畢恒

[河南中醫(yī)藥大學第五臨床醫(yī)學院(鄭州人民醫(yī)院) 檢驗科，河南 鄭州 450003]

乙型肝炎病毒感染會引發(fā)慢性乙型病毒性肝炎，導致患者肝功能受損，同時侵犯心、腎等器官，誘導多器官病變，威脅患者身心健康[1-3]。慢性乙型病毒性肝炎感染過程中會干擾機體免疫反應，促炎性細胞增生，引發(fā)相關炎癥，而白細胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、白細胞介素-18(interleukin-18，IL-18)屬常見炎癥因子，可促進B細胞生長，如兩者分泌異常會引發(fā)病情發(fā)作。趨化因子是炎癥因子、生長因子等多種因子生成的趨化性細胞因子，為機體免疫系統(tǒng)中的重要部分，而血清趨化因子-13(chemokine CXC ligand 13，CXCL-13)即B細胞趨化因子，在肝損傷組織中水平增高。本研究選取84例慢性乙型病毒性肝炎患者，探討CXCL-13、IL-6、IL-18的表達意義?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2019年6月至2020年8月河南中醫(yī)藥大學第五臨床醫(yī)學院收治的84例慢性乙型病毒性肝炎患者作為患病組，并以1∶1選取同期84例健康體檢者作為健康對照組。患病組：男43例，女41例；年齡22～64歲，平均(38.65±3.21)歲；病程1～5 a，平均(2.51±0.36)a。健康對照組：男45例，女39例；年齡24～65歲，平均(39.12±3.25)歲；病程1～6 a，平均(2.49±0.37)a。兩組一般資料均衡可比(P>0.05)。

1.2 選取標準(1)納入患者：①乙型肝炎e抗原陽性或陰性，乙型肝炎表面抗原陽性；②經(jīng)肝組織學檢查確診為肝炎病變；③血清學乙肝表面抗原陽性病程>6個月；④乙肝病毒核酸陽性，丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶>正常值2倍及以上；④臨床資料完整。(2)排除患者：①近期接受抗病毒治療；②酒精性肝病、藥物性肝炎、脂肪肝等。

1.3 檢測方法采集所有研究對象清晨空腹靜脈血10 mL，設置轉(zhuǎn)速為3 000 r·min-1，離心5 min，行血清分離，將其儲存于-80 ℃環(huán)境中，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血清CXCL-13、IL-6、IL-18水平，試劑盒購自上海之江生物科技股份有限公司，采用DNM-9606全自動酶標分析儀檢測，使用酶標儀記錄測定結(jié)果。

1.4 治療方法采用常規(guī)護肝治療，使用拉米夫定(陜西興邦藥業(yè)有限公司，國藥準字H20153123)，每次100 mg，每日1次，口服。恩替卡韋分散片(浙江愛諾生物藥業(yè)股份有限公司，國藥準字H20203665)，每次0.5 mg，每日1次，口服。持續(xù)治療6個月。

1.5 觀察指標(1)兩組血清CXCL-13、IL-6、IL-18水平。(2)兩組肝功能。(3)患病組不同病情程度患者血清CXCL-13、IL-6、IL-18水平。輕度患者的轉(zhuǎn)氨酶可在正常值的2倍以下，又或者是其凝血時間正常，無黃疸；中度患者轉(zhuǎn)氨酶在2倍或5倍以上，存在輕微黃疸，凝血時間有所延長；重度患者轉(zhuǎn)氨酶增高，白蛋白水平偏低，存在較嚴重的黃疸，凝血時間長，存在乏力、腹脹狀況。(4)e抗原陽性和陰性血清因子水平。(5)治療前后肝功能和血清因子水平。(6)相關性分析。

2 結(jié)果

2.1 血清因子水平患病組血清CXCL-13、IL-6、IL-18水平均較健康對照組高(P<0.05)。見表1。

表1 兩組血清因子水平比較

2.2 肝功能患病組谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶水平較健康對照組高(P<0.05)。見表2。

表2 兩組肝功能比較

2.3 不同病情程度患者血清因子水平不同病情程度慢性乙型病毒性肝炎患者血清CXCL-13、IL-6、IL-18水平對比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；輕度患者血清CXCL-13、IL-6、IL-18水平較中度、重度低(P<0.05)。見表3。

表3 不同病情程度患者血清因子水平

2.4 e抗原陽性和陰性血清因子水平e抗原陰性血清IL-6、CXCL-13因子水平較e抗原陽性低，e抗原陰性血清IL-18因子水平較e抗原陽性高(P<0.05)。見表4。

表4 e抗原陽性和陰性血清因子水平

2.5 治療前后肝功能和血清因子水平治療7、14 d后，慢性乙型病毒性肝炎患者谷丙轉(zhuǎn)氨酶、IL-6、IL-18及CXCL-13水平較低(P<0.05)。見表5。

表5 治療前后肝功能和血清因子水平

2.6 相關性分析Pearson分析結(jié)果顯示，血清CXCL-13、IL-6、IL-18水平與病情程度呈正相關(P<0.05)。見表6。

表6 相關性分析

3 討論

乙型病毒性肝炎作為常見慢性傳染性疾病，屬免疫相關疾病[4-6]。患者感染該病后肝細胞無明顯直接損傷，經(jīng)誘導免疫反應間接使肝細胞受損，感染該病后患者可存在食欲減退、上腹部不適、乏力及惡心等臨床表現(xiàn)，極大威脅患者身體健康[7-9]。同時，免疫反應發(fā)揮清除細胞毒性作用，誘導血清CXCL-13升高。CXCL-13對包括骨髓源性肝干細胞在內(nèi)的骨髓間充質(zhì)干細胞存在趨化作用，而骨髓源性肝干細胞存在肝干細胞的潛能及特性，能在生理狀態(tài)下定居于骨髓中，一旦機體肝損傷，便可向肝遷移同時參與修復損傷的進程[10-12]。人體感染乙肝病毒后其血清IL-6、IL-18水平會增高，在感染乙肝病毒后，機體免疫調(diào)節(jié)功能會存在紊亂狀況，會生成且釋放多種細胞因子，誘使機體產(chǎn)生及釋放IL-6、IL-18細胞因子，使得患者機體存在更加嚴重的免疫炎癥狀況，而加快肝炎癥進程[13-15]。

本研究針對慢性乙型病毒性肝炎患者進行血清CXCL-13、IL-6、IL-18檢測，結(jié)果顯示，患病組血清CXCL-13、IL-6、IL-18水平均較健康對照組高。分析原因在于，IL-6、IL-18水平增高后可引發(fā)機體免疫炎癥反應，從而誘導CXCL-13水平升高。本研究結(jié)果顯示患病組血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶水平較健康對照組高?？紤]其原因可能在于，慢性乙型病毒性肝炎患者存在肝功能損傷，該病為免疫相關疾病，其在感染人體后并不會對肝細胞存在顯著的損傷作用，反而是經(jīng)過誘導機體免疫反應間接使得機體肝細胞受損，與此同時，機體生成的免疫反應也發(fā)揮著清除病毒的效果。乙肝病毒感染發(fā)生的決定性因素有病毒、免疫應答2個方面，患者機體免疫功能失衡，且T淋巴細胞亞群及其細胞因子間的紊亂和慢性肝病的產(chǎn)生及進展存在較明顯的關聯(lián)，感染慢性肝炎疾病的患者其肝損傷水平也會高于健康人群[16-17]。本研究中輕度患者血清CXCL-13、IL-6、IL-18水平較中度、重度低，提示慢性乙型病毒性肝炎病情越嚴重，血清CXCL-13、IL-6、IL-18水平越高。分析原因在于，CXCL-13為B細胞趨化因子，由淋巴組織、樹突細胞生成，隨乙型病毒性肝炎感染加重，復制數(shù)量增多，免疫細胞被激活，活化免疫系統(tǒng)，致B細胞亞群數(shù)量異常，免疫功能紊亂。IL-6作為機體中致炎性細胞因子，能調(diào)節(jié)多種急性期反應蛋白合成，也是慢性肝病患者的免疫調(diào)節(jié)相關細胞因子，在感染或其他因素刺激作用下，單核巨噬細胞、T淋巴細胞被激活，增加IL-6合成、釋放，與肝細胞壞死情況具有密切關系，且乙型病毒性肝炎會致患者細胞免疫功能嚴重紊亂，IL-6釋放增多，炎癥反應加重[18-19]。IL-18為人體內(nèi)毒素誘導肝損害過程中的重要細胞因子，受乙型病毒性肝炎影響致肝發(fā)生不同程度的免疫損傷，刺激血清釋放。

本研究數(shù)據(jù)顯示，e抗原陰性血清IL-6因子水平較e抗原陽性低，e抗原陰性血清IL-18因子水平較e抗原陽性高?？紤]其原因可能是，感染乙肝病毒者其e抗原呈現(xiàn)為陽性。血清IL-6在正常健康人群中水平很低，通常會不足5 ku·L-1，該水平在絕大部分正常的靜息細胞內(nèi)并不表達，受感染或其他因素的影響，單核巨噬細胞、T淋巴細胞等被激活，最終會使血清IL-6合成、釋放不斷增加，又反而會促使被激活的T細胞增殖，使得尚未成熟的胸腺細胞被刺激分化成為已經(jīng)成熟的細胞毒性T淋巴細胞，清除細胞內(nèi)病毒，也會加強肝炎癥反應狀況，加重肝細胞受損情況。該血清在肝硬化肝炎及肝炎等疾病發(fā)展的急性期會高于正常群體水平，同時在患者病情極為嚴重的狀況下，該水平會顯著增高，該水平和中性粒細胞數(shù)量、白細胞及C反應蛋白等水平存在正相關關系，但和血清總蛋白水平存在負相關關系，該水平的增高程度和患者感染慢性乙肝病毒的嚴重程度存在明顯關聯(lián)性。血清IL-6水平和肝細胞壞死程度存在密切關聯(lián)，乙肝病毒DNA載量的不斷增加，會進一步加重乙肝患者細胞免疫功能紊亂的狀況，不斷釋放、生成血清IL-6，增加患者機體炎癥反應狀況。Pearson分析結(jié)果顯示，血清CXCL-13、IL-6、IL-18水平與病情程度呈正相關，進一步證實CXCL-13、IL-6、IL-18在慢性乙型病毒性肝炎病情評估中的應用價值。王鵬等[20]研究認為，在慢性乙型肝炎患者血清內(nèi)，IL-6和多種細胞因子表達水平存在正相關，認為該類血清會誘導機體產(chǎn)生免疫炎癥反應，參加肝炎癥病變過程，和本研究結(jié)果類似。

綜上所述，CXCL-13、IL-6、IL-18與慢性乙型病毒性肝炎病情嚴重程度呈正相關，病情嚴重程度越高，血清CXCL-13、IL-6、IL-18表達水平越高，對病情監(jiān)測評估有積極意義。