郝生燕，王國(guó)棟，顧 嫻，鄒鳳軒，董 俊，楊發(fā)榮，張兆杰

（1. 甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜草與綠色農(nóng)業(yè)研究所，甘肅 蘭州 730070；2. 景泰縣草窩灘鎮(zhèn)畜牧站，甘肅 景泰 730408）

我國(guó)飼草資源豐富，種類繁多，但優(yōu)質(zhì)牧草資源匱乏，低質(zhì)秸稈類飼草無(wú)法高值化利用一定程度上制約了我國(guó)草食畜牧業(yè)的發(fā)展[1]。早期研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同種類的秸稈、飼草經(jīng)過(guò)科學(xué)合理的加工調(diào)配，可有效改善利用率和飼用品質(zhì)，由此關(guān)于飼草型全混合日糧中粗飼料來(lái)源、配比、組合效應(yīng)研究成為當(dāng)前研究熱點(diǎn)之一[2]。組合效應(yīng)(associative effective, AE)是指來(lái)自不同飼料來(lái)源的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、非營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及抗?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)間互作的整體效應(yīng)。當(dāng)飼料的整體互作使飼糧內(nèi)某養(yǎng)分的利用率或采食量指標(biāo)高于各個(gè)飼料原料數(shù)值的加權(quán)值時(shí)，為“正組合效應(yīng)”；若飼糧的整體指標(biāo)低于各個(gè)飼料原料數(shù)值的加權(quán)值，為“負(fù)組合效應(yīng)”；若二者相等，為“零組合效應(yīng)”[3]。飼草料間的正負(fù)組合效應(yīng)，尤其表現(xiàn)在蛋白質(zhì)飼料或青綠飼料與秸稈飼料混合配比時(shí)，組合效應(yīng)更為明顯[4-5]。如將牧草、蘋果渣、柑橘(Citrus reticulata)與低質(zhì)飼草皇冠雛菊(Compositae)和奶薊(Silybum marianum)配比，低質(zhì)牧草的體外發(fā)酵性能得到顯著提高[6]。張一帆等[7]利用體外產(chǎn)氣法探究玉米秸稈青貯、羊草(Leymuschinensis)、燕麥草(Arrhenatherum elatius)與精飼料間的最優(yōu)組合效應(yīng)，結(jié)果表明，玉米秸稈青貯 ∶ 羊草 ∶ 燕麥草 ∶ 精料為10 ∶ 15 ∶ 25 ∶ 50 時(shí)產(chǎn)生了最大組合效應(yīng)。吳璇等[1]利用體外產(chǎn)氣法探究雜交構(gòu)樹(shù)(Broussonetia papyrifera)、玉米秸稈青貯和燕麥青干草組合的體外消化特征及組合效應(yīng)，發(fā)現(xiàn)混合飼草比單一飼草更能提高體外發(fā)酵效果，雜交構(gòu)樹(shù) ∶ 玉米秸稈青貯 ∶ 燕麥青干草為50 ∶ 25 ∶ 25 時(shí)，組合效應(yīng)最佳。

巨菌草(Pennisetum giganteum)隸屬于禾本科狼尾草屬，是被廣泛應(yīng)用于培育食用菌的一種草本植物，也是一種優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)飼草；在甘肅定西半干旱單作區(qū)種植，鮮草產(chǎn)量在135～165 t·hm-2[8]；在甘肅河西冷涼區(qū)種植，單茬產(chǎn)量達(dá)到140.25 t·hm-2[9]。有研究表明，巨菌草青貯的粗蛋白含量高于飼用玉米青貯和小麥秸稈[10]，完全可作為反芻動(dòng)物的粗飼料原料，然而與其他粗飼料配比使用的相關(guān)研究未見(jiàn)報(bào)道，因此，本試驗(yàn)旨在將巨菌草與苜蓿干草、玉米秸稈、小麥秸稈配比，運(yùn)用體外產(chǎn)氣法評(píng)估組合效應(yīng)，為巨菌草在反芻動(dòng)物養(yǎng)殖中應(yīng)用提供理論參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所用玉米和小麥秸稈、苜蓿干草、巨菌草和精料均源于甘肅省定西市安定區(qū)隆興農(nóng)牧有限責(zé)任公司養(yǎng)殖場(chǎng)。其中巨菌草鮮草在2019 年8 月下旬采集，經(jīng)65 ℃烘干制成風(fēng)干樣品；玉米和小麥秸稈為風(fēng)干樣；苜蓿干草為頭茬苜蓿。體外產(chǎn)氣試驗(yàn)在甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜草與綠色農(nóng)業(yè)研究所完成。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)用飼糧精粗比設(shè)為40 ∶ 60，即飼糧精料補(bǔ)充料占40%，粗飼料占60%，各組飼糧具體原料配比為精料補(bǔ)充料 ∶ 玉米秸稈(小麥秸稈或苜蓿干草) ∶ 巨菌草分別為40 ∶ 60 ∶ 0、40 ∶ 50 ∶ 10、40 ∶ 40 ∶ 20、40 ∶ 30 ∶ 30、40 ∶ 20 ∶ 40、40 ∶ 10 ∶ 50、40 ∶ 0 ∶ 60，共7 種組合，將玉米秸稈、小麥秸稈、苜蓿干草3 種粗飼料與巨菌草、精料補(bǔ)充料配比后形成26 種飼糧，另設(shè)置空白對(duì)照組，用于發(fā)酵瓶產(chǎn)氣量的矯正(表1)。每組飼糧設(shè)5 個(gè)重復(fù)。精料補(bǔ)充料配方組成及營(yíng)養(yǎng)水平如表2所列，4 種粗飼料的養(yǎng)分含量如表3 所列。

表1 飼糧精粗料配比Table 1 The formulation of mixed forages

表2 精料補(bǔ)充料配方組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 2 Composition and nutrient levels of concentrate(dry matter basis)

表3 4 種粗飼料營(yíng)養(yǎng)成分(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 3 The nutrient content of four forages (dry matter basis)

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 瘤胃液供體動(dòng)物

試驗(yàn)用瘤胃液從蘭州市西固區(qū)某養(yǎng)殖場(chǎng)定點(diǎn)采集，所采集的羊只均為湖羊，體重(30 ± 1.2) kg，飼喂飼糧精粗比為60 ∶ 40 的玉米秸稈型全日糧顆粒飼料，每日每只投喂量為1.6 kg，日飼喂2 次(07:00 和17:00)，自由飲水，隨意采食。晨飼前，采用瘤胃液收集泵通過(guò)瘤胃吸管抽取瘤胃液，采集后的瘤胃液經(jīng)4 層紗布過(guò)濾至提前預(yù)熱并充滿CO2的暖瓶中，帶回實(shí)驗(yàn)室即刻置于恒溫水浴箱(39 ℃)中保存。

1.3.2 體外培養(yǎng)程序

體外產(chǎn)氣采用美國(guó)ANKOM RFS 全自動(dòng)氣體測(cè)量系統(tǒng)。將烘干后的飼料經(jīng)高速粉碎過(guò)0.850 mm篩后，按不同組合比例準(zhǔn)確稱取約0.5 g 裝入已恒重的尼龍袋(3 cm × 6 cm)中，采用封口機(jī)熱封，投入250 mL 發(fā)酵瓶中，每個(gè)發(fā)酵瓶持續(xù)通入 CO230 s，排除瓶?jī)?nèi)氧氣，再投入體外發(fā)酵培養(yǎng)液[11](人工唾液 ∶ 瘤胃液 = 2 ∶ 1) 150 mL，立即蓋緊瓶塞，并將每個(gè)發(fā)酵瓶與產(chǎn)氣裝置的傳感器相連接，置于39 ℃恒溫?fù)u床下連續(xù)培養(yǎng)48 h，并分別記錄2、4、6、8、12、24、36、48 h 產(chǎn)氣壓力，發(fā)酵結(jié)束后將發(fā)酵瓶放入冰水中終止發(fā)酵，并收集發(fā)酵液和尼龍袋，用于后續(xù)發(fā)酵參數(shù)和養(yǎng)分含量的測(cè)定[12]。

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 體外產(chǎn)氣量

記錄2、4、6、8、12、24、36、48 h 產(chǎn)氣瓶發(fā)酵時(shí)產(chǎn)生的壓力，并通過(guò)理想氣體方程，轉(zhuǎn)化成氣體體積。

式中：VX為產(chǎn)氣總體積(mL)；Vj為發(fā)酵瓶頂部空間體積(mL)；Ppsi為氣體測(cè)量系統(tǒng)自動(dòng)記錄的壓力(kPa)。

1.4.2 干物質(zhì)降解率

于體外培養(yǎng)48 h 后，即刻從每個(gè)發(fā)酵瓶中取出尼龍袋，樣品經(jīng)干燥后測(cè)定其干物質(zhì)含量，并根據(jù)發(fā)酵前后飼料樣品中干物質(zhì)變化計(jì)算干物質(zhì)降解率(dry matter digestibility，DMD)[13]。

1.4.3 pH、揮發(fā)性脂肪酸和氨態(tài)氮濃度

樣品發(fā)酵48 h 后將所有發(fā)酵瓶置于冰水中終止發(fā)酵，收集發(fā)酵液并測(cè)定pH、揮發(fā)性脂肪酸和氨氮濃度。pH 用pH211 型精密pH 計(jì)(HAN-NA)直接測(cè)定；氨氮含量使用苯酚-次氯酸鈉比色法測(cè)定[14]；VFA 采用氣相色譜儀(日本島津GC-2010 Plus)測(cè)定[15]。

1.4.4 組合效應(yīng)的估算

單項(xiàng)組合效應(yīng)指數(shù)(SFAEI) = (實(shí)測(cè)值 - 加權(quán)估算值) / 加權(quán)估算值 × 100%；

多效組合效應(yīng)指數(shù)(MFAEI)為各單項(xiàng)組合效應(yīng)值之和[16]。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)據(jù)采用SPSS 16.0 軟件One-Way ANOVA 模塊進(jìn)行方差分析，差異顯著時(shí)采用Tukey 法進(jìn)行多重比較，設(shè)定P＜ 0.05 為差異顯著，P＞ 0.05 為差異不顯著。數(shù)據(jù)用平均值 ± 標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同粗飼料組合對(duì)體外發(fā)酵產(chǎn)氣特性的影響

巨菌草、玉米秸稈、小麥秸稈、苜蓿干草和精料單獨(dú)發(fā)酵或組合發(fā)酵，發(fā)酵產(chǎn)氣量隨時(shí)間的增加而升高(表4)。從單一原料發(fā)酵48 h 結(jié)果來(lái)看，產(chǎn)氣量由高到低的順序?yàn)榫?＞ 苜蓿干草 ＞ 小麥秸稈 ＞巨菌草 ＞ 玉米秸稈；從組合類型來(lái)看，精料 + 苜蓿干草 + 巨菌草 ＞ 精料 + 小麥秸稈 + 巨菌草 ＞ 精料 +玉米秸稈 + 巨菌草；從不同飼草比例來(lái)看，精料 +玉米秸稈 + 巨菌草組合類型中，發(fā)酵2、4、6、8、12、24、36、48 h 時(shí)，各組合間產(chǎn)氣量差異均不顯著(P＞0.05)；精料 + 小麥秸稈 + 巨菌草組合類型中，發(fā)酵2、4、6、8、24、36、48 h 時(shí)，各組合間其產(chǎn)氣量差異也不顯著，但在12 h 時(shí)，隨著小麥秸稈添加比例的減少以及巨菌草添加比例的增加，W3P3、W2P4、W1P5、W0P6 組的產(chǎn)氣量顯著大于W6P0、W5P1、W4P2 組(P＜ 0.05)；精料 + 苜蓿干草 + 巨菌草組合類型中，發(fā)酵12 h 時(shí)，A6P0、A5P1、A4P2 組顯著大于A3P3、A1P5、A0P6 組，其余各個(gè)時(shí)間段不同比例的組合其產(chǎn)氣量差異不顯著。

表4 不同粗飼料組合對(duì)產(chǎn)氣量的影響Table 4 Effect of different ratios of roughage on gas production mL·g-1

2.2 不同粗飼料組合對(duì)48 h 發(fā)酵瘤胃液pH 及氨氮、干物質(zhì)降解率及總揮發(fā)性脂肪酸含量的影響

巨菌草、玉米和小麥秸稈、苜蓿干草分別按不同比例進(jìn)行組合后，其pH 均在6.41～7.09 (表5)，從組合類型來(lái)看，精料 + 小麥秸稈 + 巨菌草的pH 平均值(7.02)高于精料 + 苜蓿干草 + 巨菌草(6.73)，精料 +玉米秸稈 + 巨菌草的pH 平均值(6.48)最低。從不同飼草比例來(lái)看，精料 + 玉米秸稈 + 巨菌草組合中，各組間pH 差異不顯著(P＞ 0.05)。精料 + 小麥秸稈 +巨菌草組合中，W4P2、W1P5 組顯著高于W6P0 組(P＜0.05)，精料 + 苜蓿干草 + 巨菌草組合中，A6P0、A5P1、A4P2 組顯著高于A3P3、A2P4、A1P5、A0P6 組。

表5 不同粗飼料組合對(duì)48 h 發(fā)酵瘤胃液發(fā)酵指標(biāo)的影響Table 5 Effects of different proportion of roughage on fermentation indexes of rumen fluid after 48 h fermentation

各組合氨態(tài)氮的濃度均在9.24～19.70 mg·dL-1，從組合類型來(lái)看，精料 + 苜蓿干草 + 巨菌草組合類型的平均值(16.99 mg·dL-1) ＞ 精料 + 玉米秸稈 + 巨菌草組合(15.39 mg·dL-1) ＞ 精料 + 小麥秸稈 + 巨菌草組合(10.90 mg·dL-1)。從不同飼草比例來(lái)看，精料 +苜蓿干草 + 巨菌草組合、精料 + 玉米秸稈 + 巨菌草組合、精料 + 小麥秸稈 + 巨菌草組合的不同比例均差異不顯著(P＞ 0.05)。

各組合的干物質(zhì)降解率在52.35%～63.14%，從組合類型來(lái)看，精料 + 苜蓿干草 + 巨菌草組合類型的平均值(59.62%) ＞ 精料 + 小麥秸稈 + 巨菌草組合(56.88%) ＞ 精料 + 玉米秸稈 + 巨菌草組合(54.51%)。從不同飼草比例來(lái)看，精料 + 玉米秸稈 +巨菌草組合中，C3P3、C2P4、C1P5 組的干物質(zhì)降解率顯著大于C6P0、C5P1、C4P2、C0P6 組(P＜ 0.05)；精料 + 小麥秸稈 + 巨菌草組合中，W1P5 組與W3P3 組和W4P2 差異不顯著(P＞ 0.05)，但顯著高于其余各組合；精料 + 苜蓿干草 + 巨菌草組合中，A5P1 和A3P3 顯著高于其余各組合。

各組合的總揮發(fā)性脂肪酸含量在49.56～68.54 mmol·L-1。從組合類型來(lái)看，精料 + 苜蓿干草 + 巨菌草組合類型的平均值(61.46 mmol·L-1) ＞ 精料 +小麥秸稈 + 巨菌草組合(58.18 mmol·L-1) ＞ 精料 +玉米秸稈 + 巨菌草組合(54.17 mmol·L-1)，從不同飼草比例來(lái)看，精料 + 玉米秸稈 + 巨菌草組合中，C2P4 組顯著高于其余各組合(P＜ 0.05)，而C6P0 組顯著低于其余各組合；精料 + 小麥秸稈 + 巨菌草組合中，W2P4 組顯著高于其余各組合；精料 + 苜蓿干草 + 巨菌草組合中，A3P3 組顯著高于其余各組合，A6P0 和A5P1 顯著低于其余各組合。

2.3 不同組合比例粗飼料組合效應(yīng)

體外發(fā)酵各單一指標(biāo)并沒(méi)有完全呈現(xiàn)規(guī)律性變化(表6)，以單一指標(biāo)為選優(yōu)依據(jù)，并不能選出一個(gè)合理的優(yōu)化飼草組合，所以用多效組合效應(yīng)指數(shù)評(píng)價(jià)更為科學(xué)。本試驗(yàn)計(jì)算產(chǎn)氣量、干物質(zhì)降解率、氨態(tài)氮含量及總揮發(fā)性脂肪酸含量的單項(xiàng)組合效應(yīng)指數(shù)，累加獲得多效組合效應(yīng)指數(shù)，此數(shù)值越大，組合效應(yīng)越好。當(dāng)巨菌草分別以不同比例與玉米秸稈、小麥秸稈和苜蓿干草混合時(shí)，各處理組合都發(fā)生了正組合效應(yīng)。從組合類型來(lái)看，精料 + 苜蓿干草 + 巨菌草組合的多效組合效應(yīng)最高，其次為精料 +小麥秸稈 + 巨菌草組合，精料 + 玉米秸稈 + 巨菌草組合最低。從不同飼草比例來(lái)看，精料 + 玉米秸稈 +巨菌草組合中，C2P4 和C4P2 的多效組合效應(yīng)排序較高，但整體組合效應(yīng)偏低。在精料 + 小麥秸稈 +巨菌草組合中，W2P4 的多效組合效應(yīng)排序高于其他組合，其次為W3P3 和W1P5。精料 + 苜蓿干草 +巨菌草組合中，A5P1 的多效組合效應(yīng)排序最高，其次為A6P0 和A4P2，這3 組綜合組合效應(yīng)值最大，整體組合效應(yīng)偏高。因此，飼草組合通過(guò)營(yíng)養(yǎng)特性間的互補(bǔ)，可提高混合飼草的整體發(fā)酵水平。

表6 不同組合比例粗飼料組合效應(yīng)Table 6 Effects of different forage combinations

3 討論

3.1 不同粗飼料組合對(duì)體外發(fā)酵產(chǎn)氣量的影響

飼料之間的組合效應(yīng)具有普遍性與可控性，將不同種類的飼草進(jìn)行混合后，原本并不均衡的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)由于各種飼草的互補(bǔ)而更加全面，充分發(fā)揮飼草料之間的正組合效應(yīng)，改善劣質(zhì)飼料的降解率，提高草食家畜對(duì)飼草料的利用率[17-18]。國(guó)內(nèi)外均采用體外發(fā)酵法對(duì)飼草組合效應(yīng)進(jìn)行研究，Caton 和Dhuyvetter[19]研究表明，牧草補(bǔ)飼少量玉米和豆粕后，在消化率上產(chǎn)生了正組合效應(yīng)。夏洪澤等[20]以不同分級(jí)指數(shù)和飼草組合效應(yīng)為依據(jù)，將不同類型粗飼料進(jìn)行組合配比并篩選出最優(yōu)組合，最大限度地發(fā)揮飼草間的正組合效應(yīng)。而飼草的組合效應(yīng)可以通過(guò)產(chǎn)氣量、揮發(fā)性脂肪酸、氨氮濃度、瘤胃液的pH、有機(jī)質(zhì)消化率等體外發(fā)酵產(chǎn)物來(lái)衡量[5,21]。產(chǎn)氣量是綜合反映飼料可發(fā)酵程度的指標(biāo)。產(chǎn)氣量越大，說(shuō)明可降解的發(fā)酵底物含量越多，瘤胃微生物活力越大。Nsahlai 等[22]對(duì)豆科田菁屬(Sesbania)牧草的研究發(fā)現(xiàn)，體外發(fā)酵的累積產(chǎn)氣量與發(fā)酵底物的粗蛋白含量正相關(guān)，而與底物的NDF 含量負(fù)相關(guān)。蘆巖等[23]對(duì)棉稈和甜菜渣進(jìn)行混合發(fā)酵，發(fā)現(xiàn)體外發(fā)酵的累積產(chǎn)氣量與發(fā)酵底物的碳水化合物和混合發(fā)酵產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)正相關(guān)。本研究結(jié)果表明，將玉米、小麥秸稈和苜蓿干草以不同比例分別與巨菌草組合時(shí)，產(chǎn)氣量存在差異。從組合類型來(lái)看，精料 + 苜蓿干草 + 巨菌草組合各個(gè)時(shí)間段的平均產(chǎn)氣量 ＞ 精料 + 小麥秸稈 + 巨菌草組合 ＞ 精料 +玉米秸稈 + 巨菌草組合，原因可能是不同組合含有易于發(fā)酵的底物種類和含量不同。其中精料 +苜蓿干草 + 巨菌草組合中，其粗蛋白的含量相對(duì)較高，可以提供給微生物生長(zhǎng)所需要的氮源更多，而且牛驍麟等[24]發(fā)現(xiàn)，隨著日糧粗蛋白質(zhì)水平的增加，育肥湖羊瘤胃內(nèi)纖維分解菌數(shù)量呈增加趨勢(shì)，導(dǎo)致其對(duì)底物纖維物質(zhì)的降解率提高，產(chǎn)氣量也提高，這與夏洪澤等[20]、Zhang 和Liu[25]的研究結(jié)果基本一致。

3.2 不同粗飼料組合對(duì)48 h 發(fā)酵液pH、氨態(tài)氮、干物質(zhì)降解率及總揮發(fā)性脂肪酸含量的影響

瘤胃液pH 過(guò)低或過(guò)高都會(huì)影響瘤胃微生物的活性和瘤胃的正常發(fā)酵。已有研究表明， 反芻動(dòng)物瘤胃液的pH 正常變化范圍為6.0～7.5[26-27]。本研究中各組pH 介于6.41～7.09，與早期研究結(jié)果一致[28]。而瘤胃pH 的變化受反芻動(dòng)物唾液分泌、飼糧結(jié)構(gòu)、有機(jī)酸生成量、吸收量和排出量等多種因素影響。張立濤等[29]表明瘤胃pH 與飼料中NDF含量在一定范圍內(nèi)正相關(guān)，日糧NDF 含量的增加可刺激反芻動(dòng)物唾液分泌的增加，從而稀釋瘤胃液，導(dǎo)致瘤胃液pH 逐漸升高。本研究中，精料 + 玉米秸稈 + 巨菌草組合發(fā)酵48 h 時(shí)pH 最低，可能是由于組合飼糧中含有較低NDF 以及發(fā)酵產(chǎn)生較高的VFA 所致。

氨態(tài)氮是飼料蛋白、內(nèi)源性蛋白及非蛋白氮的降解產(chǎn)物，也是菌體蛋白的合成原料，其濃度一定程度可反映日糧中蛋白的降解及微生物蛋白的合成狀況，若過(guò)高則會(huì)加重機(jī)體氮代謝的負(fù)擔(dān)，供應(yīng)不足則微生物合成受阻，動(dòng)物生產(chǎn)性能降低[30]。Calsamiglia[31]研究指出，瘤胃氨態(tài)氮正常濃度為6.3～27.5 mg·dL-1，本研究中，飼糧發(fā)酵48 h 時(shí)玉米和小麥秸稈、苜蓿干草與巨菌草的不同比例組合對(duì)氨態(tài)氮濃度影響不大，其濃度在9.24～19.70 mg·dL-1，均在正常范圍內(nèi)，適宜瘤胃微生物的生長(zhǎng)。

本研究中精料 + 苜蓿干草 + 巨菌草組合的平均干物質(zhì)降解率最高，可能與粗蛋白的平均含量較高，而NDF 和ADF 的平均含量較低有關(guān)。Cheema等[32]研究發(fā)現(xiàn)，日糧中蛋白質(zhì)水平較高，能讓干物質(zhì)在瘤胃中的降解更加完全。Broderick 和Kang[14]研究表明，日糧中蛋白質(zhì)水平的增加會(huì)顯著提高NDF和ADF 的消化率。馮仰廉[33]研究表明，粗飼料的有機(jī)物質(zhì)體外消化率與粗飼料的NDF 含量負(fù)相關(guān)。

VFA 主要來(lái)源于微生物對(duì)碳水化合物的降解，它為動(dòng)物生產(chǎn)提供能量以及維持瘤胃環(huán)境。有研究表明，不同的瘤胃pH 影響瘤胃內(nèi)微生物的數(shù)量以及生長(zhǎng)速度，從而影響瘤胃內(nèi)揮發(fā)性脂肪酸的產(chǎn)生量，且體外發(fā)酵時(shí)發(fā)酵液的總揮發(fā)性脂肪酸濃度與產(chǎn)氣量呈較強(qiáng)正相關(guān)關(guān)系[34-35]。在本研究中玉米和小麥秸稈、苜蓿干草與巨菌草以不同比例混合，各混合發(fā)酵液所含有的不同類型的碳水化合物的比例也就不同，精料 + 苜蓿干草 + 巨菌草組合的平均總揮發(fā)性脂肪酸含量最高，說(shuō)明該組合模式能為瘤胃微生物提供更多的發(fā)酵底物，有機(jī)物利用率更高。3 種組合模式的總揮發(fā)性脂肪酸濃度與產(chǎn)氣量趨勢(shì)一致，與前人的研究結(jié)果一致[35]。

3.3 不同組合比例粗飼料組合效應(yīng)

本研究將玉米秸稈、小麥秸稈、苜蓿干草分別與巨菌草以不同比例混合后，整體發(fā)酵水平優(yōu)于任一種飼草單獨(dú)發(fā)酵。其中，精料 + 苜蓿干草 + 巨菌草組合的多效組合效應(yīng)最大，可能是兩者組合后底物中飼料原料的配比更為合理，飼料養(yǎng)分的平衡性與互補(bǔ)性較好，實(shí)現(xiàn)了能氮相對(duì)平衡，增大了飼糧發(fā)酵程度，提高了飼料的消化率。韓肖敏等[36]研究發(fā)現(xiàn)，玉米秸稈 ∶ 稻草 ∶ 玉米秸稈青貯為24 ∶ 16 ∶ 60 時(shí)多項(xiàng)組合效應(yīng)最優(yōu)。唐德富等[17]研究發(fā)現(xiàn)，精料 ∶ 玉米芯 ∶ 苜蓿為40 ∶ 30 ∶ 30 和30 ∶ 10 ∶ 60 時(shí)，能提高瘤胃的發(fā)酵水平和飼料利用率。盡管本研究發(fā)現(xiàn)通過(guò)粗飼料間的配比能夠有效改善飼用價(jià)值，但因體外試驗(yàn)僅為體內(nèi)試驗(yàn)的模擬過(guò)程，因此本研究推薦組合模式及配比還需生產(chǎn)中進(jìn)一步驗(yàn)證。

4 結(jié)論

從單一原料發(fā)酵48 h 結(jié)果來(lái)看，產(chǎn)氣量：精料 ＞苜蓿干草 ＞ 小麥秸稈 ＞ 巨菌草 ＞ 玉米秸稈；基于產(chǎn)氣量、干物質(zhì)降解率、氨態(tài)氮含量及總揮發(fā)性脂肪酸含量及單項(xiàng)組合效應(yīng)和多效組合效應(yīng)等指標(biāo)得出，整體組合效應(yīng)最高的為精料 + 苜蓿干草 + 巨菌草組合，其次為精料 + 小麥秸稈 + 巨菌草組合，整體組合效應(yīng)最低的為精料 + 玉米秸稈 + 巨菌草組合。其中精料 + 玉米秸稈 + 巨菌草組合中，其組合比例為40 ∶ 20 ∶ 40 時(shí)組合效果最優(yōu)，精料 + 小麥秸稈 +巨菌草組合類型中，其組合比例為40 ∶ 20 ∶ 40 時(shí)組合效果最優(yōu)，精料 + 苜蓿干草 + 巨菌草組合類型中，其組合比例為40 ∶ 50 ∶ 10 時(shí)組合效應(yīng)更好。