夏子涵,韓平欣,王國寶,尉捷,秦雯,李京生（北京城市學院,北京 100094）

京幫流派特色的中藥炮制工藝起源于北京。作為全國中藥炮制的四大主要流派之一，其炮制的主要特點體現(xiàn)在炮制方法、炮制輔料上，炮制加工自成體系，在國內(nèi)外享有很高的聲譽。同時在其發(fā)展過程中，還形成了一批具有京幫炮制特色的中藥品種。北京自古聚集皇親國戚，帝王后妃們養(yǎng)尊處優(yōu)，養(yǎng)身保健以調(diào)治為主，京幫炮制方法的藥物具有口感好、藥性平和、副作用小的宮廷特色[1]。很多成藥具有組方穩(wěn)妥、配伍周詳、善用食療的特點，也形成了很多具有相關(guān)特色的京幫炮制品種。法制陳皮就是其中之一，為清太醫(yī)院的宮廷方，《清太醫(yī)院秘錄》中記載了法制陳皮和法制參貝陳皮的炮制方法。我國第一部皇家的御用藥方集，元代宮廷醫(yī)家許國禎所著的《御藥院方》對其也有記載。明朝王大倫的《嬰童類萃》、清代陳士鐸的《本草新編》也有法制陳皮的身影。1986年版《北京市中藥炮制規(guī)范》中記載了白糖輔料的法制陳皮。其中清代鮑相璈撰寫的《驗方新編》卷十一中記載了法制陳皮工藝[2]，與現(xiàn)在的京幫特色中的法制陳皮炮制工藝相似，京幫炮制沿用了此工藝。其制法為：取一斤陳皮用清水浸泡一天后，去除白瓤，與六兩白黨參，六兩甘草片，一起煮一天；取煎煮好的陳皮，加一兩半川貝母（本文用浙貝代替川貝）細粉，與三兩大青鹽充分混合均勻，之后用一天一夜的時間小火煎煮，直至收汁，晾曬干燥。法制陳皮具有去痰化氣，止渴生津功效，以及消食行氣，寬胸利膈，增加胃口的作用。京幫法制陳皮比生品陳皮的辛燥之性更加緩和，沿用宮廷方，在理氣和胃、降逆止嘔方面效果更佳，味道清新甘甜，可當日常零食食用。

法制陳皮的傳統(tǒng)炮制工藝已確定，但缺乏指標，故通過本實驗得到具體指標，確定法制陳皮的最佳傳統(tǒng)炮制工藝。

1 儀器與材料

1.1 實驗用藥 見表1。

表1 法制陳皮的傳統(tǒng)炮制工藝研究實驗用藥

1.2 實驗試劑 見表2。

表2 法制陳皮的傳統(tǒng)炮制工藝研究實驗試劑

1.3 實驗儀器 見表3。

表3 法制陳皮的傳統(tǒng)炮制工藝研究實驗儀器

2 方法與結(jié)果

2.1 炮制工藝評價指標及體系

2.1.1 外觀性狀 根據(jù)中藥炮制法古代典籍對法制陳皮的有關(guān)炮制要求來規(guī)定外觀性狀評分標準，見表4。其中將完整度、韌度、氣味進行評價得到炮制品外觀性狀分值。

表4 法制陳皮外觀性狀評分標準

2.1.2 口感 根據(jù)中藥炮制法古代典籍對法制陳皮的有關(guān)炮制要求來規(guī)定口感評分標準，見表5。其中將苦度、軟硬度進行評價得到炮制品口感評價分值。

表5 法制陳皮口感評分標準

2.1.3 橙皮苷的含量 ①色譜條件。色譜柱：Diamonsil C18(2)5μ250mm×4.6mm；流動相為乙腈∶水=22∶78；檢測波長283nm；柱溫30℃；流速1.0mL/min，理論板數(shù)按照色譜峰值計算應(yīng)不低于2000[3-4]。②對照品溶液的制備。取橙皮苷對照品適量，精密稱定，置于容量瓶，加甲醇稀釋至刻度搖勻，制成每1mL含0.4mg的溶液[5]。③供試品溶液的制備。取本品粗粉（過二號篩）約0.2g，精密稱定，置于具塞錐形瓶，加入25mL甲醇，密塞并稱定重量，功率300W，頻率40kHz的超聲波機超聲處理45分鐘，放冷稱定，甲醇補足重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，過0.45μm微孔濾膜，備用[5]。④測定法。分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀測定，以外標一點法計算含量[6]。⑤標準曲線。精密量取橙皮苷對照品溶液1.0mL、2.0mL、3.0mL、5.0mL、7.0mL，分別置入10mL的容量瓶中，甲醇定容至刻度，過0.45μm微孔濾膜，用高效液相色譜法進行檢測。以峰面積為縱坐標，質(zhì)量濃度為橫坐標繪制標準曲線，得到的回歸方程為：Y=22383.99698x-4504.991379（R2=0.99998），結(jié)果表明，橙皮苷在10-70μg/mL范圍內(nèi)具有良好線性關(guān)系。⑥方法學考察。對使用的方法進行方法學考察。對照品溶液重復進樣6次，精密度RSD=0.09%，精密度良好；供試品溶液，每隔1h進樣一次，樣品在6h內(nèi)穩(wěn)定，RSD=0.95%，穩(wěn)定性良好。平行制備6份供試品溶液進樣測定，6次測定RSD值為1.83%，重復性良好。加樣回收率為99.4%，RSD值為1.72%，橙皮苷含量的加樣回收率良好。

2.2 評價體系 用綜合評分法對實驗結(jié)果進行分析。綜合評分計算公式：綜合評分（P）=樣品橙皮苷含量×60+外觀性狀評分×20+口感評分×20。

2.3 正交試驗篩選炮制工藝 選擇L9（34）正交表進行試驗設(shè)計優(yōu)選，以評價體系中的評價指標考察最優(yōu)水平組合。按2.1.3中②和③項下制備對照品與供試品溶液，在規(guī)定色譜條件下，按測定法測定。按此因素水平表進行三因素的正交試驗，找到最優(yōu)的水平組合。見表6。

表6 法制陳皮工藝正交試驗因素水平表

按2.2項下的評價體系進行綜合評分，得到的正交試驗結(jié)果見表7。方差分析見表8。

表7 正交試驗結(jié)果

表8 法制陳皮工藝優(yōu)化方差分析表

可見炮制品8為綜合評分的最高分（98.00分），炮制品6為86.54分位列其次，第三名炮制品1為86.50分。各因素的影響度為C（煎煮時間）>A（浸泡時間）>B（加水量）。最優(yōu)組合為A3B2C1，即陳皮生品浸泡45分鐘，加水900mL及輔料藥材，煎煮20分鐘。

2.4 驗證試驗 為保證實驗的可靠性及可行性，對算出的評分最高的方法進行三次驗證試驗，實驗結(jié)果見表9。

表9 驗證試驗結(jié)果

通過表中驗證試驗結(jié)果RSD值為1.39%，說明了考察指標結(jié)果穩(wěn)定，該法制陳皮的炮制工藝可行。

3 討論

本課題對法制陳皮的傳統(tǒng)炮制工藝進行研究與優(yōu)化，得到了具體的指標。實驗結(jié)果表明，京幫法制陳皮的最佳傳統(tǒng)炮制工藝為：浸泡陳皮生品45分鐘，加水900mL及輔料藥材，煎煮20分鐘。該方法精減了傳統(tǒng)炮制工藝過程中的繁雜和漫長的時間。該工藝合理可行，既保留了傳統(tǒng)炮制方法的精華，又與現(xiàn)代方法相結(jié)合，更好地傳承了傳統(tǒng)陳皮炮制工藝，并且保持了京幫特色，為法制陳皮的傳統(tǒng)炮制工藝相關(guān)研究奠定了基礎(chǔ)。在以后的實驗中，研究人員應(yīng)加強法制陳皮不同炮制方法的炮制品的功效及臨床應(yīng)用方面的研究。