■宋承磊 李晨雷 劉鎣珂 齊昆龍 豆雅晴 鄭振宇

（河南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，河南鄭州 450046）

目前，在飼料中添加飼用酶制劑已經(jīng)得到普遍認(rèn)可，尤其是在動(dòng)物飼料中禁止使用抗生素的時(shí)代，飼用酶制劑作為綠色環(huán)保型飼料添加劑具有很大的優(yōu)勢(shì)[1]。飼用酶制劑可提高飼料利用率，改善動(dòng)物腸道健康，降低畜禽排泄物中含氮、磷有機(jī)物等對(duì)環(huán)境造成污染的物質(zhì)含量，對(duì)畜禽生產(chǎn)性能及產(chǎn)品品質(zhì)均產(chǎn)生積極影響[2-3]。飼用酶制劑種類繁多，但存在穩(wěn)定性差，容易受高、低溫及pH等外界環(huán)境條件的影響而失活等問題。本試驗(yàn)研究的蜘蛛源堿性金屬蛋白酶（Arazyme?）是韓國一家昆蟲生物公司利用現(xiàn)代生物技術(shù)得到的一種綠色環(huán)保型飼料添加劑，源自一種名為Nephila Clavata的蜘蛛腸道共生的變形斑沙雷菌（Serratia proteamaculans）所分泌的酶。相比于普通飼用酶制劑，蜘蛛源堿性金屬蛋白酶具有更強(qiáng)的蛋白分解能力以及耐高溫、較寬pH等特點(diǎn)，且日糧中含有的大部分金屬離子是蜘蛛源堿性金屬蛋白酶的激活劑，可使蜘蛛源堿性金屬蛋白酶活性提高2～4倍[4-5]。目前，蜘蛛源堿性金屬蛋白酶已經(jīng)在畜禽養(yǎng)殖業(yè)中得到應(yīng)用，尤其在提高動(dòng)物飼料利用率和改善奶牛乳房炎等方面具有良好效果[6]。

蜘蛛源堿性金屬蛋白酶作為一種具有高效蛋白分解能力的新型蛋白酶，對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、分枝桿菌等多種致病菌具有一定的抑菌活性，對(duì)肺炎、支氣管炎、皮膚感染等炎癥有明顯的消炎作用，可以預(yù)防并緩解多種呼吸道疾病和大腸桿菌引起的腹瀉。本試驗(yàn)通過在妊娠母豬和保育仔豬日糧中添加一定劑量的蜘蛛源堿性金屬蛋白酶制劑，分析其對(duì)妊娠母豬繁殖性能和保育仔豬生長性能及健康狀況等方面的改善效果，以期為生產(chǎn)上提高妊娠母豬繁殖性能和保育仔豬生長性能尋求有效方法。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)選用蜘蛛源堿性金屬蛋白酶制劑（韓國英賽得公司），其主要成分Arazyme蛋白酶是從蜘蛛Nephila Clavata消化道內(nèi)分離出的變形斑沙雷菌所分泌，每千克蛋白酶制劑的成分含量為：140萬IU，含Arazyme蛋白酶、250 g硅藻土、650 g蛭土、重金屬鉛（Pb）≤50 mg、重金屬砷（As）≤5 mg、水分≤20 g。其他試驗(yàn)材料均由河南省黃泛區(qū)鑫欣牧業(yè)有限公司提供。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.2.1 妊娠母豬

選擇4棟舍分娩前30 d的妊娠母豬共97頭作為試驗(yàn)對(duì)象，分為試驗(yàn)組和對(duì)照組，試驗(yàn)組共47頭，對(duì)照組共50頭，每頭母豬為一個(gè)重復(fù)。試驗(yàn)妊娠母豬胎次相同、體況良好、預(yù)產(chǎn)期相近。試驗(yàn)為期30 d，對(duì)照組母豬飼喂基礎(chǔ)日糧，基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)組于基礎(chǔ)日糧中添加100 g/t蜘蛛源堿性金屬蛋白酶。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平

1.2.2 保育仔豬

根據(jù)體重相近、健康狀況相似、斷奶日期相近等原則，選取平均日齡為45 d 的斷奶仔豬180 頭（與試驗(yàn)妊娠母豬不屬于同一批次），隨機(jī)分為試驗(yàn)組和對(duì)照組2 組，每組9 個(gè)重復(fù)（9 個(gè)欄），每個(gè)重復(fù)10 頭仔豬。試驗(yàn)開始前先進(jìn)行5 d 的預(yù)試驗(yàn)，預(yù)試驗(yàn)期間所有仔豬均飼喂基礎(chǔ)日糧。正試期30 d，對(duì)照組為基礎(chǔ)日糧，基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)組于基礎(chǔ)日糧中添加200 g/t蜘蛛源堿性金屬蛋白酶。

1.3 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.3.1 妊娠母豬測(cè)定指標(biāo)

妊娠天數(shù)（產(chǎn)仔日期-配種日期）、總產(chǎn)仔數(shù)、活仔數(shù)、死胎數(shù)、健仔數(shù)、畸形數(shù)、弱仔數(shù)、木乃伊數(shù)和仔豬初生窩重、平均日采食量、哺乳仔豬腹瀉率、死淘率。

平均日采食量[ADFI，kg/（頭·d）]=試驗(yàn)?zāi)肛i總采食量/（試驗(yàn)天數(shù)×試驗(yàn)?zāi)肛i頭數(shù)）

仔豬腹瀉率（%）=每窩腹瀉仔豬數(shù)/每窩活仔數(shù)

仔豬死淘率（%）=每窩死淘仔豬數(shù)/每窩活仔數(shù)

1.3.2 保育仔豬測(cè)定指標(biāo)

每頭仔豬試驗(yàn)開始時(shí)和結(jié)束時(shí)體重、平均日增重、平均日采食量、料重比、仔豬腹瀉率、死淘率。

平均日增重[ADG，g/（頭·d）]=（試驗(yàn)結(jié)束時(shí)總個(gè)體重-試驗(yàn)開始時(shí)總個(gè)體重）/（試驗(yàn)天數(shù)×試驗(yàn)保育仔豬頭數(shù)）

平均日采食量[ADFI，g/（頭·d）]=總采食量/（試驗(yàn)天數(shù)×試驗(yàn)保育仔豬頭數(shù)）

料重比=平均日采食量/平均日增重

1.4 數(shù)據(jù)處理方法

試驗(yàn)數(shù)據(jù)首先用Excel 進(jìn)行整理，再使用SPSS 26.0 進(jìn)行單因素方差分析+t檢驗(yàn)，用“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。P＜0.05為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 添加蜘蛛源堿性金屬蛋白酶對(duì)妊娠母豬繁殖性能的影響（見表2）

表2 蜘蛛源堿性金屬蛋白酶對(duì)妊娠母豬繁殖性能的影響

由表2可知，在妊娠母豬日糧中添加100 g/t蜘蛛源堿性金屬蛋白酶，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組母豬產(chǎn)弱仔數(shù)減少36.96%，且差異顯著（P＜0.05）；試驗(yàn)組母豬產(chǎn)死胎數(shù)減少30.30%，平均日采食量提高10.48%，妊娠天數(shù)縮短0.95 d，產(chǎn)程縮短11.33 min，仔豬的初生窩重提高7.20%，差異均未達(dá)到顯著水平（P＞0.05）。

2.2 添加蜘蛛源堿性金屬蛋白酶對(duì)保育仔豬生長性能的影響（見表3）

由表3 可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組保育仔豬末重提高2.59%，仔豬增重提高3.11%，平均日增重提高3.09%，且差異顯著（P＜0.05）；另外，保育仔豬平均日采食量提高9.23%（P＞0.05）。對(duì)保育仔豬料重比進(jìn)行分析，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組提高5.71%，且試驗(yàn)組顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。

表3 蜘蛛源堿性金屬蛋白酶對(duì)保育仔豬生長性能的影響

2.3 添加蜘蛛源堿性金屬蛋白酶對(duì)仔豬腹瀉率和死淘率的影響（見表4、表5）

表4 蜘蛛源堿性金屬蛋白酶對(duì)哺乳仔豬腹瀉率和死淘率的影響

表5 蜘蛛源堿性金屬蛋白酶對(duì)保育仔豬腹瀉率和死淘率的影響

由表4可知，在妊娠母豬日糧中添加100 g/t蜘蛛源堿性金屬蛋白酶，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組哺乳仔豬腹瀉率降低44.30%，死淘率降低70.52%，且差異顯著（P＜0.05）。由此說明，飼料中添加蜘蛛源堿性金屬蛋白酶可以降低哺乳仔豬營養(yǎng)性腹瀉的發(fā)生及仔豬死淘率。

由表5可知，對(duì)于保育仔豬，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組在日糧中添加200 g/t蜘蛛源堿性金屬蛋白酶，仔豬腹瀉率降低42.93%，死淘率降低60.07%，且差異不顯著。

3 討論

3.1 添加蜘蛛源堿性金屬蛋白酶對(duì)妊娠母豬繁殖性能和保育仔豬生長性能的影響

近年來，酶制劑作為添加劑在動(dòng)物飼料中被廣泛應(yīng)用。國內(nèi)外研究表明，飼用蛋白酶可以彌補(bǔ)動(dòng)物內(nèi)源性蛋白酶的不足，提高動(dòng)物對(duì)飼料中營養(yǎng)成分的利用率，改善機(jī)體健康狀況，從而使動(dòng)物生產(chǎn)性能達(dá)到更高的水平，而且一些蛋白酶對(duì)改善飼料的適口性也有很好的效果[7]。蜘蛛源堿性金屬蛋白酶作為一種綠色環(huán)保添加劑，其強(qiáng)大的蛋白分解能力能夠促進(jìn)豬對(duì)飼料中營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，彌補(bǔ)哺乳仔豬和保育仔豬內(nèi)源性消化酶不足或活力低的缺陷。另外，保育階段仔豬早期強(qiáng)制斷奶、轉(zhuǎn)舍易引起斷奶應(yīng)激綜合征，對(duì)保育仔豬生產(chǎn)性能及自身腸道健康產(chǎn)生不良影響[8-9]。仔豬斷奶后，維持機(jī)體正常生長的營養(yǎng)物質(zhì)由高乳糖、高脂肪的液態(tài)狀易消化的母乳轉(zhuǎn)變成難吸收的低乳糖、含有大分子蛋白的谷物飼料，使各種胃蛋白酶及胰蛋白酶活性急劇減小而產(chǎn)生應(yīng)激[10]。為減小消化性應(yīng)激的影響，可在日糧中添加蜘蛛源堿性金屬蛋白酶或其他蛋白酶來降解飼料中難以消化的物質(zhì)，使飼料中的營養(yǎng)物質(zhì)能夠被更好消化吸收，從而提高體增重，減少營養(yǎng)性腹瀉的發(fā)生。徐勇本等[11]研究發(fā)現(xiàn)，在斷奶仔豬日糧中添加0.1%蜘蛛源堿性金屬蛋白酶，仔豬的平均日增重、平均日采食量、料重比等指標(biāo)也有明顯提高。同時(shí)蜘蛛源堿性金屬蛋白酶具有抑菌、消炎功效，游純波等[12]研究發(fā)現(xiàn)，在妊娠和哺乳母豬日糧中添加蜘蛛源堿性金屬蛋白酶可以預(yù)防母豬乳腺炎、提高母豬泌乳量和改善母乳品質(zhì)。另一方面，蜘蛛源堿性金屬蛋白酶應(yīng)用于奶牛，已經(jīng)被證明能夠顯著降低乳中體細(xì)胞含量、提高奶牛乳產(chǎn)品以及乳品質(zhì)（乳蛋白、乳脂率等）[13]。有研究發(fā)現(xiàn)，在保證乳品質(zhì)的前提下，較高泌乳量有利于提高哺乳仔豬增重和成活率[14]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，蜘蛛源堿性金屬蛋白酶對(duì)妊娠母豬繁殖性能產(chǎn)生了積極影響，但并沒有改善保育仔豬的料重比，考慮到飼養(yǎng)過程中存在飼料浪費(fèi)等問題，因此，蜘蛛源性金屬蛋白酶對(duì)保育仔豬生長性能的積極影響還有待探索。

3.2 添加蜘蛛源堿性金屬蛋白酶對(duì)仔豬腹瀉率和死淘率的影響

哺乳階段和保育初期仔豬消化機(jī)能尚不完善，消化酶種類少、活力不足、自身免疫力又比較低下，早期斷奶應(yīng)激對(duì)保育后期仔豬消化機(jī)能存在一定影響[15-16]。仔豬消化能力差，母乳或仔豬飼料不能被完全利用，尤其是仔豬斷乳后，胃酸及消化酶分泌不足，造成飼料在胃腸道內(nèi)缺少足夠的分解酶而難以消化的現(xiàn)象，容易使難以消化的食物移向腸道后段，從而為大腸桿菌等微生物群落提供養(yǎng)分而迅速繁殖，進(jìn)而產(chǎn)生腹瀉[17-18]。因此，在仔豬飼料中添加酶制劑是非常有必要的，酶制劑可通過補(bǔ)充仔豬分泌不足的內(nèi)源酶，提高飼料消化利用率，降低營養(yǎng)性腹瀉的發(fā)生[19]。且蜘蛛源堿性金屬蛋白酶本身具有廣譜的抗菌抗病毒作用，能夠抑制多種致病菌的生長繁殖，通過改善豬只的健康增強(qiáng)機(jī)體免疫力，從而預(yù)防細(xì)菌性、病毒性腹瀉的發(fā)生。本試驗(yàn)結(jié)果顯示哺乳仔豬腹瀉率顯著降低44.30%，死淘率顯著降低70.52%，保育仔豬腹瀉率和死淘率也均減少，表明蜘蛛源堿性金屬蛋白酶對(duì)于預(yù)防和治療仔豬腹瀉的效果比較明顯。

4 結(jié)論

①在妊娠母豬日糧中添加適量蜘蛛源堿性金屬蛋白酶，弱仔及死胎數(shù)減少，仔豬初生窩重提高，腹瀉率、死淘率顯著下降。

②在保育仔豬日糧中添加適量蜘蛛源堿性金屬蛋白酶，腹瀉率、死淘率下降，仔豬增重顯著提高，但料重比也顯著提高。

③蜘蛛源堿性金屬蛋白酶對(duì)妊娠母豬繁殖性能和保育仔豬健康狀況具有一定改善作用，但對(duì)保育仔豬生長性能的積極影響還有待探索。