陳慶東，劉 旭，劉昌華，楊 明，郝員敏，易春燕

(四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所/農(nóng)業(yè)部西南作物有害生物綜合治理重點實驗室，成都 610066)

眼斑溝芫菁又名黃黑小斑蝥(MylabrisCichoriiLinnaeus)，屬昆蟲綱鞘翅目(Coleoptera)芫菁科(Meloidae)，一般把它和大斑芫菁(MyabrisphalerataPallas)統(tǒng)稱為“斑蝥”，為我國《藥典》中收錄的重要動物藥[1-2]。具有破血逐瘀、散結(jié)消癓、攻毒蝕瘡的功效，至今已有2000多年的歷史。斑蝥素具有抗癌癥，抗病毒，刺激白細(xì)胞生成，抑制真菌等作用。近年來多用于癌癥的治療，特別對肝癌、胃癌、食道癌等有顯著療效，是目前重要的抗癌和抗病毒中藥材[3-4]。由于森林植被的破壞，自然環(huán)境的惡化，豆科植物和葫蘆科植物種植面積的減少，加之人類無序的大量捕捉，導(dǎo)致斑蝥野生資源不斷減少，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足市場藥用的需求，成為最緊缺的動物源中藥材之一，因此，人工飼養(yǎng)斑蝥成為必然趨勢。

國內(nèi)外對芫菁科昆蟲的研究重點主要集中在斑蝥素的應(yīng)用方面，對芫菁體內(nèi)斑蝥素的含量測定、 斑蝥素的提取、 斑蝥素的藥理、 藥效等領(lǐng)域研究較多。從20世紀(jì)80～90年代開始，就有學(xué)者對芫菁科昆蟲的資源考察、分類、生物學(xué)特性以及人工飼養(yǎng)等進(jìn)行研究[5-10]，為斑蝥的人工養(yǎng)殖奠定了基礎(chǔ)。

為探索斑蝥的人工室內(nèi)飼養(yǎng)技術(shù)，實現(xiàn)斑蝥的規(guī)?；曫B(yǎng)生產(chǎn)和加快斑蝥產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程。2014年以來，四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所進(jìn)行了斑蝥規(guī)?；曫B(yǎng)方面的深入研究，對斑蝥飼養(yǎng)條件及人工飼料進(jìn)行優(yōu)化，在斑蝥飼養(yǎng)技術(shù)上取得了較大突破，并初步構(gòu)建出了黃黑小斑蝥室內(nèi)人工規(guī)?；曫B(yǎng)的關(guān)鍵技術(shù)體系。

1 破除了斑蝥滯育越冬情況，實現(xiàn)斑蝥室內(nèi)周年飼養(yǎng)

芫菁科昆蟲為復(fù)變態(tài)昆蟲，在野外1年僅發(fā)生一代，其生活史分為卵、幼蟲 (1-5 齡)、蛹、成蟲4個發(fā)育階段，如(圖1)。以卵或幼蟲在土壤中越冬，翌年6、7月份化蛹，6月下旬至7月下旬羽化。

圖1 黃黑小斑蝥生活史

筆者單位系統(tǒng)開展了野生黃黑小斑蝥室內(nèi)種群生物生態(tài)學(xué)特性研究,初步弄清了黃黑小斑蝥卵、幼蟲和成蟲在室內(nèi)的正常生長發(fā)育的最適溫度、濕度以及光照時間。在室內(nèi)給與L:D=16:8，28～30℃飼養(yǎng)條件下，能解除黃黑小斑蝥“卵滯育”和“幼蟲休眠”，實現(xiàn)黃黑小斑蝥在野外1年1代到室內(nèi)飼養(yǎng)1年3代。

1.1 卵

卵孵化最適氣溫29～30 ℃，最佳土壤含水量11%～13%。在L:D=16:8，28～30℃飼養(yǎng)條件下，20d左右可見卵黑點，30d左右卵塊就可孵化出幼蟲，卵歷期平均在40d左右。

1.2 幼蟲

幼蟲生長發(fā)育最適氣溫28～30 ℃，最佳土壤含水量10%～13%，適宜光照時間14～16h/d。在L:D=16:8，28～30℃飼養(yǎng)條件下，一齡平均期為2d，二齡平均期為3.46d，三齡平均期為3.12d，四齡平均期為3.03d，五齡平均期為2.02d。

1.3 蛹

五齡幼蟲在化蛹前有一個不食不動的偽蛹期(Pseudopupae)，也叫擬蛹，擬蛹脫去外面一層白色的皮后即變成蛹。在L:D=16:8，28～30℃飼養(yǎng)條件下，蛹期為12～19d，平均為15.7d。

1.4 成蟲

成蟲最適氣溫26～28 ℃，最佳土壤含水量10%～14%，適宜光照時間14-16h/d。在L:D=16:8，28～30℃以絲瓜花飼養(yǎng)，一般多從上午8:00開始取食，一直到18:00左右。羽化后3～10d，開始尋偶交配，交尾時間多從14:00～24:00，一次交尾時間可達(dá)2～7min，一頭雄蟲可多次交尾，少則1～2次，多則3次。雌蟲產(chǎn)卵前期10～15d，雌蟲產(chǎn)卵前用口器和足挖一土穴，然后轉(zhuǎn)頭將腹部伸入穴內(nèi)，將卵產(chǎn)于其中，卵塊成堆，但無粘膜覆蓋卵粒。雌蟲壽命22～105d，平均53d；雄蟲壽命11～86d，平均42d。

2 研制出了斑蝥成蟲和幼蟲人工飼料配方

早期人工規(guī)?；B(yǎng)殖斑蝥的難度大，因為全部依靠天然食材飼養(yǎng)。為解決斑蝥幼蟲生長依賴蝗蟲卵、成蟲生長依賴絲瓜花等寄主植物的問題，筆者在斑蝥成蟲和幼蟲人工飼料配方的篩選和優(yōu)化等方面展開了大量研究，并取得了實質(zhì)性的進(jìn)展，為以后的斑蝥人工規(guī)?；曫B(yǎng)奠定了基礎(chǔ)。

2.1 幼蟲人工飼料配方

斑蝥幼蟲必須以直翅目及膜翅目昆蟲卵為食，飼養(yǎng)時必須飼養(yǎng)蝗蟲。結(jié)合斑蝥幼蟲的食性，以及補充蛋白質(zhì)的需要，先選取水、雞蛋液、奶粉、蜂幼蟲、花粉等11種原料配制成斑蝥幼蟲基礎(chǔ)人工飼料構(gòu)成。用配制好的該基礎(chǔ)幼蟲人工飼料飼喂斑蝥一齡幼蟲，一齡幼蟲不取食，而二齡起幼蟲能取食該人工飼料，并能正常生長發(fā)育。

在基礎(chǔ)人工飼料之后，筆者進(jìn)一步優(yōu)化飼料配方，篩選出了一個最佳飼料配方，并申請了國家專利(CN107969576B)。在一齡期不用天然飼料蝗蟲卵的情況下成活率為48%左右，其二齡起幼蟲取食人工飼料的成活率達(dá)80%以上，與蝗蟲卵飼養(yǎng)的斑蝥幼蟲成活率基本一致。為進(jìn)一步實現(xiàn)斑蝥幼蟲人工飼料代替天然飼料飼養(yǎng)打下了堅實的基礎(chǔ)。

2.2 成蟲人工飼料配方

斑蝥成蟲主要以豆科、葫蘆科、藜科、茄科、菊科等植物的葉、花、花粉等為食，飼養(yǎng)時必須種植這些天然食材。筆者在汪會榮[1]的基礎(chǔ)上稍有改進(jìn)，參照絲瓜花等寄主植物主要營養(yǎng)成分，根據(jù)其碳水化合物、蛋白質(zhì)及氨基酸含量與比例，選用水、大豆粉、酵母粉、花粉、多維葡萄糖、抗壞血酸、生育酚、復(fù)合維生素B、防腐劑、蜂王漿和蜂蜜等材料，篩選出完全滿足斑蝥成蟲所需的營養(yǎng)，且成蟲生長良好的人工飼料配方，并申請了專利(CN107801876B)。該成蟲人工飼料可以完全替代天然食材為成蟲整個生命周期提供營養(yǎng)，和傳統(tǒng)的新鮮絲瓜花飼喂斑蝥成蟲對比，對黃黑小斑蝥成蟲壽命、產(chǎn)卵前期、產(chǎn)卵數(shù)量差異不顯著，解決了絲瓜花等天然飼料種植、采摘、保鮮所需的時間、人力、成本等，大大的降低了斑蝥養(yǎng)殖成本。

3 探索出了斑蝥“單杯單蟲” 飼養(yǎng)集成技術(shù)

斑蝥幼蟲具有自相殘殺的習(xí)性，在集中飼養(yǎng)(30～50頭)的情況下，幼蟲的成活率低于20%。采用指形塑料管和杯形塑料杯2種飼養(yǎng)方式進(jìn)行單杯、單蟲飼養(yǎng)可有效防止因幼蟲種群過大自相殘殺，幼蟲的成活率均超過80%以上，顯著優(yōu)于集中飼養(yǎng)方式的幼蟲成活率?！皢伪瓎蜗x” 飼養(yǎng)集成技術(shù)為有效解決在單位面積內(nèi)因幼蟲種群過大自相殘殺的難題，為進(jìn)一步提高幼蟲成活率、成蟲羽化率奠定了基礎(chǔ)，同時也為下一步開展斑蝥的規(guī)?；彤a(chǎn)業(yè)化飼養(yǎng)創(chuàng)造了良好的條件。

3.1 杯形塑料杯蝗卵飼養(yǎng)斑蝥幼蟲

在上口直徑7cm、高10cm的透明塑料杯內(nèi)加約100g伴有蛭石的沙壤土，土壤含水量在12%左右，放入新鮮蝗蟲卵塊1塊，接入1頭剛孵化出的斑蝥幼蟲到杯中，用封口膜封口以保濕度，在溫度28～30℃，光照時間14～16h的環(huán)境條件下飼養(yǎng)，直至成蟲羽化。

3.2 指形塑料管半人工飼料飼養(yǎng)斑蝥幼蟲

半人工飼料飼養(yǎng)是指用蝗卵飼養(yǎng)初孵斑蝥幼蟲，3齡以后用人工飼料飼養(yǎng)斑蝥幼蟲至化蛹。取10mL指形塑料管，管蓋打小孔透氣，將蝗蟲卵塊放入管中，再將剛孵化出的斑蝥幼蟲接入，最后用濕棉花球塞住管口保持濕度。將接好的指形塑料管放置在10cm×20cm的泡沫板上，待幼蟲生長到3齡左右時，更換人工飼料，直到幼蟲生長至五齡時放入裝有沙壤土的22cm×13cm×6cm的塑料盒中化蛹，直至成蟲羽化。

4斑蝥規(guī)?；瘑卧曫B(yǎng)模式的探索

在摸清了室內(nèi)斑蝥習(xí)性的情況下，應(yīng)用已探索出的斑蝥飼養(yǎng)技術(shù)，采取單杯、單蟲飼養(yǎng)方式，進(jìn)行斑蝥規(guī)?；瘑卧曫B(yǎng)探索，探索周年斑蝥的飼養(yǎng)數(shù)量，為斑蝥的產(chǎn)業(yè)化奠定了基礎(chǔ)。選擇20m2房間1間，放置7層的飼養(yǎng)架10個，每層放置80個飼養(yǎng)杯，每個單元可飼養(yǎng)斑蝥11000頭/代，一年可收獲斑蝥成蟲25000頭左右，經(jīng)濟(jì)效益可觀。

4 討論

斑蝥在我國大部分地區(qū)均有分布，但由于森林植被的破壞，自然環(huán)境的變化，豆科植物和葫蘆科植物種植面積的減少，加上人類無序的大量捕捉，斑蝥野生資源不斷減少，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足市場藥用的需求，成為最緊缺的動物性藥材之一。人工合成斑蝥素的條件又十分艱難(需在極端高壓1.520Gpa下進(jìn)行)[11-12]，不適合大規(guī)模生產(chǎn)，更導(dǎo)致斑蝥素供求關(guān)系的矛盾更加強(qiáng)烈，因此斑蝥類昆蟲的人工規(guī)模化飼養(yǎng)是解決這一矛盾的有效途徑。

目前，通過室內(nèi)飼養(yǎng)，解除了斑蝥的滯育，實現(xiàn)了斑蝥的室內(nèi)周年飼養(yǎng)，為斑蝥素的研究奠定了基礎(chǔ)。在筆者的研究過程中也發(fā)現(xiàn)一些問題，斑蝥幼蟲人工飼料飼養(yǎng)技術(shù)還待進(jìn)一步提高，目前雖然突破了斑蝥幼蟲的人工飼養(yǎng)繁殖技術(shù)，但采用人工飼料飼養(yǎng)其幼蟲存活率仍偏低(48%)。將來的研究應(yīng)在已有的幼蟲人工飼料配方的基礎(chǔ)上更進(jìn)一步的優(yōu)化，提高幼蟲存活率。只有順利篩選出適合斑蝥幼蟲的人工飼料，實現(xiàn)全人工飼料飼養(yǎng)斑蝥幼蟲，才能真正實現(xiàn)斑蝥規(guī)?；?、工廠化飼養(yǎng)。