張冬冬，范陳偉，姜曉東，陳 瑜，吳旭干,3

1. 上海海洋大學(xué)/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部淡水種質(zhì)資源重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海 201306

2. 射陽縣陳瑜水產(chǎn)養(yǎng)殖有限公司，江蘇 鹽城 224300

3. 上海海洋大學(xué)/上海水產(chǎn)養(yǎng)殖工程技術(shù)研究中心/水產(chǎn)科學(xué)國家級(jí)實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心，上海 201306

中華絨螯蟹 (Eriocheir sinensis) 簡(jiǎn)稱河蟹，屬于甲殼綱、十足目、方蟹科、絨螯蟹屬，主要分布于東亞地區(qū)[1]。由于其味道鮮美、營養(yǎng)均衡，廣受消費(fèi)者喜愛[2-3]。近幾年，中國年養(yǎng)殖總產(chǎn)量近80×104t，產(chǎn)值超過 500×108元[4]。然而，產(chǎn)業(yè)高速發(fā)展也導(dǎo)致一系列問題出現(xiàn)，例如水系之間的盲目引種和隨意雜交，親本規(guī)格的降低和近親交配，養(yǎng)殖密度的不斷增加和病害的頻發(fā)等，造成長江水系部分中華絨螯蟹養(yǎng)殖群體種質(zhì)退化[5]。遺傳選育是一種重要的種質(zhì)改良方案?，F(xiàn)有的5個(gè)中華絨螯蟹新品種[6](長江1號(hào)、長江2號(hào)、江海21號(hào)、光合1號(hào)和諾亞1號(hào)) 和長蕩湖1號(hào)等新品系[7]均主要是以生長速度和規(guī)格為指標(biāo)進(jìn)行群體選育而產(chǎn)生的，在一定程度上推動(dòng)了中華絨螯蟹養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。然而，越來越多的消費(fèi)者開始追求差異化的特色產(chǎn)品，現(xiàn)有的種質(zhì)資源尚不能滿足中華絨螯蟹養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)對(duì)良種經(jīng)濟(jì)性狀多樣化的需求。

殼色是甲殼動(dòng)物重要的經(jīng)濟(jì)性狀，直接影響著消費(fèi)者的喜好和市場(chǎng)價(jià)格[8]。本課題組于2017年以殼色為指標(biāo)，在國際上首次選育出一種白殼色中華絨螯蟹新品系，暫定為“海大玉蟹”，迄今已經(jīng)繁育至G3代。現(xiàn)有研究表明，白殼新品系營養(yǎng)均衡且具有生長速度快的優(yōu)勢(shì) (另文發(fā)表)，對(duì)其進(jìn)行規(guī)?；斯し庇头N質(zhì)推廣可能具有重要意義。生殖性能和胚胎質(zhì)量評(píng)估是開展蝦蟹類遺傳選育工作的首要步驟，生殖性能評(píng)估主要包括親本抱卵速度、抱卵率、親本成活率等，而胚胎質(zhì)量主要為卵徑、卵質(zhì)量、色澤、類胡蘿卜素含量以及生化組成等指標(biāo)[9-12]。以往對(duì)中華絨螯蟹生殖性能和胚胎質(zhì)量的研究主要集中在不同親本水系來源[10-11]、不同親本飼料添加[13-14]、親本營養(yǎng)強(qiáng)化[15-16]、親本成熟時(shí)間[17]和親本規(guī)格[18]，有關(guān)殼色的研究?jī)H見于紫殼中華絨螯蟹[19](色澤不可遺傳)。研究表明，紫殼雌蟹親本的成活率明顯高于綠殼雌蟹，雖然紫殼親本抱卵率略低，但其胚胎中花生四烯酸 (C20:4 n-6,ARA) 和二十二碳五烯酸 (C22:5 n-3, EPA) 含量顯著高于綠殼[19]。中華絨螯蟹白色殼品系的生殖性能與正常綠殼親本間是否存在一定差異，至今尚不清楚，這在一定程度上，阻礙了白殼新品系中華絨螯蟹的種質(zhì)資源開發(fā)和推廣。鑒于此，本研究測(cè)定了中華絨螯蟹白殼新品系和綠殼品系親本生殖性能與卵質(zhì)量、常規(guī)生化、脂肪酸和類胡蘿卜素組成，以期為河蟹基于殼色的多樣化育種提供理論基礎(chǔ)和實(shí)踐參考。

1 材料與方法

1.1 親本蟹的來源

中華絨螯蟹白殼品系為本課題組2017年初通過家系選育獲得。2020年11月初，從上海海洋大學(xué)崇明蟹類育種基地室外同一土池中挑選完成生殖蛻殼、體質(zhì)量相近、肢體完整和體質(zhì)健壯的白殼奇數(shù)年G2代品系和正常綠殼品系 (雌蟹各50只和雄蟹各20只，白殼和綠殼品系雌體親本的外觀照片見圖1)。將兩種殼色蟹在崇明基地室內(nèi)循環(huán)水槽中按照雌雄分開原則進(jìn)行暫養(yǎng)，每日17:00投喂適量的冰凍雜魚和鮮活縊蟶 (Sinonovacula constricta)。

1.2 親本交配

2020年1月14 日，在上海海洋大學(xué)崇明蟹類育種基地的室內(nèi)循環(huán)水系統(tǒng)中實(shí)施親本交配。白殼和綠殼組各用3個(gè)規(guī)格和尺寸一致的黑色PVC桶(Φ108×H120 cm) 養(yǎng)殖，每個(gè)桶底部鋪設(shè)一層約10 cm的細(xì)沙供蟹抱卵，同時(shí)投放4片PVC塑料瓦片作為遮蔽物。每個(gè)桶投放雌蟹10只和雄蟹3只 (生物學(xué)指數(shù)見表1，同一性別兩種殼色各指標(biāo)間無顯著差異)。海水為人工配置的半咸水，鹽度17，水深80 cm。每日17:00對(duì)室內(nèi)所有親本蟹投喂適量冰凍雜魚和鮮活縊蟶，每日9:00和21:00記錄室內(nèi)交配桶內(nèi)水溫并檢查抱卵蟹抱卵和死亡情況。交配7～10 d后剔除雄蟹以防影響雌蟹抱卵。雌體親本的成活率 (Survival rate,RS, %) 和抱卵率(Ovigerous rate,RO, %) 計(jì)算公式為：

表1 白殼和綠殼雌體和雄體親本的生物學(xué)性狀Table 1 Biological characteristics of white and green carapace strains of E. sinensis broodstock

式中：Si和St分別為存活雌體親本個(gè)體數(shù)和投放雌體親本總數(shù)；Oi和Ot分別為雌體抱卵蟹數(shù)量和交配后雌體存活總親本數(shù)量。

1.3 親本生殖性能測(cè)定

當(dāng)胚胎發(fā)育至原腸胚期，從白殼和綠殼組各取6只抱卵蟹 (每個(gè)桶各取2只)，參照李清清等[10]方法測(cè)定親本生殖性能，具體操作為用干毛巾將體表擦干并用鑷子將腹部卵塊全部取出，剔除攜卵的剛毛和絨毛。用海水清洗卵塊并用紙巾吸干卵塊水分，對(duì)吸干后的卵塊和去卵后的抱卵蟹精確稱質(zhì)量。每個(gè)樣品取10 mg胚胎裝入稱量杯中，采用百萬分之一電子天平 (賽多利斯CPA225D，0.001 mg，德國) 精確稱質(zhì)量并用計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)，據(jù)此計(jì)算單卵濕質(zhì)量。每個(gè)蟹卵塊隨機(jī)測(cè)定3次，取平均值為該蟹單卵濕質(zhì)量。隨后將卵塊裝袋密封后置于?80 ℃ 冰箱保存。計(jì)算抱卵量 (Egg production,EP, 104粒·只?1)、生殖力 (Fecundity,F, 粒·g?1) 和生殖指數(shù) (Reproductive effort, RE, %)，計(jì)算公式為：

式中：We和Wi分別表示卵塊質(zhì)量 (g) 和單卵濕質(zhì)量 (g)；W0為抱卵蟹凈體質(zhì)量 (去卵后質(zhì)量，g)；Wt為抱卵蟹體質(zhì)量 (g)。

1.4 卵徑、單卵濕質(zhì)量和干質(zhì)量測(cè)定

采用ToupView顯微圖像測(cè)量分析軟件在顯微鏡下測(cè)定單個(gè)卵的卵徑，每個(gè)抱卵蟹隨機(jī)測(cè)定60粒卵，取平均值為該蟹的卵徑。參考李清清等[10]方法進(jìn)行單卵濕質(zhì)量和干質(zhì)量測(cè)定，其中，單卵濕質(zhì)量與生殖性能中測(cè)定方法一致；單卵干質(zhì)量具體操作為取稱質(zhì)量后的濕卵，用計(jì)數(shù)器精確計(jì)數(shù)后放入錫箔稱量杯中，用百萬分之一天平準(zhǔn)確稱量總質(zhì)量，然后放置于65 ℃烘箱中烘至恒質(zhì)量，再對(duì)烘干后的卵塊和錫箔紙總質(zhì)量準(zhǔn)確稱量以計(jì)算單卵干質(zhì)量。每只抱卵蟹隨機(jī)取樣3次進(jìn)行測(cè)定，最終取平均值為該抱卵蟹的單卵干質(zhì)量。

1.5 胚胎的色澤和類胡蘿卜素測(cè)定

每個(gè)抱卵蟹取少量鮮卵裝入透明自封袋，用Lovibond-RT200色差儀測(cè)定鮮卵色澤。干卵色澤測(cè)定之前，將凍干后的蟹卵粉碎過60目篩，隨機(jī)取樣倒入小培養(yǎng)皿 (直徑 50 mm) 中，用色差儀測(cè)量表面層色度。每個(gè)抱卵蟹胚胎鮮樣和凍干樣均隨機(jī)取6個(gè)點(diǎn)測(cè)量，平均值為該蟹卵的最終色澤參數(shù)，具體參數(shù)為亮度 (L*)、紅度 (a*) 和黃度 (b*)，具體參考李清清等[10]的方法。

每個(gè)抱卵蟹取0.3～0.4 g凍干后的卵進(jìn)行總類胡蘿卜素的提取和測(cè)定，主要參考孫秋鳳等[11]方法：采用80%丙酮對(duì)樣品進(jìn)行首次提取，用超聲波在遮光環(huán)境下浸提15～20 min，離心取出上清液，剩余樣品繼續(xù)加入100%丙酮 (C3H6O)，反復(fù)提取3～4次，直至提取的上清液基本無色，將提取液用100%丙酮定容至15 mL后，使用分光光度計(jì)在474 nm波長下測(cè)定上清液的光密度 (OD)。采用100%丙酮稀釋蝦青素標(biāo)準(zhǔn)品至不同濃度梯度并測(cè)定對(duì)應(yīng)梯度吸光值，制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算各樣品中總類胡蘿卜素含量。樣品經(jīng) 0.22 μm過濾器過濾后進(jìn)行高效液相色譜分析。采用安捷倫1260高效液相色譜系統(tǒng) (配備YMC?類胡蘿卜素C30柱，4.6×150 mm，包裝直徑=3 μm，YMC) 對(duì)提取液進(jìn)行主要類胡蘿卜素含量測(cè)定和分析。參數(shù)設(shè)置為流速 1.0 mL·min?1，柱溫 30 ℃，進(jìn)樣量 20 μL。樣品中類胡蘿卜素種類的鑒定依據(jù)蝦青素、葉黃素、玉米黃素、角黃素和β-胡蘿卜素5種商業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品出峰時(shí)間，樣品中類胡蘿卜素含量根據(jù)5種標(biāo)準(zhǔn)品制備的標(biāo)準(zhǔn)曲線和樣品出峰面積計(jì)算。

1.6 胚胎的常規(guī)生化和脂肪酸測(cè)定

稱量0.2 g左右濕胚胎于105 ℃烘干至恒質(zhì)量測(cè)定水分，按照AOAC[20]標(biāo)準(zhǔn)方法即凱氏定氮法測(cè)定凍干后胚胎中粗蛋白，總脂測(cè)定采用經(jīng)典的氯仿/甲醇 (V/V=2/1) 抽提方法[21]。脂肪酸的測(cè)定參考Wu等[22]的方法，采用三氟化硼-甲醇法對(duì)提取的總脂進(jìn)行甲酯化，用正己烷溶解裝入2 mL的棕色進(jìn)樣瓶，使用安捷倫 (GC-7890B, MS-5977A) 氣相色譜儀 (色譜柱為Omegawax-320毛細(xì)管柱，30 m×0.25 mm，美國Supelco公司) 進(jìn)行脂肪酸測(cè)定和分析。脂肪酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)的計(jì)算采用面積百分比法。

1.7 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤 (SE)”表示，統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS 19.0軟件，作圖采用Excel 2019軟件，通過Levene法對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，兩組數(shù)據(jù)之間采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)進(jìn)行顯著性分析，P<0.05為差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 生殖性能

白殼和綠殼品系雌體親本交配后第4天均出現(xiàn)抱卵蟹，交配后4～16 d，白殼雌體的抱卵率均顯著高于綠殼雌體 (P<0.05，圖2)，這說明白殼品系交配后抱卵速度較快，兩品系雌體的最終抱卵率無顯著性差異 (P>0.05)。抱卵蟹養(yǎng)殖期間，白殼品系雌體的成活率為93.33%，綠殼為86.67%，但差異不顯著 (P>0.05，表2)。白殼品系雌體的抱卵量、生殖力和生殖指數(shù)與綠殼品系較為接近，兩者無顯著性差異 (P>0.05)。白殼和綠殼胚胎卵徑幾乎一致，分別為369.99和370.04 μm，無顯著性差異(P>0.05，表3)。白殼組單卵濕質(zhì)量為45.41 μg，綠殼組為42.92 μg，白殼組略高于綠殼組，但差異不顯著 (P>0.05)。白殼組單卵干質(zhì)量為 12.06 μg，綠殼組為11.42 μg，白殼組也略高于綠殼組，但差異不顯著 (P>0.05)。

圖2 白殼和綠殼中華絨螯蟹雌蟹抱卵率及水溫變化Fig. 2 Ovigerous rate and water temperature of white and green carapace strains of E. sinensis broodstock

表2 中華絨螯蟹白殼和綠殼品系雌蟹親本成活率、抱卵率和生殖性能比較Table 2 Survival rate, ovigerous and reproductive performance of white and green carapace strains of E. sinensis broodstock

表3 中華絨螯蟹白殼和綠殼品系卵徑和單卵質(zhì)量比較 (N=6)Table 3 Comparison of egg diameter and egg mass of white and green carapace strains of E. sinensis broodstock

2.2 胚胎色澤和類胡蘿卜素質(zhì)量分?jǐn)?shù)

白殼組胚胎鮮樣a*顯著高于綠殼組 (P<0.05)，L*和b*也高于綠殼組，但差異不顯著(P>0.05，表4)；而干樣色澤參數(shù)中，白殼組L*略高于綠殼組，a*和b*略低于綠殼組，但差異均不顯著 (P>0.05)，與外觀肉眼觀察結(jié)果類似 (圖3)。兩組殼色胚胎胡蘿卜素組成中，白殼組蝦青素和葉黃素質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著低于綠殼組 (P<0.05)，但兩組間總類胡蘿卜素、玉米黃素、角黃素以及β-胡蘿卜素質(zhì)量分?jǐn)?shù)無顯著性差異 (P>0.05)。

表4 中華絨螯蟹白殼和綠殼品系雌體胚胎色澤參數(shù)和總類胡蘿卜素質(zhì)量分?jǐn)?shù)比較 (濕質(zhì)量，N=6)Table 4 Color parameters and carotenoids content of eggs produced by white and green carapace strains of E. sinensis broodstock (wet mass, N=6) mg·g?1

圖3 白殼和綠殼中華絨螯蟹原腸胚期蟹卵凍干后比較Fig. 3 Comparison of dried egg in gastrula stage produced by white and green carapace strains of E. sinensis broodstock

2.3 胚胎中常規(guī)生化和脂肪酸組成

就常規(guī)生化而言，白殼和綠殼組胚胎中水分質(zhì)量分?jǐn)?shù)無顯著性差異 (P>0.05，表5)；白殼組胚胎的粗脂肪質(zhì)量分?jǐn)?shù) (5.58%) 和綠殼組 (5.66%) 接近，無顯著性差異 (P>0.05)；白殼組粗蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù) (6.24%) 略高于綠殼組 (5.96%)，但無顯著性差異 (P>0.05)。就脂肪酸而言，白殼和綠殼組胚胎中的總飽和脂肪酸 (ΣSFA) 和總單不飽和脂肪酸(ΣMUFA) 以及總多不飽和脂肪酸 (ΣPUFA) 質(zhì)量分?jǐn)?shù)無顯著差異 (P>0.05，表5)，但是白殼組順-9-十八碳一烯酸 (C18:1 n-9) 質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著高于綠殼組(P<0.05)。雖然白殼組中ARA略高于綠殼組，EPA和二十二碳六烯酸 (C22:6 n-3, DHA) 略低于綠殼組，但差異均不顯著 (P>0.05)。白殼組和綠殼組n-3長鏈多不飽和脂肪酸/n-6長鏈多不飽和脂肪酸 (n-3/n-6) 比例分別為 1.18 和 1.49，無顯著性差異 (P>0.05)。

表5 中華絨螯蟹白殼和綠殼品系雌體卵常規(guī)生化和脂肪酸組成比較 (濕質(zhì)量)Table 5 Proximate composition and fatty acid composition of eggs produced by white and green E. sinensis broodstock (wet mass) %

3 討論

3.1 兩種殼色品系河蟹的生殖性能和胚胎質(zhì)量

甲殼動(dòng)物親本的生殖性能主要受到親本營養(yǎng)狀況、交配環(huán)境、遺傳選育和抱卵頻次等影響[23-26]。本研究中，親本均來自于室外同一養(yǎng)殖池塘，親本營養(yǎng)狀況接近，暫養(yǎng)和交配環(huán)境也相似，且均為第一次抱卵。所以排除了親本營養(yǎng)狀況、配對(duì)環(huán)境和抱卵次數(shù)因素，一定程度可以反映不同殼色與生殖性能之間的關(guān)系。本研究中白殼組親本成活率和抱卵率明顯高于綠殼組，但差異不顯著，在其他條件基本一致的前提下，這種差異很可能是遺傳因素導(dǎo)致的[27-28]。Li等[19]研究發(fā)現(xiàn)，紫殼與綠殼抱卵蟹的成活率和抱卵率也存在一定差異，但不顯著，結(jié)合本研究結(jié)果可說明殼色對(duì)抱卵蟹的成活率和抱卵率存在一定影響。抱卵量是評(píng)估甲殼動(dòng)物生殖性能的重要指標(biāo)之一，中華絨螯蟹的抱卵量隨著規(guī)格的增大而增加[18]。本研究中，白殼組親本平均體質(zhì)量略高于綠殼組，白殼品系的平均抱卵量反而略低于綠殼組，這可能是由于白殼品系雌體的抱卵量差異較大造成的。本研究中白殼品系親本的生殖力和生殖指數(shù)略低于綠殼組，可能是因?yàn)榘讱て废荡企w平均體質(zhì)量略大于綠殼品系。有研究表明，中華絨

螯蟹的生殖力和生殖指數(shù)均隨著雌體體質(zhì)量的增加而下降[18]。本研究中不同殼色品系的胚胎卵徑、單卵濕質(zhì)量和干質(zhì)量均無顯著差異，這說明殼色品系對(duì)其胚胎參數(shù)影響較??；也有研究表明，中華絨螯蟹胚胎的卵徑和單卵質(zhì)量相對(duì)穩(wěn)定，受親本營養(yǎng)狀況、色澤和親本規(guī)格的影響較小[15,18-19]。值得一提的是，本研究發(fā)現(xiàn)白殼蟹抱卵速度明顯優(yōu)于綠殼蟹，筆者推測(cè)可能是綠殼蟹在黑色養(yǎng)殖桶中更容易偽裝，而白殼外觀呈鮮亮的白色與黑色養(yǎng)殖桶存在強(qiáng)烈的顏色反差，使得白殼蟹在水中更容易被異性發(fā)現(xiàn)且相遇，從而交配機(jī)會(huì)更大且頻次更多，所以抱卵速度會(huì)更快。甲殼動(dòng)物的體表顏色對(duì)交配機(jī)會(huì)的影響在椰子蟹 (Birgus latro)[29]、招潮蟹 (Austruca mjoebergi)[30]、相手蟹 (Parasesarma peninsulare)[31]和藍(lán)蟹 (Callinectes sapidus)[32]中均有相關(guān)報(bào)道，不同物種影響程度也存在一定差異。

3.2 兩種殼色品系河蟹的胚胎色澤和類胡蘿卜素含量

類胡蘿卜素有利于甲殼動(dòng)物胚胎發(fā)育、幼蟲早期色素沉積和眼柄發(fā)育[33-34]。有研究表明，中華絨螯蟹卵巢、肝胰腺和蟹殼中，a*與蝦青素含量高度相關(guān)[35]。本研究中，白殼組胚胎干樣中a*和b*明顯低于綠殼組，這主要是因?yàn)槠渑咛ブ锌傤惡}卜素、蝦青素、葉黃素以及玉米黃素含量也低于綠殼組，尤其蝦青素和葉黃素含量顯著低于綠殼組。推測(cè)白殼和綠殼組胚胎中蝦青素和葉黃素含量存在顯著差異可能有2個(gè)原因。1) 甲殼動(dòng)物由于缺乏從頭合成類胡蘿卜素的能力，所以其體內(nèi)的類胡蘿卜素主要從食物中獲取[34,36]。本研究中白殼和綠殼親本來自同一室外養(yǎng)殖池塘，白殼和綠殼親本可能對(duì)餌料中類胡蘿卜素的吸收和保留效率不同，從而導(dǎo)致胚胎中類胡蘿卜素含量存在差異。2) 盡管甲殼動(dòng)物自身缺乏從頭合成類胡蘿卜素的能力，但具有一定的將體內(nèi)β-胡蘿卜素轉(zhuǎn)化為蝦青素的能力，不同物種和品系的這種轉(zhuǎn)化能力可能存在一定差異[37-38]。本課題組的研究表明，白殼品系的體色具有可遺傳性，且其蟹殼中的蝦青素含量顯著低于綠殼品系 (另文發(fā)表)；本研究結(jié)果表明白殼品系胚胎中的蝦青素含量也低于綠殼品系，這暗示白殼品系將β-胡蘿卜素轉(zhuǎn)化為蝦青素的能力可能弱于綠殼品系。

3.3 兩種殼色品系河蟹的胚胎常規(guī)生化和脂肪酸組成

脂類和蛋白質(zhì)是甲殼動(dòng)物胚胎發(fā)育過程中重要的能源物質(zhì)[39-40]。因此，對(duì)胚胎生化組成的研究有利于了解個(gè)體或組織對(duì)能源物質(zhì)的儲(chǔ)存和利用情況[40-41]。研究表明，甲殼動(dòng)物胚胎中的營養(yǎng)物質(zhì)主要來自親本成熟卵母細(xì)胞，因此親本的營養(yǎng)狀況直接影響著胚胎中的生化組成[41]。本研究中，白殼和綠殼品系胚胎中水分、脂肪和蛋白含量無顯著性差異，說明他們胚胎中積累的常規(guī)營養(yǎng)成分含量接近。Li等[19]研究表明，中華絨螯蟹紫殼和綠殼品系胚胎中水分質(zhì)量分?jǐn)?shù)約為61.11%～63.33%，脂肪質(zhì)量分?jǐn)?shù)約為10.95%～11.08%，蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)約為18.20%～18.56%；本研究中白殼和綠殼品系胚胎中的水分質(zhì)量分?jǐn)?shù)高于前者，但是脂肪和蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)低于前者，這主要因?yàn)楸狙芯恐械呐咛悠诽幱谠c胚期，而Li等[19]研究中的胚胎樣品處于囊胚期。甲殼動(dòng)物胚胎發(fā)育過程中，胚胎中水分含量一般呈逐漸上升趨勢(shì)，而脂肪和蛋白呈下降趨勢(shì)[40,42-44]。

脂肪酸在甲殼動(dòng)物胚胎發(fā)育中扮演著重要角色，飽和脂肪酸和單不飽和脂肪酸是重要的能量型脂肪酸，高度不飽和脂肪酸 (HUFA) 主要影響甲殼動(dòng)物繁殖性能、胚胎發(fā)育和幼體質(zhì)量[14,45-47]。本研究中，白殼組中C18:1 n-9百分含量顯著高于綠殼組 (P<0.05)，說明白殼組親本中可能積累更多的C18:1 n-9，造成這一差異的具體原因有待進(jìn)一步研究，可能與其胚胎中的類胡蘿卜素含量不同有關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)親本餌料和卵中的HUFA質(zhì)量分?jǐn)?shù)與卵的孵化率、胚胎發(fā)育速度和初孵幼體質(zhì)量相關(guān)，在適宜質(zhì)量分?jǐn)?shù)條件下，胚胎中的HUFA含量越高，胚胎質(zhì)量越好[45-46]。也有研究發(fā)現(xiàn)，親本飼料中HUFA質(zhì)量分?jǐn)?shù)在一定范圍內(nèi) (0.14%、0.65%、1.15%、1.64%和2.07%) 對(duì)親本繁殖性能影響不顯著[48]。本研究中，白殼和綠殼胚胎中HUFA組成和質(zhì)量分?jǐn)?shù)無顯著差異，這提示白殼和綠殼組胚胎孵化率和初孵幼體質(zhì)量可能接近。

綜上所述，中華絨螯蟹白殼品系和常規(guī)綠殼品系具有比較相似的生殖性能和胚胎質(zhì)量，但白殼品系交配后的抱卵速度顯著高于常規(guī)綠殼品系。白殼品系胚胎中的蝦青素和葉黃素含量顯著低于綠殼品系，但其C18:1 n-9含量顯著高于綠殼品系。這些研究結(jié)果可為白殼品系中華絨螯蟹的遺傳選育、生殖性能評(píng)價(jià)和推廣應(yīng)用提供基礎(chǔ)資料。