黃國(guó)強(qiáng)，曹廣萍，鐘聲平，黃亮華，劉永宏，趙龍巖，張秀國(guó)，宋建強(qiáng)，劉海娟，陳瑞芳

（1.廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530200；2.廣西精工海洋科技有限公司，廣西 北海 536000；3.廣西海洋研究所有限責(zé)任公司，廣西 北海 536000）

海馬（Hippocampus）在動(dòng)物分類學(xué)上隸屬于脊索動(dòng)物門(mén)（Chordata），脊椎動(dòng)物亞門(mén)（Vertebrata），輻鰭魚(yú)綱（Actinopterygii），海龍目（Syngnathiformes），海龍科（Syngnathidae），海馬屬（Hippocampus）。全球分布有海馬350 種以上，在我國(guó)沿海分布的海馬超過(guò)20種，其中藥用價(jià)值較高的有6 個(gè)種，分別為克氏海馬（H.kelloggi Jordan et Snyder）、刺海馬（H.histrix Kaup）、管海馬（H.kuda Bleeker）、三斑海馬（H.trimaculatus Leach）、日本海馬（H.japonicus Kaup）、冠海馬（H.coronatus temminck et Schlegel）。

海馬被譽(yù)為“海洋人參”?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》中描述為：性溫、味甘、無(wú)毒性作用，有強(qiáng)身健體、溫補(bǔ)腎陽(yáng)、消炎消腫、止咳平喘等功效。根據(jù)我國(guó)歷來(lái)醫(yī)學(xué)記載及民間用藥經(jīng)驗(yàn)，海馬對(duì)治療腎陽(yáng)虛陽(yáng)痿、生育困難、遺尿虛喘、腰膝酸軟、跌打損傷等有明顯療效，還對(duì)腫瘤及神經(jīng)系統(tǒng)疾病等有一定的治療作用。由此可見(jiàn)，海馬的藥用價(jià)值很高，在中醫(yī)上有較高的地位。現(xiàn)代醫(yī)藥學(xué)已證明：海馬及其產(chǎn)品在補(bǔ)腎壯陽(yáng)方面具有較高的價(jià)值，主要表現(xiàn)為提高機(jī)體的性激素水平，改善和提高雄性的性功能。其中膽甾醇是海馬藥用功效的主要物質(zhì)基礎(chǔ)之一?，F(xiàn)對(duì)海馬體內(nèi)膽甾醇含量、其餌料膽甾醇及脂肪含量進(jìn)行綜述。

1 海馬體內(nèi)膽甾醇含量

現(xiàn)代藥理研究表明，海馬甾醇提取物是海馬溫腎壯陽(yáng)的物質(zhì)基礎(chǔ)，膽甾醇參與合成的類固醇激素，在精子形成、精液產(chǎn)生和性功能中起著重要的作用，海馬膽甾醇含量可為制定海馬類藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供參考。由此可見(jiàn)，海馬的膽甾醇含量與海馬作為藥材的質(zhì)量密切相關(guān)。管海馬（Hippocampus kuda）凍干全粉中膽甾醇的含量高達(dá)15.13 mg/g，根據(jù)其中人工養(yǎng)殖管海馬鮮質(zhì)量（12.33 g）與凍干質(zhì)量（3.76 g），換算得到人工養(yǎng)殖管海馬的水分含量為69.51%，鮮管海馬中膽甾醇含量達(dá)到4.613 mg/g。雌性和雄性灰海馬（H.erectus）的膽甾醇含量分別為4.32 和4.14 mg/g，而雌性和雄性三斑海馬（H.trimaculatus）的膽甾醇含量分別為3.84 和2.85 mg/g，不同等級(jí)的大海馬（H.kuda）膽甾醇含量為3.77～7.71 mg/g，有較大的變動(dòng)范圍?？傮w而言，海馬的膽甾醇含量為每100 g 285～771 mg。

2 與其他水產(chǎn)動(dòng)物膽甾醇含量的比較

海水魚(yú)膽甾醇含量高于淡水魚(yú)，海馬（灰海馬和三斑海馬）的膽甾醇含量不僅高于草魚(yú)（Ctenopharyngodon idellus）等淡水魚(yú)和西班牙鯖（Scomberomorus commersonii）等海水魚(yú)，也遠(yuǎn)高于許多日常消費(fèi)的多種甲殼類（蟹、蝦、龍蝦）和貝類（蛤蜊、扇貝和牡蠣），甚至比虎斑烏賊（Sepia pharaoni）等常見(jiàn)頭足類除肝臟和卵巢以外的部位含量高。與其他水產(chǎn)品如魷、對(duì)蝦、毛蚶、縊蟶、竹蟶、牡蠣、海螺、小銀魚(yú)等海產(chǎn)品相比，海馬的膽甾醇含量也明顯偏高。

3 海馬的餌料

在天然海域中，海馬的餌料種類較多，主要為小型甲殼動(dòng)物如橈足類、端足類、真蝦等，也包含其他小型底棲動(dòng)物如線蟲(chóng)類、多毛類幼蟲(chóng)、鹵蟲(chóng)、糠蝦、磷蝦幼體、白蝦、魚(yú)類幼體，以及其他浮游動(dòng)物，其中小型甲殼類浮游動(dòng)物及甲殼類幼體占絕大部分。養(yǎng)殖中也可以將鮮活或冰凍的各種小型甲殼動(dòng)物作為餌料，如端足類的梳肢片鉤蝦（Elasmopus pectenicrus）、鉤蝦（Eriopisa spp.）、橈足類及其幼體、鹵蟲(chóng)及其幼體、經(jīng)過(guò)營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化的輪蟲(chóng)、枝角類脊尾白蝦（Palaemonetes varians）、糠蝦（Mysis spp.），也可以投喂人工飼料，但絕大部分都以前述的各種小型浮游甲殼動(dòng)物作為餌料。

4 海馬餌料的膽甾醇含量

盡管海馬的主要餌料——小型甲殼動(dòng)物的生長(zhǎng)需要膽甾醇，但其不能合成膽甾醇，主要依靠從餌料中獲取膽甾醇和各種甾醇。浮游甲殼動(dòng)物或魚(yú)類幼體等海馬餌料生物的主要餌料，是水體中的浮游植物和有機(jī)碎屑，以及少量海洋生物的幼體，人工培育的浮游甲殼動(dòng)物也主要以各種微藻作為餌料。浮游植物的甾醇含量都較低，但其結(jié)構(gòu)組成較豐富，既含有高等植物常見(jiàn)的甾醇如膽甾醇、谷甾醇、豆甾醇等，也含有一些只在某種微藻或某類微藻中特有的甾醇。整體而言，膽甾醇在除金藻綱外的其他綱微藻中有著廣泛的分布，但含量較低，如巴夫藻（Pavlova sp.）干燥藻粉的膽甾醇含量為0.042%（根據(jù)含量0.421 mg/g 換算），鈍頂螺旋藻（Spirulina platensis）、極大螺旋藻（Spirulina maxima）、鹽澤螺旋藻（Spirulina subsalsa）的甾醇類含量只占生物量的0.011%～0.045%，其中37.7%～49.9%是膽甾醇。由于小型甲殼動(dòng)物的餌料中甾醇類尤其是膽甾醇含量較低，加上其本身不能合成膽甾醇，因此小型甲殼動(dòng)物體內(nèi)的甾醇類含量也較低，如鏢水蚤（Diuptomus sicilis）甾醇類的含量為0.98～4.07 g/L，太平洋的底棲端足類（Lysianassid amphipod）的甾醇的含量為1.347～2.604 mg/g（干質(zhì)量）。大型經(jīng)濟(jì)甲殼動(dòng)物如養(yǎng)殖的蝦類和蟹類，則需要人為在飼料中添加膽甾醇才能滿足其正常生長(zhǎng)的需要。

5 海馬餌料脂肪含量

膽甾醇是動(dòng)物質(zhì)膜的重要成分，可以調(diào)節(jié)細(xì)胞膜的流動(dòng)性，也是類固醇激素和膽酸鹽的前體。海馬作為有鰭類，具有在體內(nèi)利用乙酸和甲羥戊酸合成膽甾醇的能力，甲羥戊酰CoA 還原酶是合成膽甾醇的限速酶。如前所述，海馬的主要餌料——小型甲殼動(dòng)物體內(nèi)甾醇類，尤其是膽甾醇的含量都很低，但海馬體內(nèi)的膽甾醇含量顯然比其他魚(yú)類和多數(shù)海洋生物都高。

海馬的餌料主要為各種小型甲殼動(dòng)物及各種海洋動(dòng)物的幼體，這些生物餌料除含有豐富的各類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，大多數(shù)含有較高的脂肪（表1）。海馬餌料的主要類群橈足類體內(nèi)的脂肪含量非常高，如飛馬哲水蚤（Calanus finmarchicus）蚤狀幼體C3（橈足幼體3 期）～C5（橈足幼體5 期）階段的脂肪含量可以達(dá)到干質(zhì)量的6.47%～17.00%，有報(bào)道C5 階段的脂肪含量甚至可以達(dá)到干質(zhì)量的33%～55%；中華哲水蚤（Calanus sinicus）在滯育期也會(huì)積累大量的脂肪（13.8%～43.1%），鏢水蚤（Diuptomus sicilis）、墨氏胸刺水蚤（Centropages mcmurrichi）、克氏紡錘水蚤（Acartia clausi）等也具有較高的脂肪含量。隨緯度提高，海洋浮游橈足類體內(nèi)的脂肪含量上升，如在熱帶和溫帶可超過(guò)干質(zhì)量的15%，而在極地的平均值超過(guò)30%，南極附近水域的浮游動(dòng)物中尖角似哲水蚤（Calanoides acutus）和近緣哲水蚤（Calanus propinquus）的脂肪含量可超過(guò)干質(zhì)量的30%。同一緯度的浮游橈足類脂肪含量也會(huì)隨水深增加而提高，同時(shí)，肉食性的橈足類比雜食性的橈足類可積累更多的脂肪。其他潛在的小型甲殼類餌料的脂肪含量也較高，如太平洋的底棲端足類的脂肪含量可達(dá)到干質(zhì)量的18.6%～44.9%，鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體、強(qiáng)化后的鹵蟲(chóng)幼體（Nauplii of Artemia）、短額刺糠蝦（Acanthomysis brevirostis）、強(qiáng)壯藻鉤蝦（Ampithoe valida）的脂肪含量（濕質(zhì)量）在0.55%～1.36%，中國(guó)毛蝦（Acetes chinensis）的粗脂肪含量為6.40%，南極磷蝦（Euchaeta antarctica）的脂肪含量可超過(guò)干質(zhì)量的30%。盡管海馬餌料生物的脂肪含量隨餌料種類、發(fā)育階段、分布的緯度等有較大的變動(dòng)，但整體而言脂肪含量都較高。高脂肪含量的餌料的消化吸收，可能增加了對(duì)體內(nèi)膽甾醇為主的甾醇類物質(zhì)的需求。

表1 海馬餌料生物的脂肪含量（干質(zhì)量）

魚(yú)類體內(nèi)的膽甾醇，除了作為動(dòng)物質(zhì)膜的組成成分和類固醇激素的前體外，還是合成膽酸鹽的前體，而膽酸鹽是膽汁酸的主要成分，是膽甾醇代謝過(guò)程中產(chǎn)生的一些甾醇類物質(zhì)，具有較強(qiáng)的表面活性，能通過(guò)降低油水兩相之間的表面張力來(lái)促進(jìn)脂肪乳化成小滴，增加脂肪和脂肪酶之間的接觸面積，加快餌料中脂肪的消化與吸收。膽汁酸的主要生理功能是幫助脂溶性營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，高脂肪的攝入，刺激魚(yú)類膽汁酸合成酶基因的表達(dá)，在飼料中添加膽甾醇或膽汁酸也能夠?qū)︳~(yú)類的脂肪代謝產(chǎn)生顯著影響。顯然，高脂肪含量餌料的消化與吸收，對(duì)膽汁中的膽汁酸需求量較大，而膽甾醇是合成膽汁酸的主要原料，這可能是導(dǎo)致海馬體內(nèi)累積大量膽甾醇的主要原因。

6 研究展望

海馬體內(nèi)的高膽甾醇含量可能是其具有較高藥用價(jià)值的物質(zhì)基礎(chǔ)之一。海馬的主要餌料——小型甲殼動(dòng)物和各種動(dòng)物幼體中的膽甾醇含量雖然不高，但海馬體內(nèi)的肝腸循環(huán)回路，仍舊可以保障攝入體內(nèi)的餌料來(lái)源膽甾醇，能夠在體內(nèi)累積，而且作為有鰭類，海馬也具有合成膽甾醇的能力。

海馬作為重要藥用海洋中藥材，天然資源已經(jīng)衰竭，并成為國(guó)家二級(jí)重點(diǎn)保護(hù)野生動(dòng)物。其將來(lái)的供應(yīng)只能依靠人工養(yǎng)殖，而養(yǎng)殖產(chǎn)品的質(zhì)量調(diào)控技術(shù)是保障中藥材質(zhì)量的關(guān)鍵。膽甾醇含量是海馬藥用功效的物質(zhì)基礎(chǔ)之一，并可為制定海馬類藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供參考。因此，查明海馬體內(nèi)膽甾醇的來(lái)源與累積機(jī)制，并為形成有效的養(yǎng)殖海馬膽甾醇含量調(diào)控技術(shù)提供理論基礎(chǔ)，將是海馬人工養(yǎng)殖領(lǐng)域的重要研究?jī)?nèi)容。

6.1 海馬體內(nèi)膽甾醇來(lái)源

同位素示蹤法，是揭示生物體內(nèi)和細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)代謝理化過(guò)程的有效手段。同時(shí)，隨著色譜和質(zhì)譜技術(shù)的發(fā)展，采用氣相色譜-穩(wěn)定性同位素質(zhì)譜儀（GC-IRMS），分析生物成分的穩(wěn)定同位素組成也成為成熟的技術(shù)。因此，通過(guò)測(cè)定天然餌料和海馬體內(nèi)的膽甾醇的碳和氮穩(wěn)定性同位素比，結(jié)合同位素示蹤法，能夠查明海馬膽甾醇中餌料來(lái)源和內(nèi)源合成的比例，揭示海馬體內(nèi)膽甾醇的來(lái)源。

6.2 海馬體內(nèi)積累膽甾醇的原因

海馬餌料的脂肪含量高，消化時(shí)需要較多的膽酸鹽進(jìn)行乳化，可能是海馬體內(nèi)累積大量膽甾醇的原因之一。但由于海馬是一類繁殖行為特殊的魚(yú)類，高膽甾醇含量是否是由于其繁殖行為需要大量的類甾醇激素維持而積累，不論是哪方面的原因?qū)е履戠薮嫉姆e累，都需要更多的研究來(lái)揭示。

6.3 海馬膽甾醇的合成調(diào)控機(jī)制及生態(tài)學(xué)調(diào)控方法

作為有鰭魚(yú)類，海馬可以利用體內(nèi)乙酸合成膽甾醇，甲羥戊酰CoA 還原酶（HMGCoA 還原酶）是合成過(guò)程的限速酶。因此其基因表達(dá)水平和酶活性對(duì)海馬體內(nèi)膽甾醇的合成與積累，可能起到關(guān)鍵調(diào)控作用。溫度、鹽度、光照周期、光照強(qiáng)度等環(huán)境條件以及營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)，是否會(huì)對(duì)海馬HMGCoA 還原酶基因的表達(dá)和酶的活性產(chǎn)生影響，進(jìn)而影響體內(nèi)膽甾醇的合成和含量，是建立養(yǎng)殖海馬質(zhì)量調(diào)控技術(shù)的理論基礎(chǔ)。在此基礎(chǔ)上建立海馬人工養(yǎng)殖產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)和調(diào)控技術(shù)，生產(chǎn)出高品質(zhì)的藥材海馬，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)對(duì)海馬資源的可持續(xù)利用。