劉姍姍 趙佳浩 忻龍祚*

（河北北方學(xué)院農(nóng)林科技學(xué)院 河北 張家口 075000）

平菇，原專指糙皮側(cè)耳，現(xiàn)在平菇是一種泛稱[1]，是擔(dān)子菌門下傘菌目側(cè)耳科一大種類[2]。平菇肉質(zhì)飽滿、味道鮮美，是一種高蛋白、低脂肪的食物[3]。可增強人體免疫力，且具有預(yù)防癌癥的功效，極受消費者喜愛[4]。平菇在生長過程中會產(chǎn)生大量的酶，具有較強分解轉(zhuǎn)化的能力和極強的富集作用[5]。丹參，唇形科鼠尾草屬植物[6]。在我國擁有悠久的種植歷史，全國各地都有分布，在臨床也有悠久的入藥歷史。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，丹參對治療心血管病有一定的治療作用[7]，是擴張血管、活血化瘀、改善心臟血液循環(huán)的優(yōu)質(zhì)藥材[8]。

平菇作為全國栽培量最大的食用菌之一，價格低廉、食用范圍廣泛，栽培技術(shù)已經(jīng)非常成熟[9]。然而隨著人們對健康食品需求的增加，怎樣研究出營養(yǎng)價值高、具有保健作用的新型平菇產(chǎn)品成為眾多企業(yè)和研究機構(gòu)所面臨的新的挑戰(zhàn)[10]。本試驗嘗試將中藥丹參添加到平菇栽培料中，觀察丹參對平菇生長發(fā)育的影響，探究丹參的有效成分是否可以轉(zhuǎn)化到平菇子實體中，以期培育出品質(zhì)更高、具有保健作用的功能型平菇。

1 材料與方法

1.1 供試材料

1.1.1 供試菌種。平菇8194菌種，來源于邢臺市威縣中沃食用菌公司。

1.1.2 栽培基質(zhì)。原料：棉籽殼、玉米芯、麩皮、石灰、石膏、磷肥等由河北北方學(xué)院食用菌實驗室提供。丹參片，購買于石家莊市行唐縣。

1.2 試驗時間與地點。試驗時間：2020年9～12月；試驗地點：河北北方學(xué)院食用菌實驗室。

1.3 試驗方法

1.3.1 配方設(shè)計。將購買的丹參片放入KC-500高速粉粹機打碎，過60目的篩子。將過篩后的丹參粉按照占栽培基質(zhì)總干料質(zhì)量的1%、2%、3%的比例添加至栽培基質(zhì)中。以不添加丹參粉的處理作為對照組，共設(shè)置4個處理，每個處理3次重復(fù)。各處理具體配方設(shè)置見表1。

表1 平菇栽培料配比 (%)

1.3.2 栽培基質(zhì)的制作。將葡萄枝、棉籽殼、玉米芯、麩皮、丹參粉、磷肥、石膏、石灰等提前24 h預(yù)濕，按配料比設(shè)計分別放入攪拌機中混勻。調(diào)節(jié)栽培料含水量在65%左右，調(diào)節(jié)pH值為7～8。攪拌均勻后，取50 g栽培料裝入內(nèi)徑20 mm、長200 mm的大試管，裝至距離試管塞2～3 cm處即可。每個處理做兩個大試管，重復(fù)3次，用來測定平菇菌絲的生長速度；然后，取混勻的等量栽培料裝入聚丙烯栽培袋中，每個處理制作20個菌棒，每個菌棒重700 g，3次重復(fù)。高壓滅菌2 h。

1.3.3 觀測指標(biāo)。①菌絲生長特性：形狀、色澤、長勢、濃密度；②菌絲生長速度：通過測量菌絲生長的長度(4 d測1次)；③平菇子實體的單菇重：測量第一潮單菇的重量；④平菇多糖含量測定的方法：醇提法；⑤平菇蛋白含量測定的方法：三氯乙酸-丙酮法；⑥平菇中丹參的有效成分：紫外吸光度法。

1.3.4 丹參對平菇菌絲生長影響的測定。①接種：提前將接種室滅菌，將平菇8194的試管種和所制作的含平菇栽培料的大試管，用接菌針尖部劃切取出3～5 mm見方菌種塊，接種針挑上迅速轉(zhuǎn)移至大試管中，灼燒試管口，并將試管塞在火焰上迅速過一下，塞好試管口。菌種接完后，貼好標(biāo)簽，位置不影響對菌絲生長的觀測即可。②培養(yǎng)：放入恒溫的人工氣候箱中培養(yǎng)。③測量菌絲生長特性：采用劃線法進行測量，將每次測量時的菌絲生長最前端進行劃線標(biāo)記，最好測量劃線距離，計算菌絲生長速度。同時觀察色澤、生長趨勢、稀疏程度、形態(tài)特征。

1.3.5 丹參對平菇產(chǎn)量的測定。①接種：提前將接種室滅菌，平菇枝條菌種接種需要兩個人合作，一人擰開未接種的平菇菌棒的袋口，另一個人拿好枝條菌種頂部迅速平行放進菌種孔，接種完一袋菌種再取菌種繼續(xù)接種。中間接種工作人員不得碰除枝條種之外的物品，如不小心碰到需用75%酒精消毒。②放入人工氣候培養(yǎng)室培養(yǎng)，及時檢測是否污染。菌袋長滿菌絲后移動到大棚進行管理，溫度應(yīng)控制在20℃左右，空氣相對濕度為80%左右，注意通風(fēng)以及二氧化碳濃度等。③單菇重測定：平菇邊緣即將翹起時采摘，這時并沒有孢子射出，采摘時不留小的平菇。稱重記錄產(chǎn)量。④干菇制備：采下的子實體自然風(fēng)干保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.6 平菇多糖含量的測定。樣品烘干、稱重、水浴、離心、旋蒸、乙醇溶解、沉淀過濾，得到粗多糖。

1.3.7 平菇蛋白含量的測定。分別取CK、處理1、處理2、處理3的平菇樣品5 g，粉碎為細(xì)粉，加入濃度為8 mol/L的尿素溶液300 ml，回流30 min，4500r/min離心10min，取上清液，加入三氯乙酸15ml，離心，取沉淀，滴加丙酮，離心，取沉淀，烘干至恒重，即得CK、處理1、處理2、處理3蛋白質(zhì)的質(zhì)量。

2 結(jié)果與分析

2.1 丹參對平菇菌絲體形態(tài)的影響。由表2可知，處理1、處理2較對照組菌絲形態(tài)無明顯變化，處理3較對照組相比菌絲較為稀疏。

表2 添加不同比例的丹參對菌絲體形態(tài)的影響

2.2 丹參對平菇菌絲生長速度的影響。由表3可知，這四個處理中處理1生長最快，但與CK比無顯著性差異，與處理2、處理3相比差異較為顯著；處理2最慢，與CK、處理1、處理3相比有顯著性差異。

表3 添加不同比例的丹參對平菇菌絲生長速度的影響

2.3 丹參對平菇子實體生長發(fā)育的影響。由表4可知，平菇單菇重由大到小依次為：CK＞處理2＞處理3＞處理1。CK的單菇重為91.41g，高于試驗組，與處理1、處理2、處理3相比有顯著性差異；處理1平均單菇重最輕，為71.05 g，與CK、處理2、處理3相比有差異顯著性。

表4 添加不同比例的丹參對平菇單菇重的影響

2.4 丹參對平菇子實體蛋白和多糖含量的影響。由表5可知，蛋白含量由大到小依次為：處理1＞處理3＞CK＞處理2，其中處理1、處理2與CK相比有顯著性差異，而處理3與CK無顯著性差異；多糖含量由大到小依次為：處理2＞處理1＞CK＞處理3，處理1、處理3與CK相比無顯著性差異，而處理2與CK相比差異顯著。

表5 丹參對平菇蛋白和多糖含量的影響

2.5 平菇中丹參的有效成分。經(jīng)檢驗，四個處理的蘑菇紫外吸收光譜沒有區(qū)別。由于紫外光吸收度是有加和性的，所以蘑菇提取液里沒有丹參素、丹酚酸和丹參酮等有效成分。

3 結(jié)論與討論

據(jù)試驗結(jié)果得知，在平菇栽培料中添加丹參粉，會對平菇的生長造成影響。在本試驗的梯度范圍內(nèi)添加丹參粉，會對平菇菌絲的生長產(chǎn)生一定的影響，至于影響的程度以及影響的利弊，還需后續(xù)更加嚴(yán)謹(jǐn)?shù)脑囼炦M行驗證。但添加丹參粉會對平菇子實體的單菇重產(chǎn)生一定程度的負(fù)面影響。同時，對添加了丹參處理的平菇自然風(fēng)干后進行蛋白、多糖和丹參有效成分含量的測定，發(fā)現(xiàn)添加丹參粉會提升平菇子實體的蛋白含量與多糖含量，而丹參的有效成分丹參素、丹酚酸和丹參酮均未檢測出，丹參酮IIa含量非常低。因此，為了更加全面的探究丹參對平菇子實體的的影響，還需進行進一步的試驗進行論證。

從物種分類來看，平菇與丹參分屬兩大界，將二者結(jié)合轉(zhuǎn)化是有些困難的。本處理在栽培料中添加丹參，為國內(nèi)外學(xué)者將藥用植物應(yīng)用于誘導(dǎo)大型食用真菌次生代謝產(chǎn)物積累的研究與實踐提供了寶貴經(jīng)驗。