潘美秀，蒙秀堅(jiān)，韋松曉，李海鳳

廣西壯族自治區(qū)梧州市紅十字會(huì)醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科，廣西梧州 543002

珠蛋白生成障礙性貧血(簡(jiǎn)稱(chēng)地貧)是最常見(jiàn)的血液系統(tǒng)遺傳性疾病之一，根據(jù)珠蛋白肽鏈合成障礙的不同，臨床常見(jiàn)的突變類(lèi)型分為α地貧和β地貧。我國(guó)南方地區(qū)是地貧的高發(fā)區(qū)，廣西地區(qū)α地貧和β地貧發(fā)生率分別高達(dá)10%～15%和1%～6%[1-2]。根據(jù)α珠蛋白基因突變或缺失導(dǎo)致α珠蛋白合成減少或缺如的情況，α地貧可出現(xiàn)4種表型，即靜止型、輕型、中間型與Hb Bart′s胎兒水腫綜合征，由于診斷為Hb Bart′s胎兒水腫綜合征的多數(shù)胎兒在出生前或出生后不久即死亡，因此，臨床上常見(jiàn)的αβ復(fù)合型地貧主要是上述α地貧前3種表型復(fù)合β地貧。雖然αβ復(fù)合型地貧患者在臨床表現(xiàn)上不一定比單純?chǔ)恋刎毣颚碌刎殗?yán)重，但遺傳給下一代的概率更高[3]。目前，地貧尚無(wú)有效的治療方法，基因診斷是確診地貧的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但其存在成本高、耗時(shí)長(zhǎng)等特點(diǎn)，不適用于人群普查及在基層推廣[4]。隨著血液分析儀在國(guó)內(nèi)基層醫(yī)院的普及應(yīng)用，血常規(guī)在地貧篩查中的作用日益受到重視，其逐漸成為臨床地貧表型篩查的重要輔助項(xiàng)目[5]。由于血紅蛋白A2(HbA2)在不同基因型地貧患者中的水平不同，因此HbA2檢測(cè)是鑒別不同基因型地貧的一種有效方法[6]，可指導(dǎo)臨床醫(yī)生判斷后續(xù)地貧基因診斷的方向[7]。目前，關(guān)于平均紅細(xì)胞體積(MCV)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量(MCH)、紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù)(RDW-CV)和HbA2對(duì)αβ復(fù)合型地貧的篩查價(jià)值研究較少，本研究對(duì)此進(jìn)行了分析，以期為臨床篩查αβ復(fù)合型地貧提供一定的參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2014年1月至2020年12月于本院門(mén)診就診和住院的αβ復(fù)合型地貧患者97例，其中男36例，女61例；年齡6個(gè)月至81歲；根據(jù)表型不同分為靜止型αβ復(fù)合型地貧組38例，輕型αβ復(fù)合型地貧組49例，中間型αβ復(fù)合型地貧組10例。納入標(biāo)準(zhǔn)：基因檢測(cè)確診為αβ復(fù)合型地貧的患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并缺鐵性貧血、惡性腫瘤、嚴(yán)重感染和其他血紅蛋白病的患者。選取地貧基因檢測(cè)、血常規(guī)和血紅蛋白電泳結(jié)果為陰性的健康體檢者90例為對(duì)照組，其中男33例，女57例；年齡1～80歲。

1.2方法

1.2.1紅細(xì)胞參數(shù)檢測(cè) 取乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝全血 2 mL，采用Sysmex XE-5000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)紅細(xì)胞參數(shù)，包括MCV、MCH和RDW-CV。

1.2.2血紅蛋白電泳分析 取DETA-K2抗凝全血2 mL，洗滌紅細(xì)胞，采用Bio-Rad VARIANT Ⅱ血紅蛋白分析系統(tǒng)及配套試劑對(duì)各種血紅蛋白成分進(jìn)行掃描定量，記錄HbA2所占百分比。

1.2.3地貧基因型檢測(cè) 缺失型α地貧基因檢測(cè)采用缺口聚合酶鏈反應(yīng)法，試劑盒購(gòu)自深圳亞能生物技術(shù)有限公司；點(diǎn)突變型α地貧和β地貧基因檢測(cè)采用反向點(diǎn)雜交技術(shù)，試劑盒購(gòu)自深圳亞能生物技術(shù)有限公司。

2 結(jié) 果

2.1不同表型αβ復(fù)合型地貧患者基因型分布 靜止型αβ復(fù)合型地貧患者以-α3.7/αα、CD41-42M/N基因型所占比例最高，為15.46%；輕型αβ復(fù)合型地貧患者以--SEA/αα、CD41-42M/N基因型所占比例最高，為23.71%；中間型αβ復(fù)合型地貧患者以--SEA/-α3.7、CD41-42M/N基因型所占比例最高，為5.15%，見(jiàn)表1。

表1 不同表型αβ復(fù)合型地貧患者基因型分布(n=97)

2.2不同表型αβ復(fù)合型地貧組與對(duì)照組紅細(xì)胞參數(shù)和HbA2比較 與對(duì)照組比較，靜止型、輕型、中間型αβ復(fù)合型地貧組MCV、MCH均降低，RDW-CV和HbA2均升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與中間型αβ復(fù)合型地貧組比較，靜止型、輕型αβ復(fù)合型地貧組MCV、MCH、HbA2均升高，RDW-CV均降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 不同表型αβ復(fù)合型地貧組與對(duì)照組紅細(xì)胞參數(shù)和HbA2比較

2.3紅細(xì)胞參數(shù)和HbA2對(duì)αβ復(fù)合型地貧的診斷價(jià)值 MCV、MCH、RDW-CV和HbA2診斷αβ復(fù)合型地貧的截?cái)嘀捣謩e為78.8 fL、26.65 pg、14.15%和3.50%，曲線(xiàn)下面積(AUC)分別為0.978、0.989、0.959、0.999,見(jiàn)表3。

表3 紅細(xì)胞參數(shù)和HbA2對(duì)αβ復(fù)合型地貧的診斷效能

3 討 論

地貧是一種我國(guó)南方地區(qū)常見(jiàn)的單基因隱性遺傳病，主要以α地貧和β地貧最常見(jiàn)。在我國(guó)南方地區(qū)，αβ復(fù)合型地貧患者也占相當(dāng)高的比例。不同基因型的αβ復(fù)合型地貧所引起的臨床表現(xiàn)不一，輕者臨床表現(xiàn)輕微或無(wú)β貧血，重者則存在不同程度的貧血，有的甚至需要靠定期輸血維持生命，可見(jiàn)αβ復(fù)合型地貧臨床表現(xiàn)不同于單純?chǔ)恋刎毢蛦渭儲(chǔ)碌刎?，其具有自身的特點(diǎn)[8]。α地貧和β地貧患者婚配后生育αβ復(fù)合型地貧患兒的可能性增加；αβ復(fù)合型地貧患者如果與健康人婚配，可將地貧基因型高概率傳遞給后代，如與αβ復(fù)合型地貧患者婚配，生育重癥地貧患兒的概率將大幅提高[9]?？梢?jiàn)，αβ復(fù)合型地貧的遺傳風(fēng)險(xiǎn)高于單純?chǔ)粱颚碌刎?，因此在臨床工作中一定要加強(qiáng)對(duì)該類(lèi)患者的篩查。

α珠蛋白基因缺失引起α肽鏈合成減少，β肽鏈合成相對(duì)增多，導(dǎo)致δ肽鏈合成相應(yīng)減少，使HbA2減少；反之β珠蛋白基因缺失引起β肽鏈合成減少，δ肽鏈合成代償性增多，過(guò)剩的α肽鏈與δ肽鏈結(jié)合，導(dǎo)致HbA2增多，這表明β地貧引起的HbA2增多為直接反應(yīng)，而α地貧引起的HbA2減少是通過(guò)調(diào)控δ肽鏈合成減少的間接反應(yīng)，所以α地貧引起的HbA2減少不如β地貧引起的HbA2增多明顯[10]。 αβ復(fù)合型地貧由于α、β的復(fù)合突變導(dǎo)致α、β肽鏈的合成都有所降低，因而此類(lèi)患者表現(xiàn)為HbA2增多。本研究顯示，與對(duì)照組比較，靜止型、輕型、中間型αβ復(fù)合型地貧組MCV、MCH均降低，RDW-CV和HbA2均升高；與中間型αβ復(fù)合型地貧組比較，靜止型、輕型αβ復(fù)合型地貧組MCV、MCH、HbA2均升高，RDW-CV均降低。中間型αβ復(fù)合型地貧患者4個(gè)α珠蛋白基因中有3個(gè)都存在缺陷，因其α肽鏈減少使β肽鏈與δ肽鏈異常結(jié)合導(dǎo)致HbA2減少[11]，因此，中間型αβ復(fù)合型地貧患者HbA2低于靜止型、輕型，血液學(xué)表現(xiàn)也最為嚴(yán)重，即MCV、MCH降低，RDW-CV升高。

本研究結(jié)果顯示，MCV、MCH、RDW-CV和HbA2診斷αβ復(fù)合型地貧的AUC分別為0.978、0.989、0.959和0.999，均大于0.9，具有較高的診斷準(zhǔn)確性，對(duì)αβ復(fù)合型地貧有一定的篩查價(jià)值，其中以HbA2的效能最高，可為臨床篩查提供參考。