文│楊保山 (山東省臨邑縣畜牧業(yè)發(fā)展中心)
張翠翠 段國英 石英英 韓開順 (山東省平原縣畜牧業(yè)發(fā)展中心)
葡萄糖酸的鈣鹽、亞鐵鹽、鉍鹽及其他鹽類可用作醫(yī)藥,作為食品添加劑,常用作酸味劑。葡萄糖酸鈉的作用較多,能調(diào)節(jié)人體酸堿平衡,還能恢復(fù)神經(jīng)功能。葡萄糖酸鈉作為一種新型飼料添加劑,具有性質(zhì)穩(wěn)定、成本較低、來源廣、安全、可靠等特點(diǎn),近年來受人們廣泛關(guān)注。陳洪影研究發(fā)現(xiàn),將葡萄糖酸鈉應(yīng)用于凈化病原菌,促進(jìn)有益菌生長,對動物疾病、生長至關(guān)重要。本試驗(yàn)旨在檢測葡萄糖酸、葡萄糖酸鈉對選定菌株生長是否存在影響,同時(shí)做了葡萄糖酸鈉在肉雞生產(chǎn)中的試驗(yàn)。
1.材料。酸奶中分離鑒定得到5株乳酸菌屬細(xì)菌;病料分離鑒定得到5株沙門氏菌屬細(xì)菌;葡萄糖酸(pH=1)、葡萄糖酸鈉(pH=5)均由德州福洋生物科技有限公司提供。
2.方法。
(1)體外試驗(yàn)。單菌株試驗(yàn)分組。
A.沙門氏菌(MHB肉湯液體培養(yǎng))
對照組:不添加
Na+:葡萄糖酸鈉(3%)
H+:葡萄糖酸(3%)
B.乳酸菌(MRS選擇性培養(yǎng)基液體培養(yǎng))
對照組:不添加
Na+:葡萄糖酸鈉(10%)
H+:葡萄糖酸(10%)
混合菌株試驗(yàn)分組
5株沙門氏菌:共500微升(每株100微升)的5株沙門氏菌獨(dú)在10毫升MHB肉湯中培養(yǎng),不添加葡萄糖酸鈉與葡萄糖酸。
5株乳酸菌:共500微升(每株100微升)的5株乳酸菌獨(dú)在10毫升MHB肉湯中培養(yǎng),不添加葡萄糖酸鈉與葡萄糖酸。
對照組:共500微升的5株沙門氏菌與500微升的5株乳酸菌在MHB肉湯中混合培養(yǎng)(意在模擬腸道中的有多種菌共同存在的環(huán)境),不添加葡萄糖酸鈉與葡萄糖酸。
5+5(Na+):共500微升的5株沙門氏菌與500微升的5株乳酸菌在MHB肉湯中混合培養(yǎng)(意在模擬腸道中的有多種菌共同存在的環(huán)境),添加葡萄糖酸鈉(1%)。
5+5(H+):共500微升的5株沙門氏菌與500微升的5株乳酸菌在MHB肉湯中混合培養(yǎng),添加葡萄糖酸(1%)。
培養(yǎng)后分別用MRS選擇性瓊脂培養(yǎng)基稀釋涂布乳酸菌、用SS選擇性培養(yǎng)基稀釋涂布沙門氏菌進(jìn)行菌落計(jì)數(shù),雙方在對方選擇性培養(yǎng)基上不生長。
(2)體內(nèi)試驗(yàn)。試驗(yàn)性臨床試驗(yàn)。
選擇400只1日齡健康817肉食雞雛雞,隨機(jī)分為4組,每組100只。第1組為對照組,正常飼喂。第2組在飲水中添加0.1%的葡萄糖酸鈉(pH=5),第3組正常飼喂2天后,第3天每天每只雞投喂108個沙門氏菌,持續(xù)添加3天;第4組在飲水中添加0.1%葡萄糖酸鈉(pH=5),第3天每天每只雞投喂108個沙門氏菌,持續(xù)添加3天,連續(xù)觀察至20日齡。統(tǒng)計(jì)死亡數(shù)和平均體重。
3.大田試驗(yàn)及水質(zhì)檢測。選擇同一養(yǎng)殖場內(nèi)(平原縣九月家禽養(yǎng)殖場)3個完全相同的817肉雞養(yǎng)殖棚,每棚3萬羽,雞苗為同一廠家(德州佳和牧業(yè)有限公司)同一批次。第1棚為對照組,第2棚在養(yǎng)殖飲水中加入0.1%的葡萄糖酸鈉溶液。飼喂過程中防疫程序、用藥方法和用量相同(按照對照組的用藥指征)。第3棚在養(yǎng)殖過程中添加0.1%的葡萄糖酸鈉溶液。飼喂過程中疫苗防疫程序相同,但在用藥時(shí),按照當(dāng)?shù)赜盟幵瓌t,即在出現(xiàn)臨床用藥指征時(shí)才用藥物(用藥不統(tǒng)一)。從第4天(因?yàn)橛?天開口藥)開始檢測水線前端和水線末端水中大腸桿菌數(shù)量,連續(xù)檢測6天。出欄時(shí)統(tǒng)計(jì)死亡率、藥費(fèi)、出欄體重和料肉比。
4.數(shù)據(jù)處理方法。在各種情況下,數(shù)值不在同一數(shù)量級,故將每毫升菌落形成單位(單位/毫升)的數(shù)值取對數(shù)進(jìn)行比較。
1.體外試驗(yàn)結(jié)果。由表1可知,葡萄糖酸鈉對單獨(dú)的沙門氏菌或乳酸桿菌的生長無顯著影響,而葡萄糖酸對沙門氏菌及乳酸桿菌的生長均有抑制作用。
表1 單菌株試驗(yàn) 菌落形成單位/毫升
由表2可知,在混合培養(yǎng)不加入葡萄糖酸及葡萄糖酸鈉時(shí),與單獨(dú)5株菌培養(yǎng)相比,混合培養(yǎng)對沙門氏菌及乳酸菌的生長無顯著影響,而在加入葡萄糖酸鈉、葡萄糖酸的組則明顯促進(jìn)了乳酸菌而抑制了沙門氏菌的生長。
表2 混合菌株試驗(yàn) 菌落形成單位/毫升
2.體內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果。
(1)試驗(yàn)性臨床試驗(yàn)。由表3可知,20日齡時(shí),第2組雞只成活率和平均體重均最高,且第1、2、4組雞只成活率和平均體重顯著高于第3組。
表3 臨床試驗(yàn)結(jié)果
(2)大田試驗(yàn)。由表4可知,在生產(chǎn)性能方面,飼養(yǎng)過程中第3組的藥費(fèi)低于第1組(0.6元/只),且第2、3組死亡率、料肉比均低于第1組。
表4 對生產(chǎn)性能的影響
(3)水質(zhì)檢測結(jié)果。由表5可知,1、2、3組水線前端大腸桿菌數(shù)差異不明顯,但2、3組在飲水中添加葡萄糖酸鈉后,水線后端的大腸桿菌數(shù)明顯比第1組低。
表5 對水質(zhì)的影響
1.體外試驗(yàn)。葡萄糖酸鈉能在模擬肉雞腸道菌群環(huán)境(沙門氏菌和乳酸桿菌混合培養(yǎng))中表現(xiàn)出明顯的促進(jìn)有益菌(乳酸桿菌)生長,抑制有害菌(沙門氏菌)生長的作用,主要原因是葡萄糖酸鈉提供了一個有利于乳酸桿菌生長而不利于沙門氏菌等有害菌生長的酸性環(huán)境,而乳酸桿菌的生長能減少沙門氏菌在腸道內(nèi)的繁殖,因此,能表現(xiàn)出促進(jìn)有益菌乳酸桿菌生長、抑制有害菌沙門氏菌生長的結(jié)果。
2.體內(nèi)試驗(yàn)。
(1)試驗(yàn)性臨床試驗(yàn)。本試驗(yàn)中,第2組的雞只成活率和平均體重均最高,主要是因?yàn)槠咸烟撬徕c能促進(jìn)益生菌生長,對動物機(jī)體有促生長作用。與第3組相比,第4組主要是因?yàn)橛幸婢貏e是乳酸桿菌已經(jīng)在腸道內(nèi)有一定優(yōu)勢,從第3天開始投喂沙門氏菌,其很難在腸道內(nèi)定植、繁殖,同時(shí)大量乳酸桿菌還能通過調(diào)節(jié)機(jī)體免疫應(yīng)答而緩解沙門氏菌對宿主引起的炎癥反應(yīng)。因此,3組均對沙門氏菌有一定的抵抗能力。
(2)大田試驗(yàn)。肉雞的飲水安全是近年來廣大養(yǎng)殖戶關(guān)注度比較高的問題,特別是水線安全問題備受關(guān)注。細(xì)菌主要來源是管道內(nèi)壁的“生物膜”,其非常有利于大腸桿菌等有害菌的生長,在水線前端加入葡萄糖酸鈉,首先能保障管道內(nèi)長期含有抑制大腸桿菌等有害菌生長的物質(zhì),不利于其繁殖生長,其次能保證飲水健康且能促進(jìn)腸道益生菌生長,具有促生長,降低抗生素用量的作用。
另外葡萄糖酸鈉的來源非常廣泛,很多生產(chǎn)食品級葡萄糖酸鈉企業(yè)的副產(chǎn)品完全可以給動物應(yīng)用。
葡萄酸鈉能促進(jìn)乳酸菌,抑制沙門氏菌生長,從而達(dá)到提高動物抗病能力,具有促進(jìn)動物機(jī)體生長的作用。在肉雞飲水中加入0.1%的葡萄糖酸鈉后,對飲水中的大腸桿菌有一定抑制作用,可以起到降低藥費(fèi),提高肉雞成活率、飼料利用率等作用。