王震文，王宏棟

(連云港市婦幼保健院 檢驗科，江蘇 連云港 222000)

隨著人們生活方式的改變、性傳播疾病的增加以及環(huán)境變化等因素，不孕癥已成為僅次于腫瘤、心血管疾病的第三大疾病。我國孕齡婦女中不孕癥婦女所占的比例為10%～15%，而且呈現(xiàn)出上升趨勢，大大增加了家庭和社會的壓力。生殖泌尿系統(tǒng)炎癥和排卵障礙是引起女性不孕的主要原因。支原體可寄居于女性的泌尿生殖系統(tǒng)且種類多樣，其中引起泌尿系統(tǒng)疾病的支原體主要包括解脲脲原體(Uu)和人型支原體(Mh)，感染后若治療不徹底，可能會引起女性不孕。雖然支原體對四環(huán)素、紅霉素等抗生素敏感，但是研究發(fā)現(xiàn)，近年來其臨床耐藥性增強(qiáng)且具有地域性，這與抗菌藥的不合理使用有關(guān)。本研究調(diào)查了解在我院就診的不孕女性支原體感染情況并進(jìn)行耐藥性分析，以期為臨床的診斷和治療提供依據(jù)，從而進(jìn)一步提高本地區(qū)育齡女性的生殖健康。

1 對象和方法

1.1 研究對象 選擇2017年1月—2018年12月在本院不孕不育專科就診的不孕女性1 731例，年齡21～45歲，平均31.10歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①按世界衛(wèi)生組織(WHO)不孕癥定義診斷為不孕癥的婦女；②就醫(yī)前一周，未使用抗菌類藥物；③無引發(fā)不孕癥的嚴(yán)重代謝性疾病或器質(zhì)性病變；④臨床資料齊全。同時收集同期在我院體檢的具有生育史的127例女性作為對照組，年齡21～45歲，平均31.86歲。此次研究經(jīng)過本單位倫理委員會的批準(zhǔn)。

1.2 實驗室檢測

1.2.1 樣本采集 按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》(第四版)中的采樣要求，使用無菌棉拭子(江蘇康捷)擦拭宮頸，取足量的宮頸分泌物。采集后立即送檢，進(jìn)行支原體培養(yǎng)和藥物敏感性實驗。

1.2.2 支原體培養(yǎng)和藥敏試驗 使用支原體(Uu/Mh)分離培養(yǎng)藥敏試劑盒(微生物檢驗法，珠海麗珠生物技術(shù)公司)，對宮頸分泌物進(jìn)行支原體檢測，并檢測其對三大類12種常用抗菌藥物的敏感性。檢測方法與結(jié)果判讀嚴(yán)格按試驗操作說明書進(jìn)行。

1.2.3 質(zhì)量控制 采樣試劑盒配套的專用質(zhì)控品，隨常規(guī)樣品檢測并進(jìn)行實時監(jiān)控，保證檢驗結(jié)果處于受控狀態(tài)；通過江蘇省臨檢中心組織的室間質(zhì)評。

1.3 統(tǒng)計分析 采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料用率(%)表示，比較采用檢驗。以α=0.05為檢驗水準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 支原體感染情況 1 731例不孕女性中，宮頸分泌物支原體感染共有851例，占49.16%。其中738例感染Uu，占42.63%，其次為Uu和Mh混合感染(4.22%)、Mh感染(2.31%)。對照組中支原體感染的共有27例(21.26%)，均為Uu感染，2組支原體感染率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(=36.96，=0.001)。

2.2 不同年齡層次不孕婦女支原體感染情況 不孕女性患者中，26～30歲組支原體感染率最高(50.33%)，41～45歲組支原體感染率最低(47.55%)，但各年齡組間感染率的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(=0.647，=0.958)。見表1。

表1 不同年齡組不孕女性患者支原體感染情況

2.3 支原體對抗菌藥物的藥物敏感率 藥敏試驗結(jié)果顯示，Uu對交沙霉素最敏感，對環(huán)丙沙星的耐藥性最高；Mh對多西環(huán)素最敏感，對環(huán)丙沙星的耐藥性最高；Uu+Mh對多西環(huán)素最敏感，對氧氟沙星的耐藥性最高。詳見表2。

表2 不孕女性患者支原體陽性菌株對抗菌藥物的藥物敏感性率[n(%)]

3 討論

支原體是可以獨立生活的原核細(xì)胞微生物，大小約為0.3～0.5 μm，介于病毒和細(xì)菌之間，主要存在于人體的泌尿生殖系統(tǒng)中。女性感染支原體后會引起子宮內(nèi)膜炎癥，宮腔內(nèi)的支原體可能會通過粘附精子阻礙精子的運動；另一方面支原體可能會分泌干擾物質(zhì)或者黏膜影響精卵結(jié)合或者使受精卵脫落，進(jìn)而導(dǎo)致女性不孕。此外，生殖支原體可通過性行為進(jìn)行傳播，因此對于生殖支原體感染患者，應(yīng)建議患者配偶行支原體檢測和治療，禁止性行為直到其及性伴侶完成治療。

本次研究結(jié)果顯示，本地區(qū)不孕婦女泌尿系統(tǒng)支原體感染率為49.16%，高于其他學(xué)者的研究結(jié)果(浙江麗水47.73%，海南?？?4.55%)，低于潘長清等的研究結(jié)果(四川綿陽84.97%)，這反映出不同地區(qū)不孕婦女泌尿系統(tǒng)支原體的感染情況具有地域差異性。本研究結(jié)果顯示，支原體感染中Uu感染的比例最高，達(dá)到86.72%，提示要將其作為診療關(guān)注的重點。國內(nèi)外學(xué)者發(fā)現(xiàn)支原體的感染率和性生活的活躍程度有一定的相關(guān)性，本次研究中，不孕女性患者中，26～30歲年齡組支原體感染率最高(50.33%)，41～45歲年齡組支原體感染率最低(47.55%)；但各年齡組別間的感染率無顯著差異。

由于支原體沒有細(xì)胞壁，對作用于細(xì)胞壁的抗菌藥物不敏感，臨床上常用四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類和喹諾酮類藥物治療泌尿系統(tǒng)的支原體感染。由于抗菌藥物的不合理使用，各地區(qū)支原體屬的耐藥情況愈發(fā)嚴(yán)重。通過本次研究可以發(fā)現(xiàn)，本地區(qū)Uu、Mh和兩者混合型菌株對喹諾酮類抗菌藥物，包括環(huán)丙沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、司帕沙星和加替沙星等的耐藥性均較高，其中環(huán)丙沙星對3種類型支原體菌株的耐藥性均超過75%。這可能由于長期不規(guī)范或者經(jīng)驗使用喹諾酮類抗菌藥物，導(dǎo)致菌株的基因位點發(fā)生突變，進(jìn)而通過影響藥物的積累而產(chǎn)生耐藥性。此外，分析藥物敏感性結(jié)果發(fā)現(xiàn)，Uu和Mh混合型菌株要比Uu或者M(jìn)h單獨菌株對抗菌藥物的耐藥性更強(qiáng)，耐藥率超過45%的菌株超過6種，這種協(xié)同耐受作用應(yīng)引起臨床上的重視。多西環(huán)素、米諾環(huán)素和交沙霉素對3種支原體菌株感染的敏感率較高，其中多西環(huán)素、米諾環(huán)素均超過90%，考慮可作為本地區(qū)治療相關(guān)感染的一線用藥。類似于耐藥性，混合菌株對多西環(huán)素、米諾環(huán)素和交沙霉素的敏感率均低于Uu、Mh單獨菌株的敏感率。

綜上，連云港地區(qū)不孕女性泌尿生殖系統(tǒng)支原體感染率較高，合并感染對藥物的耐藥性更強(qiáng)。由于患者自身的個體差異，感染支原體菌株的類型差異以及耐藥譜的多樣性，臨床醫(yī)生需要根據(jù)菌株檢測和藥物敏感性結(jié)果，合理、規(guī)范地選擇抗菌藥物，在降低耐藥菌株產(chǎn)生的同時，提高治療的效率，保障育齡婦女的生殖健康。