曹 晶， 代重山

（獸醫(yī)公共衛(wèi)生安全全國重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，北京 海淀 100193）

抗生素濫用可導(dǎo)致潛在的細(xì)菌耐藥性及藥物殘留，引起食品安全、環(huán)境污染等問題，嚴(yán)重威脅人類健康。 我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部已經(jīng)規(guī)定：在2020 年全面禁止飼料中添加抗生素用于促進(jìn)動物生長使用。因此，開發(fā)新型綠色添加劑產(chǎn)品已成為新的趨勢。 竹葉黃酮（Bamboo leaf flavonoids）是竹葉中的主要活性成分，是天然的抗氧化劑，具有抗氧化、抗炎、抗菌、免疫調(diào)節(jié)等一系列生物學(xué)功能，也是天然、綠色、無污染的成分，具有作為新型動物飼料添加劑的潛力。 本文歸納總結(jié)了竹葉黃酮的生物學(xué)功能及其在動物生產(chǎn)中的應(yīng)用， 旨在為其臨床應(yīng)用和產(chǎn)品開發(fā)提供理論依據(jù)。

1 竹葉黃酮的主要類型

竹葉中含有豐富的黃酮類化合物， 平均占2%左右， 且主要以碳苷類黃酮為主。 異葒草苷（Homoorientin）、葒草苷（Orientin）、異牡荊苷（Isoviextin）和牡荊苷（Vitexin）是竹葉黃酮類化合物的主要存在形式（賈可敬，2014）。

2 竹葉黃酮的生物學(xué)功能

2.1 抗氧化功能 竹葉中的黃酮類化合物中存在3 ～4 個羥基，可起到清除自由基的作用，同時氫基在不同環(huán)上的不同位置也影響到其抗氧化活性，其中，苯環(huán)3、4 位上的羥基具有強(qiáng)氧化活性，是清除自由基的關(guān)鍵性結(jié)構(gòu)（于晶等，2008）。研究表明，竹葉黃酮有很強(qiáng)的清除超氧陰離子自由基、羥自由基以及1，1-二苯基-2-苦肼基（DPPH）自由基的能力（姚林娜等，2021；歐陽吾樂等，2019；段麗娜等，2018；Gong 等，2015）。 研究發(fā)現(xiàn)，竹葉黃酮對DPPH 自由基、羥基自由基、超氧陰離子自由基的清除能力較強(qiáng)， 其中對羥基自由基的清除能力與維生素C 接近 （羅洪杰等，2022； 王世彬等，2021；段麗娜等，2018）。

竹葉黃酮補(bǔ)充可以顯著提高動物體內(nèi)抗氧化酶的活性，抵抗氧化應(yīng)激損傷。侯昆等（2019）研究發(fā)現(xiàn)，30 g/d 的竹葉黃酮， 連續(xù)飼喂奶牛14 d，可以顯著提高奶牛血清中的超氧化物歧化酶（SOD）的活性。張碩（2021）在飼喂仙居雞后發(fā)現(xiàn)，雞在食用添加了竹葉黃酮（500 mg/kg，含40%黃酮，每日2 次，連續(xù)飼喂90 d）的飼料后，血清中SOD、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）的活性顯著提高， 說明竹葉黃酮膳食補(bǔ)充可顯著提高動物機(jī)體的抗氧化能力。 Zhang 等（2014）研究發(fā)現(xiàn)，小鼠連續(xù)被口服灌胃給予125、250、500 mg/kg體重竹葉黃酮4 周后， 可顯著提高肝臟組織中SOD、CAT、GSH-PX 活性， 從而改善急性四氯化碳（CCl4）暴露誘導(dǎo)的肝功能失調(diào)。 相似的，沈明明等（2020）研究發(fā)現(xiàn)，在雄性肉雞的日糧中添加竹葉提取物（0.10%、0.20%、0.40%，黃酮含量70 mg/g，每日2 次）21 d，可顯著提高肉雞胸肌中抗氧化酶CAT、SOD 水平，同時顯著上調(diào)抗氧化物質(zhì)谷胱甘肽（GSH）水平。

Gu 等（2022）研究發(fā)現(xiàn)，人永生化表皮細(xì)胞（HaCaT 細(xì)胞） 被10、20 μg/mL 和40 μg/mL 的竹葉黃酮處理48 h 后，可劑量依賴性的增加細(xì)胞內(nèi)SOD、GSH-PX 和CAT 等抗氧化酶的含量， 降低偶氮二異丁脒鹽酸鹽誘導(dǎo)的活性氧（ROS）的產(chǎn)生和氧化應(yīng)激損傷。 進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，竹葉黃酮補(bǔ)充可顯著抑制磷酸化（p）-38、p-細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶1/2（ERK1/2）蛋白表達(dá)，顯著上調(diào)p-c-Jun 氨基末端蛋白激酶（JNK）蛋白表達(dá)。 此外，竹葉黃酮補(bǔ)充還可通過上調(diào)細(xì)胞自噬，抑制偶氮二異丁脒鹽酸鹽誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激損傷。Yu 等（2019）通過使用人肝癌細(xì)胞系（HepG2 細(xì)胞）發(fā)現(xiàn)，竹葉黃酮在120 μg/mL處理12 h 后，可顯著抑制油酸誘導(dǎo)的HepG2 細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷，主要機(jī)制涉及上調(diào)抗氧化酶CAT、GSH-PX 等抗氧化酶活力，抑制細(xì)胞內(nèi)ROS 產(chǎn)生。竹葉黃酮也可通過調(diào)控細(xì)胞內(nèi)源性抗氧化系統(tǒng)發(fā)揮抗氧化活性。 研究證實(shí)，竹葉黃酮可顯著上調(diào)核因子-E2 相關(guān)因子2（Nrf2）的轉(zhuǎn)錄調(diào)控，從而激活單加氧酶（HO-1）表達(dá)，顯著改善油酸處理誘導(dǎo)的HepG2 細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷（Yu 等，2019）。

2.2 脂代謝調(diào)節(jié)能力 竹葉黃酮補(bǔ)充有促進(jìn)動物機(jī)體脂質(zhì)代謝的作用。 阮振婷等（2021）研究發(fā)現(xiàn)，在蕭山雞公雞的基礎(chǔ)日糧中分別添加0.75‰、1.50‰、2.25‰和3.00‰的竹葉黃酮 （120 g/d，連續(xù)飼喂90 d）可劑量依賴性的降低血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、乳酸脫氫酶（LDH）和甘油三酯（TG）的含量， 表明竹葉黃酮補(bǔ)充可增強(qiáng)肝細(xì)胞的物質(zhì)代謝，促進(jìn)脂類的吸收和代謝。張碩（2021）研究發(fā)現(xiàn)，仙居雞在使用了添加竹葉黃酮（500 mg/kg，含40%黃酮，每日2 次，連續(xù)飼喂90 d）的飼料后，其體內(nèi)的脂肪酸合成酶（FAS）的mRNA 表達(dá)水平顯著降低，表明竹葉黃酮補(bǔ)充可抑制脂肪酸的合成，減少雞體內(nèi)肝臟中的脂肪沉積。

2.3 抗炎功能 竹葉黃酮有較強(qiáng)的抗炎能力。 侯昆等（2019）研究發(fā)現(xiàn)，在奶牛日糧中添加竹葉黃酮（30 g/d，連續(xù)飼喂14 d），可以有效降低奶牛血清中白介素-1β（IL-1β）與腫瘤壞死因子-α（TNFα）的含量，上調(diào)白介素-2（IL-2）含量，從而有效改善奶牛乳房炎。 周曉燕等（2016）研究發(fā)現(xiàn)，大鼠連續(xù)被口服給予100 mg/kg·d 竹葉黃酮12 周后，能夠有效抑制糖尿病大鼠腦組織海馬區(qū)炎癥因子白介素-6（IL-6）、環(huán)氧合酶-2（COX-2）和TNF-α 的表達(dá)，從而抑制大鼠海馬區(qū)的炎癥反應(yīng)。

2.4 抗菌功能 研究表明，竹葉黃酮具有一定的抑菌能力。楊英等（2011）認(rèn)為，竹葉黃酮對金黃色葡萄球菌、痢疾志賀氏菌、乙型副傷寒沙門氏菌、馬紅球菌、 檸檬酸桿菌及藤黃微球菌具有一定的抑制效果；同時，還發(fā)現(xiàn)竹葉黃酮的水解成分對藤黃微球菌、金黃色葡萄球菌、檸檬酸桿菌、馬紅球菌和乙型副傷寒沙門氏菌的抑菌效果顯著好于其自身。 方菊（2012）研究發(fā)現(xiàn)，竹葉黃酮對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和β-嗜堿芽孢桿菌有顯著抑制作用， 其最小抑菌濃度 （MIC） 分別為0.029、0.018 mg/mL 和0.07 mg/mL， 而對酵母菌無明顯的抑制作用。游輝（2009）發(fā)現(xiàn)，竹葉黃酮對霉菌的抗菌活性要優(yōu)于其對酵母菌和細(xì)菌的抗菌活性，此外，研究發(fā)現(xiàn)，在120 °C 下，竹葉黃酮的抗菌活力基本不受影響。許麗旋等（2006）發(fā)現(xiàn)，竹筍殼黃酮的90%乙醇提取液對金黃色葡萄球菌和藤黃八疊球菌抑制作用較強(qiáng)。

2.5 免疫調(diào)節(jié)能力 栗明月等（2019）研究發(fā)現(xiàn)，對泌乳期奶牛每天飼喂竹葉黃酮30、60 g 和90 g（連續(xù)飼喂35 d） 可以提高奶牛血液中中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的數(shù)量和比例， 從而提高奶牛的細(xì)胞免疫能力；其中，高劑量的竹葉黃酮補(bǔ)充可顯著提高奶牛血液中IgG、IgM 和IgA 的濃度， 從而通過調(diào)節(jié)免疫球蛋白的分泌來調(diào)節(jié)機(jī)體的體液免疫，低劑量的竹葉黃酮補(bǔ)充可以提高奶牛血液中白介素-4（IL-4）和γ 干擾素（INF-γ）的含量，從而提高奶牛的免疫能力。唐浩國等（2007）研究得出，適量的竹葉黃酮（0 ～80 mg/L，培養(yǎng)24 h）可促進(jìn)小鼠（BALB/C 純系小鼠）的脾細(xì)胞DNA 和蛋白質(zhì)的合成，促進(jìn)細(xì)胞增殖，促進(jìn)小鼠脾細(xì)胞中IFN-γ mRNA 的表達(dá)以及IFN-γ 的產(chǎn)生與分泌，反過來激活了NK 細(xì)胞， 促進(jìn)T、B 細(xì)胞分化和細(xì)胞毒性T 淋巴細(xì)胞（CTL）成熟，刺激B 細(xì)胞分泌抗體，從而起到增強(qiáng)免疫力的作用。

2.6 其他功能 除上述功能外，竹葉黃酮還具有調(diào)節(jié)血脂、 抗腫瘤和保肝護(hù)膽等多種生物學(xué)功能（舒剛，2015；錢俊青等，2014；張師，2014；黃宇玫等，2012；付曉春等，2005）。

3 竹葉黃酮在動物生產(chǎn)中的應(yīng)用

3.1 提高動物生長性能 竹葉黃酮具有抗氧化、抗炎、抗菌以及免疫調(diào)節(jié)等生物學(xué)功能，這些功能有利于改善動物機(jī)體的應(yīng)激狀態(tài)以及抗氧化功能等， 從而起到提高動物生產(chǎn)性能的作用。 沈明明（2020）研究發(fā)現(xiàn)，日糧中添加0.20%的竹葉黃酮（每日2 次，連續(xù)飼喂42 d），最終肉雞的平均采食量和平均日增重分別提高了6.2%和10.5%，屠宰性能也顯著提高。 楊仕群等（2017）通過研究發(fā)現(xiàn)，在基礎(chǔ)日糧中添加0.5%的竹葉黃酮（含85%竹葉黃酮，連續(xù)飼喂28 d），最終藍(lán)孔雀幼雛的日采食量和抗氧化能力顯著提高，料重比顯著降低，說明竹葉黃酮促進(jìn)了藍(lán)孔雀的消化吸收， 提高了飼料轉(zhuǎn)化率，增強(qiáng)了藍(lán)孔雀幼雛抗氧化的能力。張錦玥等（2015）研究發(fā)現(xiàn)，肉雞（1 日齡Arbor Acres母雛雞） 在食用添加了竹葉黃酮 （1.6 g/kg·d，含85%竹葉黃酮，連續(xù)飼喂35 d）的飼料后，促進(jìn)了其免疫器官的發(fā)育， 同時可以減少免疫病對免疫系統(tǒng)的損害。蘭永紅（2021）試驗(yàn)中，將母馬分為三組， 分別補(bǔ)喂10、20 g/d 和30 g/d 的竹葉提取物（含60%竹葉黃酮，每日1 次，連續(xù)飼喂60 d），結(jié)果分析表明竹葉黃酮提高了伊犁母馬乳中的免疫因子，降低了幼駒體內(nèi)生長抑制素的水平，在幼駒吸食母乳后，體內(nèi)生長因子升高，自身的免疫作用提高，機(jī)體最終達(dá)到增重的效果，幼駒生長性能得到提高。

同時， 竹葉黃酮還能提高動物的生產(chǎn)性能。 張碩（2021）認(rèn)為，在飼料中添加竹葉黃酮（500 mg/kg·d，含40%黃酮，每日2 次，連續(xù)飼喂90 d）可以提高母體營養(yǎng)物質(zhì)的代謝和吸收，向蛋中轉(zhuǎn)移的同時仙居雞的產(chǎn)蛋率也隨之提高。 Liu等（2019）通過研究雌性大熊貓飼料中的竹葉黃酮含量與它們生殖激素的關(guān)系， 得出大熊貓尿液中雌二醇的含量與竹葉黃酮類濃度呈正相關(guān)， 表明竹葉黃酮或許在調(diào)節(jié)雌性大熊貓的生殖激素方面有其特殊的作用。

3.2 調(diào)節(jié)脂肪代謝，改善肉品質(zhì) 竹葉黃酮可以有效調(diào)節(jié)動物體內(nèi)的脂肪代謝， 同時提高其肉的品質(zhì)。張碩等（2022）認(rèn)為，在飼料中添加合適量的竹葉黃酮（500 mg/kg·d，含40%黃酮，連續(xù)飼喂90 d），可能會以轉(zhuǎn)錄的方式實(shí)現(xiàn)對肝臟和血漿中脂質(zhì)的合成、分解以及轉(zhuǎn)運(yùn)的調(diào)控作用，從而調(diào)節(jié)肉雞的脂質(zhì)代謝。沈明明等（2021）試驗(yàn)得出，在日糧中添加0.30%、1.50%和3.00%的竹葉提取物（黃酮含量70 mg/g，每日2 次，連續(xù)飼喂35 d）可以提高肉雞的脂肪代謝。不僅如此，竹葉黃酮還可以改善肉雞胸肌的系水力以及pH， 如沈明明（2020）研究發(fā)現(xiàn)，肉雞食用了分別添加0.10% ～0.50%竹葉提取物（黃酮含量70 mg/g，每日2 次）的飼料42 d，其胸肌的肌肉品質(zhì)得到了顯著改善。胡科娜等（2021）研究發(fā)現(xiàn)，冷風(fēng)干燥后（WD），并在4 ℃條件下把鰻魚浸入含0.25%竹葉黃酮和8%食鹽的腌制液中6 h，在這個基礎(chǔ)上對真空包裝的鰻魚鱉用6kGy 劑量進(jìn)行輻照處理， 結(jié)果顯示，適量的竹葉黃酮可以提高車間冷風(fēng)干燥處理后的鰻魚鲞的風(fēng)味與感官品質(zhì)， 在加上一定量的電子束輻射后，風(fēng)味和品質(zhì)更優(yōu)，表明竹葉黃酮對改善鰻魚鲞品質(zhì)具有一定的作用。Fan 等（2013）通過檢測浸泡了竹葉黃酮[0.2%（m/V），含（35±3）%黃酮]10 min 的鰱魚在冷藏期間一系列變化，得出在竹葉黃酮的作用下可以有效緩解水分流失， 同時還能減少腐壞，提高了鰱魚的感官品質(zhì)。

3.3 提高抗病能力，增強(qiáng)抗應(yīng)激能力 竹葉黃酮本身具有抗菌、 抗氧化性和免疫調(diào)節(jié)的生物學(xué)功能，因此通過在日糧中添加竹葉黃酮，可以提高動物機(jī)體的免疫能力，提高動物的抗病能力，同時還可以提高抗氧化應(yīng)激和抗環(huán)境應(yīng)激能力。 Zhang等（2022）研究發(fā)現(xiàn)，在中華絨螯蟹的日糧中添加竹葉黃酮（每日2 次，連續(xù)飼喂8 周）可以有效地提高其免疫調(diào)控能力， 其中， 加入500 mg/kg 和1000 mg/kg 可以提高肝胰腺中Toll 樣受體1（TLR1）和髓樣分化因子88（MyD88）mRNA 的表達(dá)水平，加入1000 mg/kg 可以提高肝管和肝胰腺中Dif mRNA 的表達(dá)水平， 從而達(dá)到改善免疫調(diào)節(jié)的目的。 Cao 等（2022）通過研究肉雞在食用添加了竹葉黃酮（50 mg/kg·d 和250 mg/kg·d，連續(xù)飼喂21 d）的飼料后的情況發(fā)現(xiàn)，竹葉黃酮有效地誘導(dǎo)血清IgM 顯著增多，血清IL-1β、黏膜IL-6 和IL-1β 顯著降低，最終導(dǎo)致肉雞的免疫能力增強(qiáng)。 吳睿宸（2021）研究發(fā)現(xiàn)，飼喂一定量添加竹葉提取物 （10、20 g/d 和30 g/d， 含竹葉黃酮60%，每日1 次，連續(xù)飼喂60 d）的日糧，在短時間內(nèi)， 可以提高伊犁馬血液中IgG、IgM 的濃度，說明竹葉黃酮可以提高伊犁馬的機(jī)體免疫能力。李建鳳等（2022）研究發(fā)現(xiàn)，竹葉黃酮在1、5 μg/mL和10 μg/mL 等劑量濃度處理奶牛乳腺上皮細(xì)胞（BMECs）12 h 后，可顯著降低熱應(yīng)激造成的氧化應(yīng)激損傷，表明竹葉黃酮補(bǔ)充能夠提高奶牛機(jī)體的抗熱應(yīng)激能力。

竹葉黃酮還可以提高動物腸道菌群的結(jié)構(gòu)平衡，從而提高動物的抗病能力。Shu 等（2020）通過檢測盲腸微生物群發(fā)現(xiàn)，在肉雞（Arbor Acres 雞，1 日齡） 飼料中添加竹葉黃酮（200、400 mg/kg·d和800 mg/kg·d，含黃酮量為85%，連續(xù)飼喂42 d），可以有效抑制病原菌的生長，提高有益菌含量，改善腸道的微生物群。劉婷（2021）研究發(fā)現(xiàn)，向伊犁馬飼喂一定量的竹葉提取物（20 g/d 和30 g/d，竹葉黃酮含60%，連續(xù)飼喂60 d）后，其糞便中的相關(guān)菌群發(fā)生了一定的變化， 其中有重要功能意義的厚壁菌門顯著高于對照組， 與供能相關(guān)的瘤胃菌科也顯著提高， 說明飼喂竹葉黃酮有利于穩(wěn)定和改善馬匹的腸道菌群，同時，疣微菌門的豐度顯著低于對照組， 存在竹葉黃酮能減少馬匹蹄葉炎發(fā)生這一可能。

4 小結(jié)與展望

竹葉黃酮具有抗氧化、抗炎、抗菌以及免疫調(diào)節(jié)等生物學(xué)功能。 竹葉黃酮補(bǔ)充能夠有效提高動物生長和生產(chǎn)性能， 提高免疫調(diào)節(jié)和脂肪代謝能力，從而改善肉的品質(zhì)。 同時，竹葉黃酮在動物臨床具有較高的安全性。 因此，竹葉黃酮作為天然活性物質(zhì)， 在飼料添加劑方面有著廣闊的開發(fā)前景。