陳翠翠 鞏玉輝 方曄 彭洪斌 張軍

(貴州金蟾大山生物科技有限責(zé)任公司，貴州 畢節(jié) 553300)

紅托竹蓀(Dictyophora rubrovalvata Zang,ji et liou)，擔(dān)子菌門(mén)鬼筆科(Phallaceae)竹蓀屬(Dictyophora)大型食用菌[1,2]。作為食用菌中的一類(lèi)，自20世紀(jì)70年代開(kāi)始人工馴化竹蓀獲得成功后，使竹蓀產(chǎn)業(yè)得以迅速發(fā)展，目前食用菌產(chǎn)業(yè)作為實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整、精準(zhǔn)扶貧和鄉(xiāng)村振興的重要產(chǎn)業(yè)而被列為大力發(fā)展的“優(yōu)勢(shì)特色產(chǎn)業(yè)”之一，紅托竹蓀產(chǎn)業(yè)具有良好的發(fā)展前景[3-5]。紅托竹蓀是貴州省特色食用菌，在栽培過(guò)程中病蟲(chóng)害對(duì)紅托竹蓀產(chǎn)量、質(zhì)量影響較大，紅托竹蓀栽培成功與否的關(guān)鍵就是病蟲(chóng)害防治[6,7]?；瘜W(xué)防治是利用化學(xué)藥劑殺滅或者驅(qū)逐害蟲(chóng)，這類(lèi)防治方法的成本較低、見(jiàn)效快[8]，本試驗(yàn)主要通過(guò)使用市面上常用的不同殺菌藥處理紅托竹蓀菌絲，觀察記錄菌絲的生長(zhǎng)速度、生長(zhǎng)形勢(shì)等以選擇適合紅托竹蓀栽培過(guò)程消殺的低毒、高效、廣譜殺菌劑和殺蟲(chóng)劑，為紅托竹蓀生產(chǎn)栽培綜合用藥防治提供有關(guān)數(shù)據(jù)支撐和參考。

1 試驗(yàn)材料與方法

1.1 試驗(yàn)菌株

菌株使用貴州金蟾大山生物科技有限責(zé)任公司選育的JCZS-14-33菌株。

1.2 試驗(yàn)藥品

試驗(yàn)藥品及生產(chǎn)廠家如表1所示。

表1 不同殺菌藥及生產(chǎn)廠家

1.3 毒力培養(yǎng)基

1.3.1 基礎(chǔ)培養(yǎng)基

培養(yǎng)基(培養(yǎng)皿)：土豆100g(煮水過(guò)濾)，葡萄糖5g，果糖25g，蛋白胨5g，硫酸銨2.5g，雜木屑70g(粒徑100目)，瓊脂粉18g，水1000mL。

1.3.2 毒力培養(yǎng)基(含毒介質(zhì))的制作

在無(wú)菌操作下，經(jīng)計(jì)算后加入一定量的藥液至冷卻到50℃左右的培養(yǎng)基中，混勻后倒入滅菌培養(yǎng)皿中制平板，即成毒力培養(yǎng)基(含毒介質(zhì))[9]。

1.4 菌絲體培養(yǎng)

在超凈工作臺(tái)進(jìn)行接種，用5mm的打孔器在距母種平板接種塊周?chē)?～3cm區(qū)域打孔，取菌種塊放于平板培養(yǎng)基中央[10]，然后將培養(yǎng)皿置于23℃恒溫培養(yǎng)箱中恒溫培養(yǎng)，在不同時(shí)間觀察菌餅菌絲的生長(zhǎng)速度、菌絲狀態(tài)、菌絲的均勻度等，采用十字交叉法測(cè)定菌餅的直徑[11]，以其均數(shù)代表菌落大小，以菌餅直徑為依據(jù)計(jì)算菌絲生長(zhǎng)速度。

式中，D1為第1次測(cè)量直徑，cm；D2為第2次測(cè)量直徑，cm；d2為測(cè)量時(shí)天數(shù)；d1為初始天數(shù)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 23.0軟件進(jìn)行單因素方差和線性相關(guān)分析。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 不同藥品對(duì)紅托竹蓀菌絲萌發(fā)的影響

將菌種用打孔器打孔后，轉(zhuǎn)接到毒力培養(yǎng)基后，觀察毒力培養(yǎng)基上菌種塊的萌發(fā)情況，詳見(jiàn)表2、圖1。

表2 不同毒力培養(yǎng)基上菌種塊的萌發(fā)情況統(tǒng)計(jì)表

續(xù)表 不同毒力培養(yǎng)基上菌種塊的萌發(fā)情況統(tǒng)計(jì)表

從表2、圖1中可以看出，中生菌素、春雷王銅、春雷霉素、稀酰氰霜唑、氟菌·霜霉威、咪鮮胺錳鹽、連霉素萌發(fā)時(shí)間與對(duì)照組沒(méi)有差異，可見(jiàn)對(duì)其菌種塊的萌發(fā)沒(méi)有影響。有輕微影響的有霜脲嘧菌酯、露娜森、嘧菌酯、阿泰靈、異菌脲的萌發(fā)會(huì)延后，殘效期在10d以內(nèi)，如果用該類(lèi)殺菌藥處理土壤或者空間等要注意其藥效殘留，待殘效期過(guò)后進(jìn)行紅托竹蓀的種植。含甲基硫菌靈、溴菌腈、丙環(huán)唑、咪鮮胺、苯嘧甲環(huán)唑、苯甲嘧菌酯、戊唑嘧菌酯、唑醚咪鮮胺、解淀粉芽孢桿菌、嘧霉胺、吡唑醚菌脂的毒力培養(yǎng)基對(duì)紅托竹蓀菌絲傷害作用大，菌種塊不萌發(fā)，且殘效期在15d以上菌種都不會(huì)萌發(fā)。

2.2 不同藥品對(duì)紅托竹蓀菌絲生長(zhǎng)速度的影響

對(duì)在不同毒力培養(yǎng)基上萌發(fā)的菌種塊按照1.4中的方法測(cè)定其菌種的生長(zhǎng)速度。

2.2.1 菌種塊長(zhǎng)滿平板的時(shí)間

對(duì)不同毒力培養(yǎng)基中菌種塊長(zhǎng)滿平板的時(shí)間進(jìn)行測(cè)定，見(jiàn)表3。

表3 不同毒力培養(yǎng)基中菌種塊長(zhǎng)滿平板時(shí)間統(tǒng)計(jì)表

30d后其菌絲生長(zhǎng)狀態(tài)如圖2所示。

圖2 不同毒力培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)狀態(tài)

可以看出，生長(zhǎng)最好的是對(duì)照組>中生菌素>春雷霉素>春雷王銅>氟菌·霜霉威>稀酰氰霜唑，其中，中生菌素與對(duì)照組對(duì)比生長(zhǎng)狀態(tài)差異不明顯，春雷霉素菌絲的均勻性受影響，春雷王銅可以看到菌絲明顯差很多；氟菌·霜霉威菌絲生長(zhǎng)減緩，但其均勻性較好，稀酰氰霜唑?qū)z有影響，其均勻性變差，菌絲邊緣生長(zhǎng)參差不齊。其他殺菌藥萌發(fā)的菌絲也基本停止或者不萌發(fā)。

2.2.2 菌絲生長(zhǎng)速度差異

將萌發(fā)的菌絲進(jìn)行生長(zhǎng)速度測(cè)定，測(cè)定30d時(shí)菌絲生長(zhǎng)速度(cm·d-1)，其生長(zhǎng)速度差異對(duì)比見(jiàn)表4。

表4 不同毒力培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)速度差異

根據(jù)可以萌發(fā)的毒力培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)速度測(cè)定其具體生長(zhǎng)快慢情況：對(duì)照組生長(zhǎng)最快，菌絲每天的平均生長(zhǎng)速度為0.15cm·d-1；其次為中生菌素和春雷霉素，兩者生長(zhǎng)速度沒(méi)有差異，但是與對(duì)照組有顯著差異；再次為氟菌·霜霉威、春雷王銅和稀酰氰霜唑，三者生長(zhǎng)速度差異不顯著，但與對(duì)照組有顯著差異；其余咪鮮胺錳鹽、異菌脲、露娜森、霜脲嘧菌酯、嘧菌酯、連霉素、阿泰靈毒力培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)速度不斷下降，說(shuō)明這些殺菌藥對(duì)紅托竹蓀的菌絲具有抑制作用。

圖3 不同毒力培養(yǎng)基30d菌絲生長(zhǎng)速度統(tǒng)計(jì)圖

3 結(jié)論與討論

通過(guò)對(duì)23種殺菌藥的毒力培養(yǎng)試驗(yàn)可以得出以下幾點(diǎn)結(jié)論。

對(duì)菌絲具有不可逆抑制作用的消毒藥有以下幾種：甲基硫菌靈、溴菌腈、丙環(huán)唑、咪鮮胺、苯嘧甲環(huán)唑、苯甲嘧菌酯、戊唑嘧菌酯、唑醚咪鮮胺、解淀粉芽孢桿菌、嘧霉胺、吡唑醚菌脂，此11種藥物會(huì)對(duì)菌絲具有強(qiáng)烈抑制作用，在該種殺菌藥作用下會(huì)對(duì)菌絲產(chǎn)生不可逆的傷害作用，原有菌種塊30d都不會(huì)萌發(fā)，而進(jìn)行再次重新接種后其中戊唑嘧菌酯、溴菌腈、咪鮮胺、苯嘧甲環(huán)唑、苯甲嘧菌酯會(huì)有部分菌種萌發(fā)，殘效期在25d以內(nèi)，而丙環(huán)唑、唑醚咪鮮胺、嘧霉胺、甲基硫菌靈、吡唑醚菌酯、解淀粉芽孢桿菌菌種即使重新接種后依然不萌發(fā)，證明其殘效期時(shí)間長(zhǎng)，在生產(chǎn)使用時(shí)要慎重。

菌種在5～8d可以萌發(fā)的毒力培養(yǎng)基有露娜森、嘧菌酯、阿泰靈、異菌脲、霜脲嘧菌酯、連霉素、戊唑嘧菌酯，這幾種藥物對(duì)菌絲萌發(fā)有一定的抑制作用，但是并未造成不可逆?zhèn)?，菌種會(huì)推后萌發(fā)的時(shí)間，萌發(fā)率也受影響，后期對(duì)菌絲的生長(zhǎng)速度具有抑制作用，菌絲幾乎不生長(zhǎng)。

對(duì)菌絲影響作用從小到大依次有中生菌素、春雷霉素、氟菌·霜霉威、春雷王銅、稀酰氰霜唑、咪鮮胺錳鹽，這幾種殺菌藥對(duì)菌絲影響作用較小，菌種塊在2d可以萌發(fā)，但是其中只有中生菌素和春雷霉素對(duì)紅托竹蓀的菌絲傷害作用較小，春雷王銅、稀酰氰霜唑、咪鮮胺錳鹽對(duì)菌絲還是具有抑制作用，菌絲生長(zhǎng)速度明顯下降，其生長(zhǎng)均勻性也差；氟菌·霜霉威對(duì)菌絲生長(zhǎng)也具有抑制作用，菌絲生長(zhǎng)速度明顯下降但是其菌絲生長(zhǎng)的均勻性、一致性較春雷王銅、稀酰氰霜唑、咪鮮胺錳鹽要好。

總之，通過(guò)本次試驗(yàn)篩選出2種藥物中生菌素、春雷霉素對(duì)紅托竹蓀菌絲傷害作用較小，在種植栽培過(guò)程中可以進(jìn)行用藥，可以用于生長(zhǎng)期間病害的防治。氟菌·霜霉威、春雷王銅、稀酰氰霜唑的傷害作用次之，筆者認(rèn)為可以用于紅托竹蓀種植菌絲上土前期的藥物防治，減少病原菌的密度，用以防治病害的產(chǎn)生。對(duì)菌絲傷害作用比較大的藥物可以用于周?chē)h(huán)境的消殺或者繼續(xù)降低濃度對(duì)種植期間的覆蓋物等進(jìn)行消殺，不可以直接作用于菌絲或者竹蛋進(jìn)行消殺。