類成通
(日照市東港區(qū)漁業(yè)技術(shù)推廣站,山東日照 276800)
蛋白質(zhì)在水生生物的生長發(fā)育中發(fā)揮著重要作用,水產(chǎn)飼料主要確定不同種類及同種水生生物不同發(fā)育階段的蛋白質(zhì)及氨基酸的需求量及需求模式。魚蛋白水解物(FPH)是由魚粉經(jīng)過蛋白酶水解后加工制得,其中含有大量的小分子肽及游離氨基酸。衛(wèi)育良等研究表明,水解魚蛋白的適量添加能夠促進(jìn)仔稚魚腸道上皮細(xì)胞的發(fā)育和成熟,提高氨基酸利用效率,并通過對膽囊收縮素、小肽轉(zhuǎn)運載體和胰蛋白酶活性的調(diào)節(jié),來增加對蛋白質(zhì)的消化和吸收,從而促進(jìn)仔稚魚的生長和發(fā)育。相似的研究結(jié)果,也有金頭鯛(Sparus aurata)、大西洋鱈(Gadus morhua)等種類的仔稚魚的相關(guān)報道。目前有關(guān)三疣梭子蟹對蛋白質(zhì)和必需氨基酸方面的研究報道相對較少?,F(xiàn)以三疣梭子蟹為研究對象,在飼料中添加魚蛋白水解物,探究其對三疣梭子蟹仔蟹生長、存活及體組成的影響,為三疣梭子蟹仔蟹培育、優(yōu)質(zhì)人工飼料的研制提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。
試驗地點位于浙江漁業(yè)科技島海水增養(yǎng)殖重點實驗室。試驗系統(tǒng)由小蟹籠和中型的水泥池(5 m×5 m×1 m)組成。試驗所用的三疣梭子蟹[(8.4±0.1)mg]來自浙江漁業(yè)科技島海水增養(yǎng)殖場。試驗時間為8 周。
將三疣梭子蟹仔蟹分為3 個處理組(對照組FH0、處理組FH5 和FH10),每組30 只三疣梭子蟹,分別投喂含有添加0%,5%和10%的魚蛋白水解物的微顆粒飼料,每種飼料設(shè)3 個重復(fù)組。
試驗飼料為3 組等脂肪(10.00%)、等蛋白的半純化飼料。魚粉和蛋白水解物作為蛋白源,玉米淀粉作為糖源,魚油作為脂肪源。飼料組成(干質(zhì)量)見表1。將各種原料粉按表1 配方,在孔徑為0.250 mm 的攪拌機中充分?jǐn)嚢?,再添加淀粉和適宜的水混勻至面團(tuán)狀。通過雙螺桿擠出機(華南理工大學(xué)科技實業(yè)總廠,CD4XITS 型多功能成型機)分別擠出直徑為1.5 和2.5 mm 的顆粒飼料,經(jīng)50 ℃負(fù)壓(0.097 mPa)干燥,破碎,過篩,于-20 ℃冰箱中備用。
表1 飼料組成(干質(zhì)量) %
續(xù)表
在試驗開始前,將三疣梭子蟹放在試驗環(huán)境中養(yǎng)殖1 周,其間投喂三疣梭子蟹暫養(yǎng)飼料。在試驗開始前,挑選體格相近,身體健康的三疣梭子蟹稱質(zhì)量并記錄,隨機分配到蟹籠中。每個蟹籠放一個梭子蟹,避免其自相殘殺。所有三疣梭子蟹每天09:30和16:30 各投喂1 次,投喂量大約占體質(zhì)量的8%。每隔2 個星期稱體質(zhì)量1 次,稱質(zhì)量后的投喂量也隨體質(zhì)量調(diào)整。整個試驗期間每天清理蟹籠,檢查蟹籠的完整性,防止逃跑;持續(xù)充氧,換水量為池水量的15%。每天記錄梭子蟹蛻殼的殼長和死亡數(shù),水溫25~32℃,ρ(溶解氧)>7 mg/L,pH 值6.7~7.3,整個過程梭子蟹生長良好。試驗結(jié)束時,樣品采集前停止投喂24 h。統(tǒng)計塑料筐中的梭子蟹數(shù)量并稱質(zhì)量,然后用液氮冷凍后于-80 ℃保存,待分析。
質(zhì)量增加率(%)=(W-W/W×100;
成活率(%)=n/n×100;
特定生長率(%·d)=(1nW-lnW/t×100;
飼料轉(zhuǎn)化率(%)=Q/(W-W×100;
全蟹水分(%)=m/m。
式中:W——試驗?zāi)┚|(zhì)量,mg;
W——試驗初均質(zhì)量,mg;
n——試驗驗初數(shù)量,只;
n——試驗驗初數(shù)量,只;
t——試驗時間,d;
Q——消耗的飼料量,mg;
m——樣品烘干前質(zhì)量,mg;
m——樣品烘干恒重后的質(zhì)量,mg。
試驗結(jié)果以飼料魚蛋白水解物為獨立變量進(jìn)行回歸分析?;谌嗨笞有返馁|(zhì)量增加率,運用SPSS 18.0(IBM.Chicago, USA)的統(tǒng)計方法中的二階多項式回歸模型,測定魚蛋白水解物水平,P<0.05表示差異顯著。
不同水平魚蛋白水解物對三疣梭子蟹仔蟹生長,存活及體組成的影響見表2。
表2 不同水平魚蛋白水解物對三疣梭子蟹仔蟹生長,存活及體組成的影響①
由表2 可見,F(xiàn)H0 組三疣梭子蟹仔蟹質(zhì)量增加率顯著高于其他2 個處理組(P<0.05),而FH5 組和FH10 組之間沒有差異(P>0.05);同樣的FH0 組三疣梭子蟹仔蟹特定生長率顯著高于其他2 個處理組(P<0.05),而FH5 組和FH10 組之間特定生長率沒有差異(P>0.05);3 個處理組之間比較得出三疣梭子蟹仔蟹存活率沒有顯著差異(P>0.05),而FH0 組和FH10明顯高于FH5 組。體組成檢測結(jié)果顯示,F(xiàn)H0 組三疣梭子蟹全蟹水分含量顯著低于其他2 個處理組(P<0.05),而FH5 組和FH10 組之間沒有差異(P>0.05)。
水產(chǎn)動物幼體前期被發(fā)現(xiàn)消化酶活性不及成魚,對完整蛋白的利用能力不高。魚粉經(jīng)蛋白酶水解后產(chǎn)生小分子肽以及游離氨基酸,有利于水產(chǎn)動物的消化吸收,并提高飼料的利用效率。文獻(xiàn)[4-5]研究發(fā)現(xiàn),魚蛋白水解物的過量添加會導(dǎo)致仔稚魚生長受限。
本研究結(jié)果顯示,F(xiàn)H5 組和FH10 組三疣梭子蟹仔蟹的質(zhì)量增加率以及特定生長率均顯著低于FH0組(P<0.05),說明三疣梭子蟹仔蟹無法及時吸收魚粉經(jīng)水解產(chǎn)生的小分子肽及游離氨基酸,引起營養(yǎng)缺乏導(dǎo)致生長性能下降。FH0 組三疣梭子蟹全蟹水分含量顯著低于其他2 個處理組(P<0.05),表明飼料中魚蛋白水解物的添加不利于三疣梭子蟹仔蟹體內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)的積累。甲殼動物生長有蛻殼的過程,而體內(nèi)物質(zhì)的積累速度與蛻殼的頻率直接相關(guān),因此魚蛋白水解物的添加不利于三疣梭子蟹仔蟹的生長。Zheng 等通過比較不同分子質(zhì)量的魚蛋白水解物在微顆粒飼料中的應(yīng)用,發(fā)現(xiàn)大分子質(zhì)量的魚蛋白水解物更有利于大菱鲆(Scophthalmusmaximus)稚魚的生長及飼料利用。而通過大黃魚(Larimichthys crocea)稚魚的一項營養(yǎng)研究結(jié)果表明,相對于水解魚粉超濾保留物和未處理的魚蛋白水解物,經(jīng)過超濾的魚蛋白水解物更易于消化吸收,并促進(jìn)消化酶相關(guān)基因的表達(dá)。
本試驗中,F(xiàn)H0 組生長性能最好,表明三疣梭子蟹仔蟹的消化酶能較好地適應(yīng)完整蛋白,而不是小分子肽及游離氨基酸。魚蛋白水解物的添加能影響仔稚魚體能生長因子(IGF-1)的表達(dá)量,從而影響其生長發(fā)育。Cai 等研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),由于分子質(zhì)量的不同,魚蛋白水解物對消化酶的活性及其表達(dá)量具有很大的影響。這或許是魚蛋白水解物對仔稚魚生長發(fā)育以及消化吸收能力影響的主要原因。但在本研究中,添加魚蛋白水解物反而影響了三疣梭子蟹仔蟹的生長,或許是甲殼動物的酶系統(tǒng)與魚類有所不同,具有較強的消化完整蛋白的能力。
試驗結(jié)果表明,飼料中魚蛋白水解物的添加不利于三疣梭子蟹仔蟹的生長發(fā)育,但對其存活沒有明顯的影響,魚蛋白水解物在三疣梭子蟹仔蟹的人工飼料中使用效率不高。