可用于腦梗死合并肺炎患者早期診斷及預(yù)后評估[21]。MMP-9與重癥肺炎患者感染病情、預(yù)后不良有關(guān)，研究表明MMP-9可分解肺泡間質(zhì)成分，加快炎性因子擴散速度，促使補體C3、C4損傷組織臟器，進而促進感染性疾病進展[22]。感染性肺炎患兒存在氣道炎性反應(yīng)，本研究發(fā)現(xiàn)，MMP-9水平與FEV1/FVC、FEV1%均呈負相關(guān)，這與謝曼芬等[23]報道結(jié)果相似，肺實質(zhì)細胞/炎性細胞可分泌大量MMP-9，MMP-9可降解或重塑細胞外基質(zhì)，促使呼吸道或肺內(nèi)結(jié)構(gòu)復(fù)合物分解，破壞呼吸系統(tǒng)結(jié)構(gòu)，加重氣道損傷，促使基底膜沉積大量膠原，促進巨噬細胞富集，進而促使肺功能惡化。本研究發(fā)現(xiàn)感染性肺炎患兒血清APOC1與CCL5、MMP-9呈正相關(guān)，CCL5與MMP-9呈正相關(guān)。感染激活機體免疫系統(tǒng)或炎性反應(yīng)，APOC1、CCL5水平升高可加重炎性反應(yīng)，引起支氣管壁充血、水腫，肺泡壁炎性細胞浸潤可造成肺通氣功能障礙，進而加重肺功能損傷，同時MMP-9屬于炎性反應(yīng)下游產(chǎn)物，三者可相互作用促使蛋白酶損傷肺泡上皮細胞，促進感染性肺炎病情進展。本研究進一步分析發(fā)現(xiàn)，血清APOC1、CCL5、MMP-9聯(lián)合檢測診斷感染性肺炎的AUC高于各指標單項檢測的AUC，提示三者聯(lián)合檢測對感染性肺炎具有一定診斷價值。

綜上所述，感染性肺炎患兒血清APOC1、CCL5、MMP-9水平升高，且與肺功能損傷密切相關(guān)，監(jiān)測三者水平變化有助于提高肺炎診斷效率，其水平升高可增加感染性肺炎發(fā)生風(fēng)險。本研究尚未對感染性肺炎患兒預(yù)后進行評估，關(guān)于APOC1、CCL5、MMP-9在該病發(fā)生過程中的作用機制尚未明確，下一步將擴大樣本量評估APOC1、CCL5、MMP-9水平變化對感染性肺炎患兒預(yù)后的診斷價值，進一步從分子水平分析三者內(nèi)在作用機制。