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        三酰甘油與總膽固醇試劑對總膽汁酸測定的干擾

        2013-12-06 08:50:30黃江兵黃明珠
        中國當(dāng)代醫(yī)藥 2013年17期
        關(guān)鍵詞:比色膽汁酸分析儀

        黃江兵 黃明珠

        廣東省湛江中心人民醫(yī)院,廣東湛江 524037

        目前,使用全自動生化分析儀進(jìn)行總膽汁酸(TBA)測定已極為普遍,但在樣品檢測時(shí)發(fā)現(xiàn),先進(jìn)行三酰甘油(TG)和總膽固醇(TC)試劑檢測,再進(jìn)行總膽汁酸測定時(shí)所獲結(jié)果升高,甚至出現(xiàn)假陽性結(jié)果[1]。為具體研究三酰甘油和總膽固醇試劑對總膽汁酸測定的干擾,以及試劑針、攪拌棒和比色杯清洗對結(jié)果的影響,本研究采用同一批血清,單獨(dú)測量或在TC、TG測量后立刻進(jìn)行TBA檢測,并使用0.5%次氯酸鈉、無水乙醇和鹽酸對試劑針和比色杯進(jìn)行清洗,以觀察其對總膽汁酸的干擾作用。

        1 資料與方法

        1.1 儀器和試劑

        美國MD2000型全自動生化分析儀;酶法循環(huán)TBA液體雙試劑 (羅氏診斷上海有限公司生產(chǎn),批號10063/901006/1);TC、TG 單試劑(德國 Centronic公司生產(chǎn),南京威特曼公司分裝,批號0609010、0609020);生理鹽水;蒸餾水;樣品為Randox質(zhì)控血清。

        1.2 實(shí)驗(yàn)方法

        (1)對儀器全部清洗Wash All后,以TBA配套校準(zhǔn)品定標(biāo),單獨(dú)連續(xù)測定Randox2質(zhì)控血清10次,以其均值作為實(shí)驗(yàn)對照;(2)先測量TC或TG后,再測量TBA,以評估TC、TG對TBA的污染;(3)設(shè)定特殊檢測和清洗程序,按生化儀設(shè)計(jì),在菜單上選擇“干擾”,在第一、第二對話框下分別添加 TBA 和 TC、TG,測量 TC、TG 后,測量 TBA;(4)同(3)檢測和清洗之外,增加試劑針的專門清洗;(5)同(3)外,增加比色杯的專門清洗;(6)同(3)外,同時(shí)增加比色杯和試劑針的專門清洗。以上方案均連續(xù)測量10次,以其平均值為最終測量值。同時(shí)進(jìn)行TC、TG試劑中TBA含量的測定。

        增加測定通道,在TC、TG測量完成后,連續(xù)10次測定TBA值,觀察測定通道對干擾的消除。

        測定TC、TG試劑中TBA含量,并與生理鹽水比較。

        1.3 統(tǒng)計(jì)分析

        儀器檢測全部完成后,雙擊桌面“康金實(shí)驗(yàn)室管理系統(tǒng)”將結(jié)果存入報(bào)告軟件中。數(shù)據(jù)導(dǎo)入SPSS 19.0軟件,進(jìn)行分析。數(shù)據(jù)以±s進(jìn)行描述,兩兩比較選擇配對資料t檢驗(yàn)進(jìn)行。

        2 結(jié)果

        2.1 單獨(dú)測量質(zhì)控血清的結(jié)果

        單獨(dú)測量質(zhì)控血清TBA為(20.34±4.66)μmol/L。

        2.2 TG對TBA的影響

        先測量TG后再測量TBA,其均值為(64.33±3.22)μmol/L,與對照相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。經(jīng)過特殊清洗及增加比色杯和試劑針清洗后,TBA測量值與正常比較無區(qū)別 (P>0.05)(表 1)。

        表1 TG測量后不同處理對TBA測量的影響

        2.3 TC測量對TBA的影響

        先測量TC后再測量TBA,其均值為(56.34±3.56)μmol/L,與對照相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。經(jīng)過特殊清洗后,仍高于對照(P<0.05),但增加比色杯和試劑針清洗后,TBA測量值與正常比較無區(qū)別(P>0.05)(表 2)。

        表2 TC測量后不同處理對TBA測量的影響

        2.4 TC、TG測量后連續(xù)10次TBA含量

        先進(jìn)行TC、TG測量后連續(xù)10次TBA含量,可以看到前6次結(jié)果與對照之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P<0.05),從第7次開始,差異性消失(P>0.05),但測量值仍有輕微區(qū)別(表 3)。

        2.4 TC、TG試劑中干擾物質(zhì)TBA含量測定

        對TC、TG試劑進(jìn)行TBA檢測,并以生理鹽水為對照,結(jié)果發(fā)現(xiàn),生理鹽水中TBA為0.1μmol/L,TC中TBA含量為803μmol/L,TG中TBA為732μmol/L,均高于生理鹽水(P<0.01)。

        3 討論

        TBA是人體肝臟分解代謝產(chǎn)物,其測定對肝硬化、膽汁淤積等疾病診斷治療和預(yù)后具有重要意義。由于目前生化測定儀采用第五代循環(huán)酶放大法,其靈敏度高,假陽性率也相應(yīng)增加[2]。隨著儀器使用時(shí)間的延長,樣品、試劑甚至底物之間的交叉污染也日益嚴(yán)重[3]。交叉污染的來源又常以試劑針和比色杯多見。雖然生化儀自身設(shè)有清洗程序,但MD2000型全自動生化分析儀的清洗效果還有待驗(yàn)證,本實(shí)驗(yàn)即對此進(jìn)行了探討。

        表 3 TC、TG 測量后連續(xù) 10 次 TBA 含量(μmol/L,±s)

        表 3 TC、TG 測量后連續(xù) 10 次 TBA 含量(μmol/L,±s)

        注:與對照相比,*P<0.05、**P<0.01

        連續(xù)測定次數(shù) TC處理后TBA值 TG處理后TBA值對照1234567891 0 20.34±4.66 55.65±1.34**43.56±4.55**34.32±2.45**27.15±7.66**26.43±5.44*24.32±3.98*23.25±1.43 21.34±4.65 20.53±3.53 20.42±1.32 20.34±4.66 62.36±3.27**54.26±3.98**45.28±1.54**32.76±2.76**28.13±4.23**25.35±3.78*23.27±3.87 22.18±3.62 20.99±4.37 20.51±1.58

        研究發(fā)現(xiàn),對MD2000產(chǎn)品來說,TC或TG對后續(xù)的TBA存在嚴(yán)重的干擾。曾有學(xué)者報(bào)道日立公司7170型全自動生化分析儀也存在同樣問題[4]。與日立系列不同的是,MD生化分析儀經(jīng)過系統(tǒng)自設(shè)的清洗程序就可以大大減少干擾的存在[5]。尤其是TG干擾,僅需設(shè)定自動清洗程序即可達(dá)到抗干擾效果。但對數(shù)據(jù)仔細(xì)分析仍可以看到,雖然固定清洗后TBA測量值已與對照之間無區(qū)別,但測量值仍略高于對照,即使單獨(dú)增加試劑針清洗或比色杯清洗,該趨勢仍然存在。而在固定清洗程序聯(lián)合試劑針、比色杯清洗后,其測量值接近對照,說明使用MD2000對TBA、TG測量時(shí),如選擇聯(lián)合清洗程序,其誤差可以忽略不計(jì)。

        TC測量對后續(xù)的TBA也有影響。使用固定清洗程序后,其干擾仍然存在。甚至在增加試劑針和比色杯清洗后,其顯著性仍接近0.05。但在同時(shí)增加試劑針很比色杯清洗后,顯著性消失,說明TC污染可能同時(shí)出現(xiàn)在這兩個(gè)部位,單純一個(gè)位置的清洗不能完全消除該影響[6],應(yīng)該進(jìn)行全面處理。

        對測量間隔的分析可以看到,TG、TC測量后經(jīng)過6次測量,其干擾仍然存在[7]。從第7次開始,所獲結(jié)果才與對照之間沒有區(qū)別(P>0.05),但數(shù)值上仍有輕微差異。因此若要通過TG、TC測量后增加通道來減少TBA測量誤差,至少需要增加6通道[8]。對于某些患者血清TBA在臨界值附近的可疑患者,更應(yīng)該加以注意,最好在增加通道的同時(shí)加以儀器的清洗。

        對TG、TC試劑的TBA測試可用看到,這兩種因素對TBA的干擾是由于試劑本身的因素造成的,在目前的技術(shù)條件下,很難從根本上預(yù)防。只能通過優(yōu)先測量TBA[9]或上述的儀器清洗和增加通道來盡量減少污染,若要完全消除,只能期待技術(shù)的進(jìn)一步提高。

        [1]丁雙雙,汪皓,沈霞.HDL-C試劑干擾血清總膽汁酸測定結(jié)果的原因分析及對策[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2011,26(3):215-217

        [2]王春雷,陸文英,張波.常規(guī)生化試劑對總膽汁酸測定的干擾分析[J].實(shí)用醫(yī)技雜志,2007,14(22):2974-2975.

        [3]孟令章.總膽固醇三酰甘油試劑對總膽汁酸測定的交叉污染及對策[J].西部醫(yī)學(xué),2010,22(7):1308-1310.

        [4]鄧正輝,張華,李龍平.生化試劑對膽汁酸測定的交叉污染及防范措施[J].中國實(shí)用醫(yī)藥,2008,3(10):55-56.

        [5]崔軍.甘油三酯和總膽固醇試劑對總膽汁酸檢測結(jié)果的影響[J].華西醫(yī)學(xué),2010,25(7):1328-1310.

        [6]馬菊芬,李建忠.總膽固醇 甘油三酯試劑對總膽汁酸測定結(jié)果的影響[J].長冶醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2007,21(5):383-384.

        [7]梁耀榮,謝國強(qiáng).生化試劑對循環(huán)酶法測定血清總膽汁酸的干擾因素分析及改進(jìn)措施[J].現(xiàn)代醫(yī)院,2012,12(2):64-66.

        [8]向?qū)W優(yōu),王新華,湯建華,等.尿酸試劑攜帶污染對總膽汁酸測定結(jié)果的影響[J].中華醫(yī)護(hù)雜志,2006,3(2):180-181.

        [9]郁淼,張莉,秦兵.通過試驗(yàn)設(shè)計(jì)提高總膽汁酸檢測試劑盒的抗干擾性[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2012,9(6):727-728.

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