喻娓

（武漢市第七醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北 武漢 430071）

自身免疫性肝病（autoimmune liver disease）屬于一種慢性肝臟疾病，主要包括原發(fā)性硬化性膽管炎（PSC）、原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）、自身免疫性肝炎（AIH）等[1，2]。目前，關(guān)于自身免疫性肝病的病因、病機(jī)尚未完全明確，普遍認(rèn)為由自身免疫及肝膽損傷所引起[3]。臨床缺乏特異性表現(xiàn)，且如果不及時(shí)有效治療，可能會(huì)引發(fā)肝衰竭，嚴(yán)重威脅患者的生命安全[4]。同時(shí)不同分型臨床治療方法存在差異，因此早期發(fā)現(xiàn)、明確診斷具有重要的臨床價(jià)值[5]。有研究指出[6]，不同類(lèi)型與病理特征的自身免疫性肝病具有各自的特點(diǎn)，自身免疫性抗體可能也存在差異[7]。本研究結(jié)合2019 年6 月-2020 年12 月我院傳染科接診的140 例肝炎患者臨床資料，觀察自身免疫性肝病相關(guān)自身免疫性抗體的臨床應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019 年6 月-2020 年12 月武漢市第七醫(yī)院傳染科接診的140 例肝病患者為研究對(duì)象，其中原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）34 例、自身免疫性肝炎（AIH）60 例、丙肝6 例、血吸蟲(chóng)肝病4 例、肝硬化24 例、肝功能不全10 例、藥物性肝炎2 例。年齡17～82 歲，平均年齡（49.55±32.58）歲；女82例，男58 例。本研究經(jīng)過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者自愿參加本研究，并簽署知情同意書(shū)。

1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合臨床肝病診斷標(biāo)準(zhǔn)[8]；②均未合并肝腫瘤、酒精性肝硬化等肝臟疾病[9]。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并肝、腎、心、腦血管系統(tǒng)等嚴(yán)重疾病者；②認(rèn)知障礙、合并嚴(yán)重惡性腫瘤；③依從性較差，不能配合者；④隨訪資料不完善者。

1.3 方法

1.3.1 儀器和試劑 采用熒光顯微鏡（BH-2 型，重慶澳浦），應(yīng)用歐蒙（杭州）醫(yī)學(xué)診斷有限公司提供的抗核抗體IgG 檢測(cè)試劑盒，基質(zhì)分別為人Hep-2 細(xì)胞（HEP-2 cell）、猴肝（HEPAR PRIM）。采用浩歐博全自化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，應(yīng)用江蘇浩歐博生物醫(yī)藥股份有限公司提供的自身免疫性抗體八項(xiàng)的檢測(cè)試劑盒。采用日立牌全自動(dòng)生化分析儀（型號(hào)：7600）及其配套試劑（由四川邁克生產(chǎn)）進(jìn)行血清肝功能ALT、AST、GGT、ALP 各指標(biāo)檢測(cè)。

1.3.2 檢測(cè)方法 運(yùn)用磁微?；瘜W(xué)發(fā)光法對(duì)抗CENPB 抗體（CENPB）、抗線粒體抗體（M2）、抗Ro52抗體（Ro52）、抗GP210 抗體（GP210）、抗Sp100 抗體（Sp100）、抗肝腎微粒體抗體（LKM-1）、抗肝胰抗體與抗可溶性肝抗原抗體（SLA/LP）、抗1 型肝細(xì)胞溶質(zhì)抗原抗體（LC-1）進(jìn)行測(cè)定；運(yùn)用間接免疫熒光法對(duì)抗核抗體（ANA）進(jìn)行稀釋度檢測(cè)，陽(yáng)性評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)為在不同的基質(zhì)細(xì)胞里有特征性黃綠色熒光形態(tài)出現(xiàn)。血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）、堿性磷酸酶（ALP）檢測(cè)C 采用酶法，嚴(yán)格按照《WS/T 404.1-2012 臨床常用生化檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間》[10]的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行操作。正常值：ALT 為5～40 U/L，AST 為8～40 U/L，GGT＜40 U/L，ALP 為40～110 U/L[11]。

1.4 觀察指標(biāo) 比較患者的自身抗體（CENPB、M2、Ro52、GP210、Sp100、LKM-1、SLA/LP、LC-1）檢出情況、PBC 和AIH 患者肝功能（ALT、AST、GGT、ALP）水平以及ANA 熒光核型（均質(zhì)型、顆粒型、核仁型、胞漿顆粒型）。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用統(tǒng)計(jì)軟件包SPSS 21.0 版本對(duì)本研究的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，采用（±s）表示符合正態(tài)分布的計(jì)量資料，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用[n（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；P＜0.05說(shuō)明差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組患者自身免疫性抗體檢出率比較 PBC、AIH 患者的CENPB、M2、GP210、SP100、LKM-1 檢出率均高于丙肝、血吸蟲(chóng)病、肝硬化、肝功能不全、藥物性肝炎，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；而M2 抗體檢出陽(yáng)性率高于CENPB、GP210、SP100、LKM-1 檢出率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 各組患者自身免疫性抗體檢出率比較[n（%）]

2.2 PBC、AIH 患者肝功能指標(biāo)水平比較 AIH 組患者血清ALT、AST、GGT、ALP 水平高于PBC 組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 PBC、AIH 患者肝功能指標(biāo)水平比較（±s，U/L）

表2 PBC、AIH 患者肝功能指標(biāo)水平比較（±s，U/L）

2.3 PBC、AIH的ANA 熒光核型比較 AIH的ANA熒光核型中均質(zhì)型比例高于PBC 組，顆粒型低于PBC，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；二者核仁型、胞漿顆粒型比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表3。

表3 PBC、AIH的ANA 熒光核型比較[n（%）]

3 討論

隨著對(duì)自身免疫性肝病發(fā)病機(jī)制的不斷深入研究，其發(fā)病的診斷率越來(lái)越高[12，13]。目前，該病發(fā)病機(jī)制尚未明確，且無(wú)顯著特異性表現(xiàn)，多數(shù)患者肝功能異常，常常被誤診成為其他肝炎[14]。治療自身免疫性肝病通常使用激素類(lèi)免疫抑制劑，如果診斷錯(cuò)誤將嚴(yán)重影響臨床治療療效[15]。肝組織受到病毒感染后，肝細(xì)胞表層白細(xì)胞會(huì)大量活化，刺激自身B 細(xì)胞釋放自身抗體[16，17]。而自身抗體主要是器官、自身組織、細(xì)胞成分、細(xì)胞的抗體，在正常機(jī)體中呈較低水平表達(dá)。如果自身抗體表達(dá)水平超過(guò)正常水平，即提示機(jī)體肝功能受到一定損傷[18]。在不同種類(lèi)慢性肝病均具有相似的臨床特征，即人體血清中具有肝臟疾病自身免疫性抗體，增加臨床診斷難度[19]。但是不同病型自身免疫性肝病對(duì)血清ANA 水平的影響各有差異，其中以AIH 造成的影響最為明顯。自身免疫性肝病相普遍存在特異性自身抗體，且自身抗體的滴度水平通常較高。因此，及時(shí)有效鑒別自身免疫性肝病對(duì)于患者的治療有重要意義[20]。

本研究中PBC、AIH 患者的CENPB、M2、GP210、SP100、LKM-1 檢出率均高于丙肝、血吸蟲(chóng)病、肝硬化、肝功能不全、藥物性肝炎（P＜0.05），表明不同肝病患者以上各自身免疫抗體陽(yáng)性率存在差異，但是PBC、AIH 患者各自身免疫抗體檢出陽(yáng)性率較高，血清自身免疫抗體的高敏感性能夠用于篩查PBC、AIH，可作為檢測(cè)PBC、AIH的一個(gè)重要標(biāo)志物。同時(shí)在PBC、AIH 患者中，M2 抗體檢出陽(yáng)性率高于CENPB、GP210、SP100、LKM-1 檢出率（P＜0.05），該結(jié)論提示在自身抗體譜檢測(cè)中，血清M2 抗體的高敏感性能夠用于篩查自身免疫性肝病，可作為檢測(cè)自身免疫性肝病的一個(gè)重要標(biāo)志物。AIH 患者ALT、AST、GGT、ALP 水平高于PBC（P＜0.05），表明AIH 患者肝功能ALT、AST、GGT、ALP 均高于PBC 患者，通過(guò)檢測(cè)肝功能指標(biāo)，可較好的鑒別PBC 和AIH，進(jìn)一步為AIH的診斷提供一定的指導(dǎo)意義，該結(jié)論與金巧菲等[21]的報(bào)道相似。此外，AIH 患者ANA 熒光核型中均質(zhì)型比例高于PBC 患者，顆粒型低于PBC 患者（P＜0.05），二者核仁型、胞漿顆粒型比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），提示AIH 患者ANA 熒光核型主要表現(xiàn)為均質(zhì)型，而PBC 主要表現(xiàn)為顆粒型，為鑒別AIH 提供一定有效的參考。核型特征在自身免疫性肝病中也具有一定的表現(xiàn)，對(duì)臨床的鑒別診斷也具有一定的臨床意義?？傊?，肝功能、核型輔助協(xié)助自身免疫性抗體檢測(cè)，可進(jìn)一步為自身免疫性肝病的鑒別診斷提供可靠依據(jù)。

綜上所述，自身免疫性肝病相關(guān)自身免疫性抗體的臨床中具有較高的應(yīng)用價(jià)值高，但是為了進(jìn)一步提高自身免疫性肝病的鑒別診斷，可輔以肝功能指標(biāo)和核型檢測(cè)，以進(jìn)一步提高自身免疫性肝病的臨床診斷水平。