傅建輝*

·基礎(chǔ)論著·

p53、p16及HER-2蛋白在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)及與臨床病理特征的關(guān)系研究

傅建輝*

（福建省婦幼保健院，福建 福州 350000）

研究分析子宮內(nèi)膜癌組織中p53、p16及HER-2蛋白表達(dá)與患者臨床病理特征之間的關(guān)系。：選取我院2017年6月至2021年3月收治的70例經(jīng)術(shù)后病理學(xué)檢查確診的子宮內(nèi)膜癌患者作為研究對(duì)象。采用免疫組化法對(duì)患者病理組織中p53、p16及HER-2蛋白表達(dá)進(jìn)行檢測，并分析這三種蛋白的表達(dá)與癌癥發(fā)生、病理類型、分化程度、FIGO分期的關(guān)系。：與癌旁組織相比，癌組織p53及HER-2陽性率更高（P<0.05），p16陽性率更低（P<0.05）；p53、p16以及HER-2在腺癌與非腺癌組織中的陽性率無明顯差異（P>0.05）； p16陽性率在G2級(jí)患者組織中最高，G3級(jí)次之，G1級(jí)患者組織中最低（P<0.05），p53、HER-2陽性率在G1級(jí)患者組織中最高，G2級(jí)次之，G3級(jí)患者組織中最低（P<0.05）；與Ⅰ期、Ⅱ期患者相比，Ⅲ期、Ⅳ期患者p53、HER-2陽性率均更高（P<0.05），而p16陽性率更低（P<0.05）；子宮內(nèi)膜癌組織分級(jí)和分期與p53、HER-2陽性表達(dá)為正相關(guān)關(guān)系（P<0.05），與p16陽性表達(dá)為負(fù)相關(guān)關(guān)系（P<0.05）。子宮內(nèi)膜癌患者臨床病理特征與p16表達(dá)降低及p53、HER-2表達(dá)升高存在明顯相關(guān)性，可為臨床治療及患者預(yù)后評(píng)估提供依據(jù)和參考。

子宮內(nèi)膜癌；臨床病理特征；p53；p16；HER-2

子宮內(nèi)膜癌是一種發(fā)病率較高的婦科惡性腫瘤，在臨床上較為常見。有調(diào)查研究指出，子宮內(nèi)膜受到雌激素過度刺激是引發(fā)該疾病的主要原因[1,2]，同時(shí)還指出肥胖、卵巢疾病、高血壓等慢性疾病以及遺傳因素等也與該疾病的發(fā)生存在密切聯(lián)系。子宮內(nèi)膜癌發(fā)作后可引發(fā)陰道流血、陰道異常排液等一系列臨床癥狀，會(huì)對(duì)患者身體健康及生命安全造成嚴(yán)重威脅。近些年來隨著生活環(huán)境及生活方式的改變，子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生率不斷升高，且低齡化趨勢愈發(fā)明顯。有研究發(fā)現(xiàn)，p53、p16及HER-2蛋白等子宮內(nèi)膜癌標(biāo)志物不僅能夠?qū)δ[瘤病灶分期、分級(jí)等情況進(jìn)行有效反映，并且還能夠在術(shù)后通過檢測相關(guān)標(biāo)志物水平，評(píng)估后期治療效果以及分析預(yù)測患者預(yù)后[3,4]。本文對(duì)子宮內(nèi)膜癌組織中p53、p16及HER-2蛋白表達(dá)與患者臨床病理特征之間的關(guān)系進(jìn)行研究分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2017年6月至2021年3月收治的70例子宮內(nèi)膜癌患者作為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：臨床診斷結(jié)合術(shù)后病理學(xué)檢查確診為子宮內(nèi)膜癌[5]；接受腹腔鏡下子宮內(nèi)膜癌根治術(shù)治療者；臨床資料完整無殘缺；患者了解并同意參加本研究，且簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：術(shù)前激素治療者；術(shù)前放療、化療治療者；合并凝血功能異常者；合并精神障礙者；合并全身感染者。所有患者年齡38～79歲，平均61.28±4.68歲；病理類型：腺癌44例，非腺癌26例；分化程度：G1級(jí)18例，G2級(jí)33例，G3級(jí)19例；FIGO分期：Ⅰ期16例，Ⅱ期19例，Ⅲ期18例，Ⅳ期17例。

1.2 方法

所有患者經(jīng)腹腔鏡下子宮內(nèi)膜癌根治術(shù)治療后將術(shù)中所得病理組織樣本送檢，首先由實(shí)驗(yàn)室醫(yī)務(wù)人員使用甲醛對(duì)樣本進(jìn)行固定，脫水處理后石蠟包埋并切片，之后使用烘箱對(duì)切片進(jìn)行脫蠟處理。采用真空負(fù)壓法進(jìn)行抗原修復(fù)，將玻片取出后使用蒸餾水反復(fù)沖洗3m in，分3次進(jìn)行，每次1 min。沖洗后完成后將3%雙氧水滴加到玻片上進(jìn)行孵育，時(shí)間10 min，完成后使用磷酸鹽緩沖液反復(fù)沖洗3min，分3次進(jìn)行，每次1 min。然后將磷酸鹽緩沖液清除干凈并繼續(xù)封閉處理，之后分別滴加p53、p16或HER-2的一抗工作液（上海博湖生物技術(shù)有限公司），于室溫下進(jìn)行孵育10 min，之后使用磷酸鹽緩沖液反復(fù)沖洗5 min，分3次進(jìn)行。完成后將酶標(biāo)二抗加入到各個(gè)切片中進(jìn)行孵育30 min，之后使用磷酸鹽緩沖液反復(fù)沖洗5 min，分2次進(jìn)行。取50 μL新鮮DAB顯色液加入每張切片中，于室溫下進(jìn)行孵育，時(shí)間10 min。完成后使用顯微鏡對(duì)切片進(jìn)行詳細(xì)觀察，之后依次進(jìn)行沖洗、復(fù)染、脫水及封片處理。所有操作步驟均嚴(yán)格按照抗免疫組化染色要求進(jìn)行。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)

對(duì)患者病理組織樣本切片進(jìn)行免疫組化染色后，在光學(xué)顯微鏡下觀察后獲取圖像，并對(duì)圖像中p53、p16和HER-2蛋白的的表達(dá)情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。分別p53、p16和HER-2抗體對(duì)應(yīng)，細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕褐色顆粒、而細(xì)胞質(zhì)呈現(xiàn)淡藍(lán)色為該蛋白的陽性表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

所有數(shù)據(jù)使用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)。兩變量的相關(guān)性采用Pearson相關(guān)性分析。P<0.05表示組間數(shù)據(jù)對(duì)比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 p53、p16以及HER-2在不同組織中的陽性率對(duì)比

癌組織中p53陽性率和HER-2陽性率明顯高于癌旁組織（P<0.05），而癌組織p16陽性率明顯低于癌旁組織（P<0.05）。見表1。

2.2 p53、p16以及HER-2在不同病理類型中的陽性率對(duì)比

p53、p16以及HER-2在腺癌患者與非腺癌患者中的陽性率無明顯差異（P>0.05），見表2。

表1 p53、p16以及HER-2在不同組織中的陽性率對(duì)比（例（%），n=70）

注：與癌旁組織相比，*P<0.05。

表2 p53、p16以及HER-2在不同病理類型中的陽性率對(duì)比（例（%））

注：與非腺癌相比，*P<0.05。

2.3 p53、p16以及HER-2在不同組織分級(jí)中的陽性率對(duì)比

p16的陽性率，G2、G3級(jí)患者明顯高于G1級(jí)患者，G3級(jí)患者明顯低于G2級(jí)患者（P<0.05）；p53和HER-2的陽性率，G2、G3級(jí)患者的明顯低于G1級(jí)患者，G3級(jí)患者的明顯低于G2級(jí)患者（P<0.05）。見表3。

2.4 p53、p16以及HER-2在不同分期患者中陽性率對(duì)比

與Ⅰ期、Ⅱ期患者相比，Ⅲ期、Ⅳ期患者p53、子宮內(nèi)膜癌HER-2陽性率均更高（P<0.05），且p16陽性率更低（P<0.05），見表4。

2.5 子宮內(nèi)膜癌不同組織分級(jí)及不同分期與p53、p16以及HER-2表達(dá)的相關(guān)性分析

子宮內(nèi)膜癌不同組織分級(jí)及不同分期與p53及HER-2陽性表達(dá)為正相關(guān)關(guān)系（r=0.689，0.531，P<0.05；r=0.591，0.520，P<0.05），與p16陽性表達(dá)為負(fù)相關(guān)關(guān)系（r=-0.639，-0.579，P<0.05）。

表3 p53、p16以及HER-2在不同組織分級(jí)中的陽性率對(duì)比（例（%））

注：與G1相比，*P<0.05；與G2相比，#P>0.05。

表4. p53、p16以及HER-2在不同分期患者中陽性率對(duì)比（n=35，例（%））

注：與Ⅰ期+Ⅱ期相比，*P<0.05。

3 討論

p53是一種抑癌基因，有研究表明，婦女子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生與該基因發(fā)生突變存在密切聯(lián)系[6,7]。在本次研究中，我們通過檢測腹腔鏡下子宮內(nèi)膜癌根治術(shù)中所得患者組織樣本發(fā)現(xiàn)與癌旁組織相比，癌組織p53陽性率更高（P<0.05），提示與癌旁組織相比，癌組織存在更加明顯的p53表達(dá)。與此同時(shí)與G2、G3級(jí)患者相比，G1級(jí)患者p53陽性率更高（P<0.05），且與Ⅰ期、Ⅱ期患者相比，Ⅲ期、Ⅳ期患者p53陽性率更高（P<0.05），提示p53陽性表達(dá)隨著患者分期及組織分級(jí)的升高而升高，本次研究結(jié)果還顯示子宮內(nèi)膜癌不同組織分級(jí)及不同分期與p53陽性表達(dá)為正相關(guān)關(guān)系（P<0.05），提示隨著患者病情的發(fā)展惡化p53表達(dá)也會(huì)隨之升高。

p16在臨床檢測高危型人乳頭瘤病毒（HPV）中應(yīng)用廣泛，可通過檢測該物質(zhì)水平鑒別診斷子宮內(nèi)膜癌與宮頸腺癌[8,9]。在本次研究中與癌旁組織相比，癌組織p16陽性率更低（P<0.05），與此同時(shí)與G2、G3級(jí)患者相比，G1級(jí)患者p16陽性率更低（P<0.05），且與Ⅰ期、Ⅱ期患者相比，Ⅲ期、Ⅳ期患者p16陽性率更低（P<0.05），提示p16陽性表達(dá)隨著患者分期及組織分級(jí)的升高而降低，本次研究結(jié)果還顯示子宮內(nèi)膜癌不同組織分級(jí)及不同分期與p16陽性表達(dá)為負(fù)相關(guān)關(guān)系（P<0.05），即隨著患者病情的發(fā)展惡化p53表達(dá)也隨之降低。

HER-2通過結(jié)合特異性配體能夠?qū)?xì)胞的分裂、增殖等過程進(jìn)行有效控制，對(duì)癌細(xì)胞的發(fā)生發(fā)展具有促進(jìn)作用[10-12]。在本次研究中與癌旁組織相比，癌組織HER-2陽性率更高（P<0.05），與此同時(shí)與G2、G3級(jí)患者相比，G1級(jí)患者HER-2陽性率更高（P<0.05），且與Ⅰ期、Ⅱ期患者相比，Ⅲ期、Ⅳ期患者HER-2陽性率均更高（P<0.05），提示HER-2陽性表達(dá)隨著患者分期及組織分級(jí)的升高而升高，本次研究結(jié)果還顯示子宮內(nèi)膜癌不同組織分級(jí)及不同分期與HER-2陽性表達(dá)為正相關(guān)關(guān)系（P<0.05），即隨著患者病情的發(fā)展惡化HER-2表達(dá)也會(huì)隨之升高。

總而言之，子宮內(nèi)膜癌患者臨床病理特征與p16表達(dá)降低及p53、HER-2表達(dá)升高存在明顯相關(guān)性，可為子宮內(nèi)膜癌患者的資料與預(yù)后評(píng)估提供依據(jù)。

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Expression of p53, p16 and HER-2 proteins in endometrial carcinoma and their relationship with clinicopathological features

Fu Jian-hui*

(Fujian Maternal and Child Health Hospital, Fuzhou 350000, China)

To study and analyze the relationship between the expression of p53, p16 and HER-2 protein in endometrial cancer tissues and the clinicopathological characteristics of patients.A total of 70 patients with endometrial cancer diagnosed by postoperative pathological examinations admitted to our hospital from June 2017 to March 2021 were selected as the research objects. Immunohistochemical method was used to detect the expression of p53, p16 and HER-2 protein in the patient's pathological tissue, and the relationship between the expression of these three proteins and the occurrence of cancer, pathological type, degree of differentiation, and FIGO stage was analyzed.Compared with adjacent tissues, the positive rates of p53 and HER-2 in cancer tissues were higher (P<0.05), and the positive rates of p16 were lower (P<0.05); p53, p16 and HER-2 were found in adenocarcinoma and non-glandular tissues. There was no significant difference in the positive rate in cancer tissues (P>0.05); the positive rate of p16 was the highest in the tissues of G2 patients, followed by G3, and the lowest in G1 patients (P<0.05). The positive rates of p53 and HER-2 were It was the highest in G1 patient tissue, followed by G2, and the lowest in G3 patient tissue (P<0.05); compared with patients in stage I and II, the positive rates of p53 and HER-2 were higher in patients in stage III and IV. High (P<0.05), while the positive rate of p16 is lower (P<0.05); the grade and staging of endometrial cancer are positively correlated with the positive expression of p53 and HER-2 (P<0.05), and the positive expression of p16 is Negative correlation (P<0.05).The clinicopathological characteristics of patients with endometrial cancer are significantly correlated with the decrease of p16 expression and the increase of p53 and HER-2 expression, which can provide basis and reference for clinical treatment and patient prognosis evaluation.

Endometrial carcinoma; Clinicopathological features; p53; p16; HER-2

作者簡介：傅建輝，男，住院醫(yī)師，主要從事婦產(chǎn)科的臨床和研究工作，Email：Fulin36966@163.com。

（2021-10-15）