張白冰，龔先瓊

（1.福建中醫(yī)藥大學第二臨床醫(yī)學院，福建 福州 351012；

2.福建中醫(yī)藥大學附屬廈門中醫(yī)院肝病中心，福建 廈門 361009）

肝纖維化（hepatic fibrosis，HF）是各種致病因素如乙型肝炎病毒、酒精、藥物等侵襲肝細胞，導致肝臟反復炎癥、修復最終形成纖維結締組織的病理過程，其發(fā)病機制為肝星狀細胞（HSCs）活化增殖，分泌過量的細胞外基質（ECM），ECM合成和降解失衡，導致大量纖維膠原沉積在肝臟。因此抗HF的關鍵環(huán)節(jié)為抑制HSCs的活化增殖，誘導其衰老、凋亡。HSCs的激活受多種細胞因子、趨化因子、生長因子及其他分子的調控。轉化生長因子β1（TGF-β1）是HSC活化分子中最重要的細胞因子，TGF-β1/Smad為最常見的調控纖維化信號通路[1]。目前尚未發(fā)現(xiàn)對抗HF有明確療效的西藥。中藥因具有多因子、多靶點和多環(huán)節(jié)的協(xié)同藥理效應，在HF等復雜疾病的防治中具有顯著優(yōu)勢，中藥復方制劑治療HF療效確切，部分已納入肝纖維化指南。中藥單體是從中藥中提取的主要活性成分，具有成分簡單、安全性高等特點。近年來，中藥單體的研究成為中醫(yī)藥治病機制研究的重要手段，中藥單體及其有效成分治病機制的研究，為中藥復方治病的機制及安全性的探索提供了依據。本文就近年來比較新穎的中藥單體治療肝纖維化的研究進展作一綜述，以期為中藥單體防治HF提供理論依據。

1 莪術醇（curcumol）

莪術醇是莪術的主要活性成分之一，主要作用為理氣消滯化瘀，臨床常用于治療慢性肝病、抗肝纖維化。研究認為[2]，莪術醇具有較好的抗炎、抗肝纖維化、誘導細胞自噬和凋亡功效。鄭洋等[3]研究表明，在CCL4誘導的肝纖維化小鼠模型中，莪術醇可明顯改善肝纖維化小鼠的肝組織結構和肝功能，抑制肝纖維化，進一步研究發(fā)現(xiàn)莪術醇可抑制TGF-β1/Smad信號通路的激活，下調T G F-β1細胞因子、Smad2/3蛋白分子和基因的表達；說明莪術醇可能通過抑制TGF-β1/Smad 信號通路抑制肝纖維化；莪術醇還可抑制肝星狀細胞Rho通路的關鍵分子RhoA和ROCK2的表達，這可能是其抗HF的另一機制[4]；此外，莪術醇還可通過抑制肝竇內皮細胞MAPK信號通路上關鍵分子JNK、ERK、p38MAPK表達，降低肝臟炎癥反應，抑制肝竇內皮細胞活化、增殖，促進細胞凋亡，抑制炎癥反應進而發(fā)揮抗肝纖維化作用[5]。另有王佳慧等[6]基于miR-125b/NLRP3信號通路探討了莪術醇抗HF的機制，miR-125b是一種廣泛表達的miRNA，參與細胞的增殖、凋亡，改變HSCs的表型；而NLRP3是miR-125b的靶基因，NLRP3炎癥小體及其下游的炎癥信號過量表達會促進肝臟炎癥，莪術醇通過上調miR-125b的表達，靶向抑制下游NLRP3炎癥小體的信號傳導，減輕肝內炎癥反應以及抑制HSC活化，從而達到抗HF的作用。

2 荔枝核總黃酮（total flavone of Litchi Chinensis Sonn，TFL）

TFL是荔枝核主要提取物之一，屬于黃酮類化合物，藥理研究證明具有抗炎、抗氧化、抗纖維化的作用，廣泛應用于肝炎、肝纖維等疾病治療中[7]。已有研究發(fā)現(xiàn)TFL可調控多個蛋白，通過多種復雜的信號通路抗HF[8]。成秋宸等[9]研究發(fā)現(xiàn)：多條炎癥信號通路中的關鍵分子NF-kBp65及COX-2因子是增強炎癥反應、促進HSCs增殖、抑制HSCs凋亡的重要因子，而TFL可通過抑制大鼠肝纖維化細胞中NF-kBp65及COX-2在肝臟中的表達減少HSCs活化，發(fā)揮抗HF作用。而馮茵怡等[10]研究發(fā)現(xiàn)，經TFL治療后的肝纖維化大鼠肝組織學病理提示肝臟ECM沉積減少及肝臟病變程度減輕，表明TFL有抗HF作用，其分子機制可能與其調控ALB、PLG、HSP90AAL、EGFR、MAP2K1的表達有關。陳姍等[11，12]也通過實驗數據發(fā)現(xiàn)TFL可調控肝細胞中PPAR-γ及C-ski mRNA、TGF-β1、Smad3/4表達，這可能也是其抗HF機制之一。

3 丹酚酸B（salvianolic acid B，SalB）

SalB是從中藥丹參的根部中提取的化合物，是丹參的主要活性成分。近年來對SalB藥理作用進一步深入研究發(fā)現(xiàn)其具有良好的抗纖維化活性，SalB通過調控多條信號通路來發(fā)揮其良好的抗HF作用[13]。Wu C等[14]實驗發(fā)現(xiàn)，SalB可抑制MAPK的激活，介導Smad2/3在接頭區(qū)域（P-Smad2/3L）和Smad2在C末端（P-Smad2C）的磷酸化，下調P-Smad2/3L和P-Smad2C蛋白水平，降低肝纖維化相關標志物α-SMA、膠原蛋白I、TGF-β表達，以上結果提示SalB可能通過調控MAPK介導的P-Smad2/3L信號通路減輕肝纖維化。Tao S等[15]研究發(fā)現(xiàn)，SalB可能通過下調Hh信號通路中Shh、Ptch1、Smo和Gli1mRNA的表達量，抑制Hh信號通路的激活來發(fā)揮抗HF的作用。轉錄因子MEF2是促進HSCs活化和纖維化的重要調節(jié)因子，SalB可通過拮抗TGF-β1誘導的MEF2信號通路激活，降低MEF2mRNA和蛋白質水平，從而抑制HSCs活化增殖，這可能是其抗HF的另一作用靶點[16]。

4 紅景天苷（salidroside，Sal）

Sal是從中藥紅景天中提取出的一類苯丙烷類糖苷，具有顯著的抗HF作用，其機制可能與調控多條炎癥信號通路而使HSCs分泌減少有關[17]。Feng J等[18]研究發(fā)現(xiàn)：Sal可下調NF-κB信號通路，降低TGF-β1生成，進一步抑制TGF-β1/ Smad3信號通路的激活，從而抑制HSCs活化，此外還可抑制HSCs的自噬、上調MMP2 的表達并下調TIMP1，從而抑制ECM生成。肝纖維化小鼠模型中趨化因子CXCL16高表達，CXCL16能夠促進HSCs遷移、活化和α－SMA、I型膠原的高表達及Akt磷酸化，Sal干預可以拮抗CXCL16，逆轉肝纖維化，提示Sal抗HF機制可能與抑制CXCL16 誘導的HSCs遷移、活化及Akt 磷酸化有關[19]。賈詩惠等[20]研究發(fā)現(xiàn)，肝纖維化小鼠模型中HIF-1α、NRP-1蛋白表達增加，Sal干預治療后HIF-1α、NRP-1顯著下降，Sal可能通過抑制肝細胞中HIF-1α、NRP-1表達，減輕肝損傷，緩解肝纖維化。

5 黃芪甲苷（astragaloside lV）

黃芪甲苷是從中藥黃芪中提取的一種活性成分，其對肝纖維化的形成有改善和延緩作用[21]。近年來，黃芪在臨床治療肝纖維化已取得良好成效。研究表明[22]黃芪甲苷可下調纖維化因子TGF-β1、MCP-1、ɑ-SMA蛋白分子表達量，升高Smad7蛋白水平，提示黃芪甲苷可能通過抑制TGF-β1/ Smad信號通路激活，抑制HSC活化增殖，促進細胞凋亡發(fā)揮其抗肝纖維化作用；此外黃芪甲苷還可以調節(jié)MMP-2、TIMP-2的表達，抑制星狀細胞活化，促進膠原蛋白的合成和代謝，有利于ECM的降解。Chen Z等[23]在血小板衍生生長因子（PDGF）-BB激活的大鼠HSC-T6細胞實驗中發(fā)現(xiàn)黃芪甲苷處理后ECM主要標志物ɑ-SMA、COL1A1和纖連蛋白的表達降低；細胞衰老相關β-半乳糖苷酶（SAβ-gal）活性顯著增強，衰老標志物p21、p53和高遷移率基團AT-hook 1（HMGA1）的表達顯著上調，端粒酶逆轉錄酶（TERT）表達量下調；與對照組相比，黃芪甲苷治療組的HSCs-T6細胞早期和晚期凋亡率均升高，說明黃芪甲苷可能通過促進HSCs-T6衰老及凋亡發(fā)揮其抗HF作用。此外戴鴻志等[24]研究發(fā)現(xiàn)，黃芪甲苷抗HF的分子機制可能與其下調N-cadherin、TGF-β1、ɑ-SMA的蛋白表達，上調E-cadherin 蛋白表達，抑制上皮細胞-間充質轉化。

6 大黃素（emodin）

大黃素是從中藥大黃的根部提取的單體化合物，具有抗纖維化的作用[25]，大黃素可抑制氧化應激、TGF-β/Smad通路及HSCs活化增殖、促進凋亡，降低膠原蛋白合成等來起到抗HF的作用[26]。張峰等[27]研究發(fā)現(xiàn)，大黃素還能上調HSC中的衰老相關分子如SA-β-Gal、p16、p21及Hmga1的表達，并阻滯細胞周期于G0/G1期，進一步研究中發(fā)現(xiàn)大黃素還能促進核受體Nur77與DNA甲基化酶DNMT3b相互作用，從而上調DNMT3b催化的Gls1啟動子甲基化，抑制ERK和Nur77磷酸化，導致Gls1表達及谷氨酰胺代謝受到抑制，進而誘導HSC衰老發(fā)揮抗HF作用。龍丹丹等[28]研究發(fā)現(xiàn)大黃素可下調CTGF、TIMP-1表達量，上調MMP-9表達量，減少膠原蛋白合成，促進ECM降解。Zhao XA等[29]研究發(fā)現(xiàn)，經相對于CCl4肝纖維模型組，大黃素干預組單核細胞趨化因子MCP-1和CCL7表達量顯著降低，Gr1h1單核細胞的浸潤減少；Gr1h1單核細胞相關的促炎及促纖維化因子：IL-1β、TNF-α、GRN、TGF-β1表達也顯著降低；大黃素可能通過抑制MCP-1和CCL7減少Gr1h1單核細胞的浸潤延緩HF。

7 總結與展望

肝纖維化的防治對于阻斷各種慢性肝病走向肝硬化、肝癌至關重要，中藥單體藥理作用廣泛，可多途徑、多靶點、多信號通路調控肝纖維化，又具有副作用小的特點，在治療肝纖維化上有巨大優(yōu)勢。目前中藥單體抗肝纖維化的作用研究已取得一定成就，但對于其機制闡述還不清楚，因此日后的研究工作應從有良好發(fā)展前景的中藥單體出發(fā)，系統(tǒng)、全面、深入研究其抗HF機制，找到新靶點、新機制，為中醫(yī)藥防治肝纖維化帶來新方向、提供新思路，進而擴展至中藥復方的研究探索。此外，由于目前對中藥單體治療肝纖維化研究仍以動物模型為主，其與人體肝纖維化發(fā)生機理差異較大，導致與臨床療效存在差異，因此，在日后的研究探索中，還亟須建立更加契合臨床肝纖維化發(fā)病機制的動物模型。現(xiàn)有大量研究已證實中藥單體在抗炎保肝、抑制HSCs活化增殖及誘導其衰亡凋亡、平衡ECM生成與降解等方面協(xié)同發(fā)揮作用,因此繼續(xù)探討中藥單體抗肝纖維化的研究前景較好。