馬曉晨 羅 甜 吳慧麗

山東省濟南市婦幼保健院(250001)

據(jù)報道，宮內感染發(fā)生率國外為5%～10%，我國為0.7%～5%[1-2]。宮內感染不僅可導致產(chǎn)婦發(fā)生絨毛膜羊膜炎，還可引起新生兒敗血癥、新生兒感染性肺炎、圍產(chǎn)期腦損傷等不良事件[3]。目前，診斷宮內感染的金標準是產(chǎn)后胎盤病理及細菌培養(yǎng)，分娩前診斷仍依賴于血清學檢測[4-5]。研究認為機體在遭受細菌感染時血清鐵蛋白(FP)水平明顯升高，在感染期間FP水平反映機體的某種防御機制，通過剝奪細菌在體內所需的鐵來保護免疫細胞功能[6]。近年相關研究顯示，微小RNA(miRNA)的過表達可能與新生兒窒息發(fā)生發(fā)展密切相關，尤其是在新生兒缺血缺氧性腦病中常可檢測到miR-182的過表達。miR-182屬一種缺氧特異性miRNA，已被證實與臨床上多種常見病如神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤、缺血性腦卒中等密切相關[7]。鑒于此研究現(xiàn)狀，筆者收集了近年來本院收治的宮內感染產(chǎn)婦資料，探討血清FP聯(lián)合miR-182檢測對宮內感染的診斷及對新生兒預后的評估價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2016年10月—2019年8月本院收治的絨毛膜羊膜炎產(chǎn)婦臨床資料52例作為感染組，年齡(26.4±3.4)歲(24～31歲)，孕周(36.2±3.1)周(28～40周)；住院分娩或晚期妊娠引產(chǎn)的年齡及孕周匹配的健康產(chǎn)婦50例作為對照組，年齡(27.1±3.5)歲(24～32歲)，孕周(35.9±3.1)周(32～40周)。納入標準：①感染組符合絨毛膜羊膜炎臨床診斷標準[8]，且術后胎盤病理證實；②單胎妊娠；③產(chǎn)婦及家屬簽署知情同意書。排除標準：①伴機體其他部位嚴重感染；②伴有妊娠期高血壓、妊娠期膽汁淤積癥等妊娠合并疾??；③入組前3月有抗生素藥物使用史；④合并心、肝、腎等重要臟器功能不全。本研究通過醫(yī)院倫理委員會審查并備案。

1.2 檢測方法

患者入院后分別于感染加重時、破膜6h內(使用抗生素前)、分娩時取靜脈血分離上清液，采用CF-10全自動化學發(fā)光儀(武漢明德生物科技有限公司)檢測血清FP水平。利用miRNAesy Kit試劑盒(Qiagen公司)提取血清總RNA，核酸定量檢測分析儀檢測血清總RNA濃度以及純度。取2μg總RNA置于逆轉錄試劑盒中合成cDNA，以cDNA為模板行實時熒光定量PCR反應。反應條件：90℃、15min預變性，95℃、15s，60℃、30s，72℃、20s，共循環(huán)40次。miR-182上游引物序列為：5’-TTTGGCAATGGTAGAACTCACACT-3’，下游引物序列為：5’-GCTTTGGCAATGGTAGAACTCACACT-3’，U6上游引物序列為：5’-CTCCCTTCGGCAGCACA-3’，下游引物序列為：5’-AAGGCTTCACGAATTTGCGT-3’。將U6作為參照，采用2-△△Ct法計算miR-200b-3p相對表達量。

1.3 統(tǒng)計學方法

2 結果

2.1 血清FP水平及miR-182相對表達量

感染組血清FP水平(298.48±48.72μg/L)及miR-182相對表達量(2.38±0.70)均高于對照組(197.42±50.80μg/L、1.36±0.47)(t=10.256、8.605，均P<0.001)。

2.2 血清FP聯(lián)合miR-182檢測診斷宮內感染效能

ROC曲線分析顯示，血清FP聯(lián)合miR-182診斷宮內感染價值優(yōu)于單項檢測。見表1。

表1 不同指標診斷宮內感染效能

2.3 新生兒不良結局

感染組新生兒宮內感染、呼吸窘迫綜合征、宮內感染性肺炎、圍產(chǎn)期腦損傷、新生兒死亡、新生兒Apgar評分<7分的發(fā)生率均高于對照組(P<0.05)，兩組新生兒早產(chǎn)和宮內窘迫的發(fā)生率無差異(P>0.05)。見表2。

表2 兩組新生兒不良結局比較[例(%)]

2.4 感染組新生兒Apgar評分與產(chǎn)婦血清FP、miR-182相關性

感染組新生兒Apgar評分<7分、Apgar評分≥7分的產(chǎn)婦血清FP(311.78±51.22μg/L、258.03±49.97μg/L)及miR-182(2.44±0.68、2.01±0.73)有差異(t=3.716、2.157，P=0.001、0.036)。Pearson相關性分析顯示，產(chǎn)婦FP水平及miR-182與新生兒Apgar評分均呈負相關(r=-0.308、-0.320，P=0.028、0.022)。

3 討論

宮內感染不僅可導致產(chǎn)婦絨毛膜羊膜炎，還可導致胎兒早產(chǎn)、敗血癥、新生兒腦損傷、新生兒呼吸窘迫綜合征、感染性肺炎等不良結局的發(fā)生[9-10]。相關研究表明，絨毛膜羊膜炎與新生兒不良預后密切相關。陳悅群等研究表明，診斷為絨毛膜羊膜炎的產(chǎn)婦新生兒罹患敗血癥幾率高達6%；杜紅艷等研究顯示，在產(chǎn)后合并新生兒感染的母親患絨毛膜羊膜炎的幾率為31%。說明絨毛膜羊膜炎與新生兒感染具有相關性[11-12]。因此，早期診斷并采取有效治療對改善母嬰結局有至關重要作用[13]。

目前臨床診斷產(chǎn)婦絨毛膜羊膜炎的實驗室檢查指標種類繁多，但特異度和靈敏度千差萬別。有研究表明，F(xiàn)P參與機體免疫調節(jié)過程，淋巴細胞表面有鐵蛋白受體分子，可與鐵蛋白H亞基相結合，這種結合見于機體B淋巴細胞和部分CD4+、CD8+T淋巴細胞[14]。當機體遭受病原體感染時，急性時相蛋白及細胞因子的作用可調節(jié)鐵的轉運和代謝過程，打破了鐵平衡，大量鐵轉運至機體網(wǎng)狀內皮系統(tǒng)內，使循環(huán)中鐵離子濃度下降，而FP水平升高[16-17]。另外，在感染條件下機體腸道吸收鐵減少，網(wǎng)狀內皮系統(tǒng)對鐵的親和力增加，不能有效釋放鐵進入血漿，稱為網(wǎng)狀內皮鐵阻滯現(xiàn)象，這些因素都導致了血清FP升高[18]。臨床研究已經(jīng)證實，miRNA對新生兒缺血缺氧性腦病有獨特的預測價值。miR-182在缺血缺氧性腦病的發(fā)生發(fā)展中有重要作用。Stittrich等在小鼠的大腦缺血缺氧模型中發(fā)現(xiàn)大腦皮質miR-182表達水平明顯升高?；趯m內感染可導致新生兒缺血缺氧性腦病等基礎研究結論，有學者提出，可通過miR-182的表達水平輔助診斷宮內感染及評估新生兒預后[19]。

本研究結果顯示，感染組血清FP水平及miR-182相對表達量均高于對照組，兩指標聯(lián)合檢測具有較高的診斷價值。感染組新生兒宮內感染、新生兒呼吸窘迫綜合征、新生兒宮內感染性肺炎、圍產(chǎn)期腦損傷、新生兒死亡、新生兒Apgar評分<7分的發(fā)生率均高于對照組，新生兒Apgar評分<7分的產(chǎn)婦血清FP水平及miR-182水平均低于Apgar評分≥7分產(chǎn)婦，F(xiàn)P及miR-182水平與新生兒Apgar評分均呈負相關。二者聯(lián)合檢測，不僅可提高診斷宮內感染的準確率，對新生兒圍產(chǎn)期腦損傷、感染性肺炎等不良結局也有預測價值[20]。

綜上所述，血清FP聯(lián)合miR-182檢測對產(chǎn)婦宮內感染和新生兒預后有較好診斷及評估價值，臨床可評估產(chǎn)婦宮內感染及新生兒預后，早期采取針對性診療措施，改善母嬰結局。