鄧 敏

（貴航貴陽醫(yī)院院辦 貴州 貴陽 550006）

肺炎支原體是嬰幼兒和成人社區(qū)獲得性肺炎的主要致病菌。目前，鑒別成人肺炎支原體肺炎的常用生物標志物有C‐反應(yīng)蛋白（C-reactive protein, CPR）、降鈣素原（procalcitonin,PCT）、白細胞計數(shù)、中性粒細胞百分率。PCT對細菌感染有較好的判斷能力，但對肺炎支原體感染和病毒感染的鑒別無能為力，因此，臨床上需要尋找其他指標來輔助鑒別診斷。細胞因子是先天和后天免疫應(yīng)答的重要中介因子，其在肺部感染過程中細胞因子顯著增加。Liu M等發(fā)現(xiàn)在肺炎支原體感染的肺炎患者血清中血小板衍生生長因子-BB（platelet derived growth factor BB,PDGF-BB）、白介素17A（interleukin-17a,IL-17A）、粒細胞集落刺激因子（granulocyte colony stimulating factor,G-CSF）的表達量顯著增高。但是，這三者聯(lián)合對成人支原體肺炎的診斷仍舊一片空白。本文旨在探討血清中PDGF-BB、IL-17A、G-CSF聯(lián)合對成人肺炎支原體肺炎的診斷價值，現(xiàn)報道如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年3月—2020年3月貴航貴陽醫(yī)院收治的120例成人肺炎支原體肺炎患者作為支原體組；選取同期120例非肺炎支原體肺炎患者作為非支原體組；同期120名健康體檢者為對照組。納入標準：①所有患者均經(jīng)過實驗室檢測，支原體組為肺炎支原體抗體陽性，非支原體組為肺炎支原體抗體陰性；②意識、認知功能良好；③依從性高。排除標準：①抽血前接受任何治療的患者；②患有腫瘤的患者；③患有全身性自體免疫疾病；④嚴重心、肝、腎功能損害者；⑤長期使用皮質(zhì)類固醇激素及免疫抑制劑者。支原體組男67例，女53例；平均年齡（52.58±22.70）歲。非支原體組男65例，女55例；平均年齡（54.24±23.45）歲。對照組男61例，女59例；平均年齡（54.21±15.82）歲。三組一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（＞0.05），具有可比性。本文符合《赫爾辛基宣言》要求。

1.2 方法

采取支原體組、非支原體組和對照組三組受試人員的外周血10 mL。室溫凝血2 h后，離心收獲血清。使用北京鴻躍創(chuàng)新科技有限公司的PDGF-BB ELISA試劑盒（貨號：BE59291）檢測血清中PDGF-BB的表達量；使用北京博奧派克生物科技有限公司的G-CSF ELISA試劑盒（貨號：JP27131）檢測血清中G-CSF的表達量；使用北京達科為生物技術(shù)有限公司的IL-17A ELISA試劑盒（貨號：EA-0514）檢測血清中IL-17A的表達量。

1.3 觀察指標

比較三組血清中PDGF-BB、IL-17A、G-CSF的表達量。

1.4 統(tǒng)計學方法

2.結(jié)果

2.1 三組受試人員血清中PDGF-BB、IL-17A、G-CSF的表達水平比較

支原體組血清中PDGF-BB、IL-17A、G-CSF的表達量明顯高于非支原體組和對照組，差異有統(tǒng)計學意義（＜0.05），見表1。

表1 三組受試人員血清中PDGF-BB、IL-17A、G-CSF的表達水平比較（± s）

2.2 支原體組和非支原體組血清中PDGF-BB、IL-17A、G-CSF的ROC曲線、AUC、靈敏度、特異度和截斷值

以病理診斷結(jié)果為金標準。PDGF-BB的受試者工作特征曲線的AUC為（0.91±0.02）（95%0.876 2～0.953 4），以PDGF-BB的陽性臨界值為10.34 ng/mL，其診斷靈敏度為90%，特異度為88%；IL-17A的受試者工作特征曲線的AUC為（0.92±0.02）（95%0.874 6～0.955 5），以IL-17A的陽性臨界值為51.57 pg/mL，其診斷靈敏度為92%，特異度為92%；G-CSF的受試者工作特征曲線的AUC為（0.93±0.02）（95%0.893 2～0.964 7），以G-CSF的陽性臨界值為362.6 pg/mL，其診斷靈敏度為93%，特異度為92%，見圖1、表2。

圖1 支原體組和非支原體組血清中PDGF-BB、IL-17A、G-CSF的ROC曲線

表2 支原體組和非支原體組血清中PDGF-BB、IL-17A、G-CSF的AUC、靈敏度、特異度和截斷值

表2（續(xù)）

2.3 支原體組和對照組血清中PDGF-BB、IL-17A、G-CSF的ROC曲線、AUC、靈敏度、特異度和截斷值

以病理診斷結(jié)果為金標準。PDGF-BB的受試者工作特征曲線的AUC為（0.94±0.02）（95%0.902 7～0.974 9），以PDGF-BB的陽性臨界值為1.328 ng/mL，其診斷靈敏度為95%，特異度為95%；IL-17A的受試者工作特征曲線的AUC為（0.95±0.02）（95%0.921 8～0.983 0），以IL-17A的陽性臨界值為18.58 pg/mL，其診斷靈敏度為96%，特異度為95%；G-CSF的受試者工作特征曲線的AUC為（0.95±0.02）（95%0.924 1～0.985 3），以G-CSF的陽性臨界值為95.92 pg/mL，其診斷靈敏度為95%，特異度為96%。見圖2和表3。

圖2 支原體組和對照組血清中PDGF-BB、IL-17A、G-CSF的ROC曲線

表3 支原體組和對照組血清中PDGF-BB、IL-17A、G-CSF的AUC、靈敏度、特異度和截斷值

2.4 血清中PDGF-BB、IL-17A、G-CSF對成人肺炎支原體肺炎的聯(lián)合診斷

患有成人肺炎支原體肺炎的為真陽性，未患有成人肺炎支原體肺炎的為真陰性，以PDGF-BB的陽性臨界值為10.34 ng/mL、IL-17A的陽性臨界值為51.57 pg/mL、G-CSF的陽性臨界值為362.6 pg/mL為診斷界限，三者均滿足則為聯(lián)合診斷陽性，反之則為聯(lián)合診斷陰性。血清中PDGF-BB、IL-17A、G-CSF聯(lián)合對成人肺炎支原體肺炎的診斷的靈敏度為94.17%（113/120），特異度為93.33%（224/240），準 確 度 為93.61%（337/360），見表4。

表4 血清中PDGF-BB、IL-17A、G-CSF對成人肺炎支原體肺炎的聯(lián)合診斷

3.討論

本文通過ELISA檢測支原體組、非支原體組和對照組三組受試人員血清中PDGF-BB、IL-17A、G-CSF的表達量。經(jīng)ROC分析發(fā)現(xiàn)，血清中PDGF-BB、IL-17A、G-CSF聯(lián)合檢測對成人肺炎支原體肺炎的診斷的靈敏度為94.17%，特異度為93.33%，準確度為93.61%。

血小板衍生生長因子（PDGF）是5種二聚體亞型的家族，它們來自PDGF-AA，AB，BB，CC和DD這4個基因產(chǎn)物。PDGF-BB參與胚胎發(fā)育、血管生成，傷口愈合。本文結(jié)果顯示，肺炎支原體肺炎患者的PDGF-BB水平顯著增加。說明肺損傷的恢復早在肺炎的急性期就已經(jīng)開始，PDGF-BB的增加表達其可能參與了這一過程。IL-17A被認為是促炎性細胞因子，主要由Th17細胞表達。它涉及宿主的先天免疫反應(yīng)，例如嗜中性白細胞的募集和活動。本文結(jié)果顯示，肺炎支原體引起的患者的IL-17A水平高于非肺炎支原體肺炎患者。動物研究發(fā)現(xiàn)高水平的IL-17A傾向于參與急性肺損傷的過程。因此，采用IL-17抗體治療的肺炎可能可以預(yù)防急性肺損傷。G-CSF的生物學功能是通過與效應(yīng)表面特異性受體結(jié)合，調(diào)控中性粒細胞祖細胞的增殖、分化和成熟釋放，抑制細胞凋亡，增強其功能，從而加重炎癥損傷。因此，使用G-CSF抗體可緩解炎癥損傷。

長期以來，配對樣本的顆粒凝集（particle agglutination,PA）抗體血清學實驗室診斷一直是金標準，但其耗時較長。用于基因檢測的環(huán)介導等溫擴增（loop-mediated isothermal amplification, LAMP）也被推薦用于明確診斷，但這種方法需要特殊的設(shè)備，不適用于一般實踐。理想情況下，需要一種可用于門診和床邊的快速診斷試驗。近年來，抗原快速免疫層析檢測和免疫球蛋白M抗體快速檢測已被開發(fā)出來，但其靈敏度和特異度不足以證明它們可以替代PA抗體血清學和LAMP基因檢測。相比于PA，血清中PDGF-BB、IL-17A、G-CSF的聯(lián)合診斷具有快速的優(yōu)勢。相比于LAMP，血清中PDGF-BB、IL-17A、G-CSF的聯(lián)合診斷具有更廣泛的應(yīng)用基礎(chǔ)。此外，采用這種快速、準確的肺炎支原體感染診斷試驗也將有助于合理選擇抗生素。

綜上所述，血清中PDGF-BB、IL-17A、G-CSF的表達量檢測對成人肺炎支原體肺炎的診斷具有一定價值。