李桐,解樹珍,楊園園,張德鵬,魏曉明*
(1.中糧營(yíng)養(yǎng)健康研究院有限公司,營(yíng)養(yǎng)健康與食品安全北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,老年?duì)I養(yǎng)食品研究北京市工程實(shí)驗(yàn)室,北京 102209;2.中糧面業(yè)(濮陽)有限公司,河南 濮陽 457000)
面條作為我國(guó)傳統(tǒng)面制品之一長(zhǎng)久以來廣受大眾歡迎,其中掛面更是因?yàn)槭秤梅奖?、做法多樣、易?chǔ)藏、價(jià)格低等優(yōu)點(diǎn)而占據(jù)廣闊市場(chǎng)。目前,我國(guó)掛面的保質(zhì)期大多在12個(gè)月,但受季節(jié)、運(yùn)輸及儲(chǔ)藏條件等一些因素的影響,保質(zhì)期內(nèi)的掛面在銷售及儲(chǔ)藏過程中有時(shí)會(huì)產(chǎn)生發(fā)酸、哈敗等異味,嚴(yán)重者更是出現(xiàn)發(fā)霉現(xiàn)象。
掛面中哈敗味的產(chǎn)生,主要是由于面條中脂質(zhì)逐漸發(fā)生水解和氧化反應(yīng)[1]。脂肪經(jīng)過水解產(chǎn)生游離脂肪酸,其中的小分子脂肪酸則帶有不良?xì)馕?;同時(shí)掛面中的不飽和脂肪酸在氧氣、光、熱等作用下氧化生成不穩(wěn)定的氫過氧化物,繼而分解為帶有異味的醛酮類物質(zhì)[2-3]。同時(shí),較高活性的脂肪酶將促進(jìn)脂肪水解;脂肪氧化酶則催化不飽和脂肪酸發(fā)生氧化[4],這二者都將降低掛面的品質(zhì),加速其達(dá)到保質(zhì)期終點(diǎn)。此外,掛面出廠時(shí)微生物數(shù)量也是影響掛面儲(chǔ)藏期的關(guān)鍵指標(biāo)。掛面生產(chǎn)過程中會(huì)產(chǎn)生含水量較高的面條濕碎頭,在車間、烘房的較高溫度下很容易引起微生物迅速繁殖[5],這部分面條濕碎頭經(jīng)回添后將重新經(jīng)過壓延、切條等過程參與掛面生產(chǎn),而較低溫度的干燥不能使掛面中微生物有效滅活,最終可能導(dǎo)致成品掛面微生物數(shù)量較多,在保質(zhì)期內(nèi)很快出現(xiàn)酸味、霉味等品質(zhì)劣變現(xiàn)象。
在掛面生產(chǎn)過程中,干燥環(huán)節(jié)是關(guān)鍵性工序,與掛面的出廠品質(zhì)密切相關(guān)。目前,我國(guó)的掛面生產(chǎn)企業(yè)大多采用中溫干燥工藝,其主干燥區(qū)溫度一般設(shè)置在45℃左右[6],但中溫干燥可能為掛面品質(zhì)留下隱患。近年來,國(guó)內(nèi)外已逐步開始關(guān)注高溫干燥工藝對(duì)掛面品質(zhì)的影響。有意大利的學(xué)者研究表明,經(jīng)高溫干燥(90℃)生產(chǎn)的通心粉中蛋白質(zhì)聚集程度較高,且其熟后淀粉、蛋白質(zhì)的消化率顯著降低[7]。國(guó)內(nèi)有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn),不同烘干溫度(45、55、65、75、85、95 ℃)下掛面的最佳蒸煮時(shí)間與溫度呈負(fù)相關(guān),此外干燥溫度對(duì)掛面質(zhì)構(gòu)特性、蒸煮特性及掛面中淀粉和蛋白組分含量也均有不同程度影響[8]。Li等[9]對(duì)比了在干燥溫度45、60、75 ℃和干燥時(shí)間 12、8、6 min 的條件下生產(chǎn)的半干面條品質(zhì)(水分含量約為23.5%),發(fā)現(xiàn)干燥溫度為75℃時(shí)微生物數(shù)量顯著降低。另外,掛面經(jīng)過80℃的高溫干燥后其密度顯著下降,但當(dāng)提高干燥階段的相對(duì)濕度到75%以上時(shí),其抗彎強(qiáng)度隨溫度的升高而顯著增強(qiáng)[10]。
目前國(guó)內(nèi)外的研究大多關(guān)注高溫干燥工藝對(duì)掛面基本特性的影響,探究中高溫干燥對(duì)掛面保質(zhì)期關(guān)鍵因素影響的研究還較少。因此,本試驗(yàn)設(shè)計(jì)采用中高溫度對(duì)掛面進(jìn)行干燥,并通過對(duì)掛面水分、酸度、脂肪酸值、脂肪酶活性、脂肪氧化酶活性、微生物數(shù)量等指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定,比較中高溫干燥對(duì)掛面保質(zhì)期關(guān)鍵因素的影響,從而為提高掛面儲(chǔ)藏品質(zhì)、延長(zhǎng)國(guó)內(nèi)掛面制品保質(zhì)期提供科學(xué)依據(jù)。
多用途麥芯粉(5 kg/袋):中糧(鄭州)糧油工業(yè)有限公司;營(yíng)養(yǎng)瓊脂、孟加拉紅培養(yǎng)基:北京陸橋技術(shù)股份有限公司;氯化鈉(分析純)、95%乙醇(分析純):國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;亞油酸:TCI東京化成工業(yè)株式會(huì)社;吐溫20:北京索萊寶科技有限公司;植物脂肪酶試劑盒:上海酶聯(lián)生物科技有限公司。
和面機(jī)(KVC30):英國(guó)KENWOOD公司;面條機(jī)(JMTD168/140):北京東孚久恒儀器技術(shù)有限公司;智能掛面干燥箱(SYT-030):中國(guó)包裝和食品機(jī)械有限公司;旋風(fēng)磨(laboratory mill 3100):波通瑞華科學(xué)儀器(北京)有限公司;分光光度計(jì)(2802):尤尼柯(上海)儀器有限公司;離心機(jī)(TGL20M):常州百密思儀器有限公司;酶標(biāo)儀(EON):美國(guó)伯騰儀器有限公司;恒溫恒濕箱(MJ-250-Ⅰ):上海一恒科學(xué)儀器有限公司;色度儀(964):愛麗色有限公司。
1.3.1 制備掛面
稱取一定量的小麥粉,加入35%~37%的去離子水,然后和面7 min,將面絮于室溫(25℃)條件下熟化20 min。用面條機(jī)復(fù)合壓延4次至面帶厚度達(dá)到1.0 mm,隨之進(jìn)行切條。將待干燥的面條置于智能掛面干燥箱中進(jìn)行分段干燥4.5 h,主干燥溫度分別設(shè)置為40、50、60、70、80 ℃,時(shí)間為 60 min。
1.3.2 水分含量的測(cè)定
按照GB 5009.3—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中水分的測(cè)定》測(cè)定掛面水分含量。
1.3.3 掛面色澤測(cè)定
參考韓銳等[11]的方法進(jìn)行測(cè)試及計(jì)算。將待測(cè)掛面整齊排列并平鋪在操作臺(tái)上,對(duì)每組待測(cè)掛面分別進(jìn)行多次測(cè)定,每次測(cè)定不同位置,分別記錄L*、a*、b*值。
1.3.4 酸度的測(cè)定
按照GB 5009.239—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品酸度的測(cè)定》中的第一法執(zhí)行,測(cè)定掛面酸度。
1.3.5 脂肪酸值的測(cè)定
按照GB 15684—2015《谷物碾磨制品脂肪酸值的測(cè)定》測(cè)定掛面脂肪酸值,單位為mg/100 g,以KOH計(jì)。
1.3.6 脂肪酶活性測(cè)定
稱取2g掛面粉,加入8mL的磷酸鹽緩沖液(0.1mol/L、pH7.5),振蕩混勻,4℃冰浴 30 min后離心(4℃、3 000 r/min、20 min),取上清液作為粗酶液。
脂肪酶活性使用植物脂肪酶試劑盒進(jìn)行測(cè)定。先將冷藏的試劑盒在室溫(25℃)下平衡90 min后進(jìn)行使用,設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)孔、空白孔及樣品孔。標(biāo)準(zhǔn)孔中分別加入5 μL不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品;樣品孔中加入40 μL樣品稀釋液和10 μL樣品;空白孔不加樣品和酶標(biāo)試劑,其余步驟一致。將100 μL酶標(biāo)試劑加入到微孔中,蓋好封板膜后37℃溫育60 min。結(jié)束后棄去液體,洗滌5次并拍干。然后每孔加入50 μL顯色劑A、50 μL顯色劑B,混勻后37℃條件避光15 min。隨后加入50 μL終止液。完成后15 min內(nèi)測(cè)定吸光度,波長(zhǎng)設(shè)置為450 nm。
1.3.7 脂肪氧化酶活性測(cè)定
參考Cato等[12]的方法并作適當(dāng)修改,采用分光光度計(jì)法測(cè)定脂肪氧化酶活性。粗酶液提取方法同1.3.6。
將0.5 mL的吐溫20溶于10 mL硼酸鹽緩沖液(0.05 mol/L、pH9),隨后加入 600 μL 亞油酸?;旌暇鶆蚝螅尤?.3 mL、1 mol/L的氫氧化鈉溶液和90 mL、0.05 mol/L的硼酸鹽緩沖液,用0.1 mol/L的HCl溶液調(diào)至pH7,并用蒸餾水補(bǔ)足200 mL。
蒸餾水作為空白,將pH5.6、0.05 mol/L的乙酸鈉緩沖液、底物溶液、50 μL 酶液按 20∶1∶1 的體積比混合均勻,在波長(zhǎng)為234 nm條件下測(cè)定,記錄初始及反應(yīng)3 min后的吸光值。在一定條件下以亞油酸為底物時(shí),每毫升反應(yīng)體系每分鐘內(nèi)OD234nm增加0.001為一個(gè)酶活力單位(U)。
1.3.8 微生物數(shù)量測(cè)定
菌落總數(shù)的測(cè)定按照GB 4789.2—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測(cè)定》執(zhí)行;霉菌、酵母的測(cè)定按照GB 4789.15—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)霉菌和酵母計(jì)數(shù)》執(zhí)行。
本研究結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示(均進(jìn)行3次獨(dú)立重復(fù)試驗(yàn),n=3),并且使用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS(版本22.0)進(jìn)行方差分析和Duncan多重比較分析,檢測(cè)結(jié)果差異顯著為p<0.05(標(biāo)注不相同字母)。作圖使用軟件Microsoft Excel(版本2010)。
相較于生鮮面制品,掛面具有較長(zhǎng)的儲(chǔ)藏期,這主要?dú)w功于其較低的含水量。因此,水分含量是評(píng)價(jià)掛面的關(guān)鍵指標(biāo)。對(duì)不同干燥溫度(40、50、60、70、80℃)下掛面的水分含量進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果見圖1。
圖1 干燥溫度對(duì)掛面水分含量的影響Fig.1 Effect of drying temperature on moisture content of dried noodles
從圖1可以看出,在相同的烘干時(shí)間下,干燥溫度為中等溫度(40、50℃)時(shí)對(duì)成品掛面水分含量影響不顯著。但隨著干燥溫度進(jìn)一步升高,掛面的水分含量逐漸降低,在80℃時(shí)達(dá)到最低,此時(shí)干燥溫度對(duì)掛面水分含量影響較為顯著(p<0.05)。此結(jié)果與郭穎[8]的研究結(jié)果一致。
掛面的色澤是消費(fèi)者在選購(gòu)時(shí)獲得的第一感官印象,因此掛面色澤潔白、有光澤度至關(guān)重要。對(duì)不同干燥溫度(40、50、60、70、80 ℃)掛面的色澤進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果見表1。
表1 干燥溫度對(duì)掛面色澤的影響Table 1 Effect of drying temperature on the color of dried noodles
從表1中可以看出,隨著干燥溫度的升高(40℃~80℃),掛面的亮度值(L*)及白度值沒有顯著變化;而隨干燥溫度升高到80℃,a*值發(fā)生顯著升高(p<0.05);b*值隨干燥溫度升高,呈現(xiàn)先上升后降低的趨勢(shì),在60℃時(shí)達(dá)到最大值,但整體變化程度較小。此結(jié)果與惠瀅等的結(jié)論相似[10,13]?;轂]等[10]在研究高溫高濕干燥工藝對(duì)掛面產(chǎn)品特性的影響時(shí)發(fā)現(xiàn),相對(duì)濕度相同條件下干燥溫度(40、60、80℃)對(duì) L*值無顯著影響;王杰等[13]研究發(fā)現(xiàn),隨著掛面干燥溫度從30℃升高至50℃,a*值從-0.71升高至-0.66。分析認(rèn)為,a*值及b*值的變化可能是由于掛面經(jīng)歷高溫干燥,導(dǎo)致蛋白質(zhì)發(fā)生變性及引起淀粉糊化,使得掛面色澤有所改變[14];此外,干燥時(shí)的高溫導(dǎo)致脂肪氧化酶部分失活,也可能會(huì)導(dǎo)致黃度(b*)值略有改變。整體來看,干燥溫度的升高對(duì)掛面的白度值無顯著影響。
不同干燥溫度(40、50、60、70、80 ℃)對(duì)掛面的酸度影響結(jié)果如圖2所示。
圖2 干燥溫度對(duì)掛面酸度的影響Fig.2 Effect of drying temperature on acidity of dried noodles
從圖2中可以看出,不同干燥溫度下掛面的酸度無顯著差異。這一結(jié)果與郭穎[8]的研究結(jié)論一致。分析認(rèn)為這可能是由于掛面干燥過程中并沒有發(fā)生可以產(chǎn)生酸性物質(zhì)的反應(yīng),酸度主要來源于樣品中的可溶性酸性物質(zhì),而這些物質(zhì)在掛面干燥過程中并不會(huì)增加[8]。
脂肪酸值一般用來衡量糧食中的游離脂肪酸含量,是表征糧食及其制品儲(chǔ)藏品質(zhì)的關(guān)鍵指標(biāo)[15]。干燥溫度對(duì)掛面脂肪酸值的影響見圖3。
圖3 干燥溫度對(duì)掛面脂肪酸值的影響Fig.3 Effect of drying temperature on fat acidity value of dried noodles
從圖3中可以看出,高溫干燥掛面的脂肪酸值顯著低于中溫(40、50℃)干燥掛面(p<0.05),經(jīng)過 60℃及以上的溫度進(jìn)行干燥時(shí),脂肪酸值降低程度較大,由40℃干燥時(shí)的55.5 mg/100 g降低到了60℃時(shí)的36.8 mg/100 g,降幅約為33.7%。游離脂肪酸主要是由糧食及其制品所含脂肪氧化分解而來[15]。脂肪酸的沸點(diǎn)隨碳鏈的增長(zhǎng)而升高,可分為揮發(fā)性脂肪酸和非揮發(fā)性脂肪酸。分析認(rèn)為,可能是由于掛面在高溫干燥的過程中一些低分子脂肪酸揮發(fā)從而引起脂肪酸值的降低[16]。脂肪酸值可以衡量糧食及其制品的品質(zhì)變化程度,目前對(duì)于掛面的脂肪酸值在我國(guó)的標(biāo)準(zhǔn)中沒有詳細(xì)規(guī)定,但在小麥粉的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中要求以濕基計(jì)不得高于80 mg/100 g。因此,脂肪酸值也反映了高溫干燥有助于延長(zhǎng)掛面保質(zhì)期。
掛面中脂肪含量約為1%~2%[3],很容易受脂肪酶催化發(fā)生水解反應(yīng)產(chǎn)生游離脂肪酸,進(jìn)而導(dǎo)致掛面品質(zhì)發(fā)生劣變。因此脂肪酶活性是影響掛面保質(zhì)期的關(guān)鍵因素之一[1]。干燥溫度對(duì)掛面脂肪酶活性的影響見圖4。
圖4 干燥溫度對(duì)掛面脂肪酶活性的影響Fig.4 Effect of drying temperature on lipase activity of dried noodles
從圖4中可以看出,隨著干燥溫度升高到70℃,掛面中的脂肪酶活性顯著降低(p<0.05)。相較于40℃條件下干燥的掛面,70℃及80℃干燥掛面的脂肪酶活性分別降低了21.7%和17.2%。小麥粉中的脂肪酶最適溫度為30℃~40℃[17],分析認(rèn)為可能是隨著干燥溫度的逐漸升高,改變了酶的結(jié)構(gòu)或破壞了其構(gòu)象,進(jìn)而影響了其生理功能,導(dǎo)致部分脂肪酶失活,最終使得掛面中脂肪酶活性逐漸降低。
小麥粉中脂肪酸組成主要包括亞油酸、亞麻酸、油酸、硬脂酸等[18-19],而脂肪氧化酶能夠催化不飽和脂肪酸的加氧反應(yīng)形成氫過氧化物,且主要以亞油酸、亞麻酸等為底物[20]。不同干燥溫度對(duì)掛面的脂肪氧化酶活性影響結(jié)果如圖5所示。
從圖5中可以看出,掛面中的脂肪氧化酶活性隨干燥溫度的升高整體上呈降低趨勢(shì),在干燥溫度為80℃時(shí)達(dá)到最小值。有研究表明,溫度在35℃~55℃時(shí)脂肪氧化酶活性最佳,當(dāng)溫度高于60℃時(shí)其活性將顯著下降[21]。溫度是影響脂肪氧化酶活性的主要因素之一,通過調(diào)整溫度能夠很好地控制脂肪氧化酶的活性[20]。因此,可以認(rèn)為高溫干燥有助于降低脂肪氧化酶活性,進(jìn)而提高掛面產(chǎn)品的儲(chǔ)藏穩(wěn)定性。
圖5 干燥溫度對(duì)掛面脂肪氧化酶活性的影響Fig.5 Effect of drying temperature on lipoxygenase activity of dried noodles
不同干燥溫度對(duì)掛面微生物數(shù)量的影響見圖6。
圖6 干燥溫度對(duì)掛面微生物數(shù)量的影響Fig.6 Effect of drying temperature on the number of microorganisms in dried noodles
從圖6中可以看出,升高干燥溫度可以顯著降低掛面中菌落總數(shù)(p<0.05),且干燥溫度越高,微生物滅活效果越好。推測(cè)是因?yàn)闇囟戎饾u升高的過程中,熱量破壞了微生物細(xì)胞的蛋白質(zhì)和細(xì)胞膜的滲透作用,進(jìn)而產(chǎn)生滅活微生物的作用[22-23]。另一方面,掛面的原料面粉中也可能帶入部分微生物,高溫干燥也有助于將其部分殺滅,從而可提高產(chǎn)品的衛(wèi)生安全及延長(zhǎng)保質(zhì)期[24]。有文獻(xiàn)表明,對(duì)于面條來說其菌落總數(shù)在106CFU/g時(shí)被視為變質(zhì)和未變質(zhì)之間的分界點(diǎn)[25]。目前我國(guó)市場(chǎng)上的掛面保質(zhì)期大多在12個(gè)月,距離提高到18個(gè)月及以上的保質(zhì)期還有很大差距。因此,通過高溫干燥可降低掛面出廠時(shí)微生物數(shù)量,為有效延長(zhǎng)掛面保質(zhì)期提供了更多選擇。
本試驗(yàn)研究了中高溫干燥對(duì)掛面儲(chǔ)藏品質(zhì)的影響。結(jié)果表明,相比于中溫干燥,經(jīng)過高溫干燥后掛面的脂肪酸值及水分含量顯著降低(p<0.05)。同時(shí),掛面中的脂肪酶活性及脂肪氧化酶活性均隨干燥溫度升高而降低;掛面中微生物數(shù)量也顯著減少(p<0.05),且干燥溫度越高,菌落總數(shù)越少。但中高溫干燥對(duì)掛面酸度及白度影響不顯著。因此,掛面采用高溫干燥有助于延長(zhǎng)掛面保質(zhì)期,在實(shí)際生產(chǎn)中可根據(jù)實(shí)際需要適當(dāng)選擇干燥溫度。