尚麗娟

（遼寧省阜新蒙古族自治縣現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)展服務(wù)中心，遼寧阜新 123100）

遼寧黑豬是由東北民豬與巴克夏豬雜交后經(jīng)40余年風(fēng)土馴化而成的地方品種。遼寧黑豬因其肉質(zhì)好、產(chǎn)仔多、耐粗飼、好飼養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)，適合農(nóng)村飼養(yǎng)，所以得到了廣大農(nóng)民的青睞。但是，由于雜交改良技術(shù)的推廣、利益驅(qū)動(dòng)、許多養(yǎng)豬戶(hù)盲目雜交等原因，使遼寧黑豬純種數(shù)量銳減。為了切實(shí)保護(hù)和開(kāi)發(fā)這一品種，遼寧省在丹東市建立了“遼寧黑豬原種場(chǎng)”。經(jīng)過(guò)系統(tǒng)選育和雜交組合篩選，遼寧黑豬生產(chǎn)性能得到提高。遼寧黑豬雖然存在生長(zhǎng)緩慢和瘦肉率低（胴體瘦肉率50%左右）的缺點(diǎn)，但其表現(xiàn)出極好的雜種優(yōu)勢(shì)。遼寧黑母豬與大約克夏、長(zhǎng)白、杜洛克雜交生產(chǎn)的“約黑” “長(zhǎng)黑” “杜黑” 二元雜交母豬，具有母性強(qiáng)、產(chǎn)仔多、生長(zhǎng)快、效益好等優(yōu)良特征。平均產(chǎn)仔數(shù)14.5 頭。三元雜交后代日增重798g，料肉比3.1:1，胴體瘦肉率能達(dá)到63%以上[1-2]。

胰島素樣生長(zhǎng)因子2（Insulin-like growth factor 2，IGF2）。也被稱(chēng)為生長(zhǎng)調(diào)節(jié)素A（somatomedin A），它與胰島素具有結(jié)構(gòu)上的同源性，劉桂蘭等曾采用限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性聚合酶鏈反應(yīng)（Cleaved Amplifica tion polymorphism Sequence-Tagged Sites，PCR-RFLP）分析了IGF2 基因中第8 內(nèi)含子部分片段在豬資源家系群體中的Nci I 酶切片段多態(tài)性分布，發(fā)現(xiàn)IGF2 基因該片段中有兩個(gè)Nci I 酶切位點(diǎn)，在資源家系中均具有多態(tài)性[3-4]。IGF2 基因B 位點(diǎn)酶切末突變個(gè)體均比酶切突變的個(gè)體背膘厚低18.28%，肥肉率低22.43%，瘦肉率則高達(dá)81.71%，位點(diǎn)A 具有相同的影響趨勢(shì)；IGF2 基因發(fā)揮作用的方式主要為加性效應(yīng)，可作為豬提高瘦肉率的候選基因[5]。

本試驗(yàn)是以遼寧地方豬種遼寧黑豬和國(guó)外引進(jìn)豬種杜洛克豬為試驗(yàn)對(duì)象，利用PCR-SSCP 方法檢測(cè)得到的遼寧黑豬和杜洛克豬IGF2 基因3 種基因型，分析其與胴體指標(biāo)和肉質(zhì)指標(biāo)相關(guān)性，以期從分子水平上探討改善肉質(zhì)的機(jī)制，為我國(guó)地方優(yōu)良豬種的育種改良提供理論依據(jù)[4]。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

本試驗(yàn)參照文獻(xiàn)[4]的方法采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-單鏈構(gòu)像多態(tài)性分析法（Polymerase Chain Reac tion-Single Strand Conformation Polymorphism，PCR-SSCP）方法對(duì)沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)豬場(chǎng)的110 頭120日齡的純種遼寧黑豬和150 頭120 日齡的杜洛克豬進(jìn)行IGF2 基因的多態(tài)性進(jìn)行檢測(cè)，在IGF2 基因外顯子8（exon8）位點(diǎn)上檢測(cè)出AA、AB 和BB 3 種基因型。2011 年9 月2 日，體重60kg 左右3 種基因型的遼寧黑豬和杜洛克豬各選擇6 頭，共36 頭，同等條件下進(jìn)行飼養(yǎng)。

1.2 屠宰

當(dāng)試驗(yàn)豬體重達(dá)到100kg 左右時(shí)，試驗(yàn)結(jié)束，將試驗(yàn)豬禁食24h 后趕入屠宰場(chǎng)休息2～3h，避免應(yīng)激。然后稱(chēng)重，按照規(guī)范程序進(jìn)行屠宰。為了測(cè)定準(zhǔn)確，每頭豬屠宰期間有一定的時(shí)間間隔，確保有足夠的時(shí)間進(jìn)行測(cè)量和采樣。

1.3 樣品采集

屠宰結(jié)束后，取試驗(yàn)所需部位的肉樣，將其放入自封袋中并盡量排出空氣，編號(hào)封好后帶回沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行分析。不能馬上測(cè)定的肉樣及時(shí)放入4℃冰箱保存。

1.4 胴體指標(biāo)測(cè)定

（1）胴體重：屠宰后去頭、蹄、尾和內(nèi)臟，分別稱(chēng)量左右兩側(cè)肉半重量（包括腎臟和板油），兩側(cè)肉半的總重量即為胴體重。

（2）背膘厚：用游標(biāo)卡尺測(cè)量左半胴體肩部最厚處、胸腰結(jié)合處、腰薦結(jié)合處三點(diǎn)的背膘厚，算出平均值即為背膘厚。

（3）眼積面積：在胸腰椎接合處垂直切下，用硫酸透明紙描出眼積面積，按照高×寬×0.7 系數(shù)的公式或用求積儀、圖像儀、坐標(biāo)紙計(jì)算眼積面積。

（4）瘦肉率：瘦肉重占瘦肉、脂肪、皮和骨的總重量之比。

1.4 肉質(zhì)指標(biāo)的測(cè)定

（1）pH 值：用pH 計(jì)在宰后的第45min 和24h 時(shí)將探頭插入倒數(shù)第3 和4 肋骨間的眼肌中所測(cè)得的pH 值。

（2）肉色：將背最長(zhǎng)肌放在4℃的冰箱中保存24h，然后取出切出鮮肉部分，在切面上覆蓋透氧薄膜靜置1h，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)比色板進(jìn)行肉樣評(píng)分。

1.5 數(shù)據(jù)處理

本試驗(yàn)的數(shù)據(jù)結(jié)果用SPSS16.0 統(tǒng)計(jì)軟件中的單因素方差分析法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，若經(jīng)F 檢驗(yàn)差異顯著者再用鄧肯法(Ducan)進(jìn)行多重比較。所有數(shù)據(jù)均以平均數(shù)± 標(biāo)準(zhǔn)誤。

2 結(jié)果與分析

2.1 豬IGF2 基因?qū)﹄伢w指標(biāo)的影響

由表1 可知，豬IGF2 基因的不同基因型對(duì)遼寧黑豬胴體重和眼積面積的影響沒(méi)有達(dá)到顯著水平（P＞0.05）；但是對(duì)背膘厚和瘦肉率的影響達(dá)到了顯著水平（P＜0.05）。AA 型遼寧黑豬瘦肉率最高，背膘厚最低。

表1 I豬GF2基因不同基因型對(duì)豬胴體性狀指標(biāo)的影響

豬IGF2 基因的不同基因型對(duì)杜洛克豬胴體重的影響也未達(dá)到顯著的水平（P＞0.05）。對(duì)其背膘厚、眼肌面積及瘦肉率的影響均達(dá)到了顯著水平（P＜0.05）。AA 型杜洛克豬瘦肉率最高，背膘厚最低。遼寧黑豬的背膘厚均大于杜洛克豬，眼積面積和瘦肉率遠(yuǎn)低于杜洛克豬。

2.2 豬IGF2 基因?qū)θ赓|(zhì)指標(biāo)的影響

由表2 可知，豬IGF2 基因的不同基因型對(duì)遼寧黑豬宰后45min 時(shí)pH 的影響沒(méi)有達(dá)到顯著水平（P＞0.05）。但對(duì)24h 時(shí)pH 的影響達(dá)到顯著水平（P＜0.05）。不同基因型對(duì)肉色的影響達(dá)到了顯著水平（P＜0.05）。對(duì)大理石紋和滴水率指標(biāo)的影響則沒(méi)有達(dá)到顯著水平（P＞0.05）。在肌肉嫩度方面，不同基因型對(duì)其的影響達(dá)到顯著水平，最嫩的基因型為AB型。不同的基因型間肌內(nèi)脂肪含量影響達(dá)到顯著水平（P＜0.05）。肌內(nèi)脂肪含量最高的為AA 型遼寧黑豬。對(duì)肌肉R 值和肌肉Hart 值的影響均達(dá)到顯著水平（P＜0.05）。在肌纖維直徑和肌纖維面積方面對(duì)兩者的影響均達(dá)到了現(xiàn)在水平（P＜0.05）。肌纖維最細(xì)的為BB 型，但肌纖維面積最大的為AA 型。豬IGF2 基因的不同基因型對(duì)杜洛克豬宰后45min 時(shí)pH 的影響也未達(dá)到顯著水平（P＞0.05）。對(duì)24h 時(shí)pH 的影響不同基因型間達(dá)到了顯著水平。在對(duì)肉色、大理石紋、肌內(nèi)脂肪和嫩度方面的影響均達(dá)到了顯著水平（P＜0.05）。在肌內(nèi)脂肪方面含量最高的為AA 型的杜洛克豬。滴水率方面不同基因型間沒(méi)有達(dá)到顯著水平（P＞0.05）。在對(duì)肌肉R 值的影響上不同基因型豬之間也沒(méi)有達(dá)到顯著水平（P＞0.05）。在肌肉Hart 值方面，3 種不同基因型豬之間達(dá)到了顯著水平（P＜0.05）。對(duì)杜洛克豬肌纖維直徑和肌纖維面積的影響都達(dá)到了顯著水平（P＜0.05）。肌纖維直徑最細(xì)的為AA 型，肌纖維面積最大的為AB 型的杜洛克豬。從肉色指標(biāo)進(jìn)行比較，遼寧黑豬的肉色比杜洛克豬的肉色要深；大理石紋也明顯高于杜洛克豬；滴水率小于杜洛克豬；嫩度比杜洛克豬肉的嫩度??；肌內(nèi)脂肪含量高于杜洛克豬；肌肉R 值低于杜洛克豬；肌肉Hart值高于杜洛克豬；肌纖維直徑也明顯比杜洛克豬細(xì)。

表2 I豬GF2不同基因型對(duì)豬肉質(zhì)指標(biāo)的影響

3 結(jié)論

IGF2 基因多態(tài)性對(duì)遼寧黑豬和引進(jìn)豬種杜洛克豬在胴體性能上都有較大的影響。特別是在肉質(zhì)指標(biāo)上，對(duì)24h 時(shí)pH、肉色、嫩度、肌內(nèi)脂肪、肌肉R值、肌肉Hart 值以及肌纖維直徑和肌纖維面積等指標(biāo)的影響均達(dá)到了顯著水平。

通過(guò)對(duì)遼寧黑豬和杜洛克豬的比較發(fā)現(xiàn)，遼寧黑豬在肉質(zhì)方面好于引進(jìn)豬種。而且從整體試驗(yàn)數(shù)據(jù)中可以看出AA 型都為遼寧黑豬和杜洛克豬的優(yōu)等基因型。因此，可以將AA 基因型作為遼寧黑豬和杜洛克豬生長(zhǎng)性狀的候選基因型，為日后研究我國(guó)地方優(yōu)良豬種的育種改良提供科學(xué)依據(jù)和理論基礎(chǔ)。