王小琴，王 璐，王慶國，馮疆濤

（1.新疆阿克蘇地區(qū)疾病預(yù)防控制中心，新疆阿克蘇 843000；2.新疆維吾爾自治區(qū)疾病預(yù)防控制中心，新疆烏魯木齊 830000）

有機磷農(nóng)藥是我國應(yīng)用最多的磷酸酯類農(nóng)藥[1-2]，當(dāng)前，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，有機磷農(nóng)藥的使用非常普遍、廣泛，是有效清除蔬菜、水果病蟲害危險的高效廣譜殺蟲劑[3]。而有機磷農(nóng)藥的品種非常多，常見的有樂果、久效磷、對硫酸和馬拉硫酸4 種，這4 種有機磷農(nóng)藥具有殺蟲譜廣、價格低廉、殺蟲速度快的優(yōu)點，也正是因為如此，有機磷農(nóng)藥的使用范圍非常廣泛[4]。有機磷農(nóng)藥屬于一種神經(jīng)毒物，如果攝入過量，會導(dǎo)致人的神經(jīng)功能紊亂，嚴重損害身體健康[5-8]。因此，必須要開展更為高效的有機磷農(nóng)藥殘留的檢測方法，才能夠準確掌握農(nóng)藥的殘留情況并及時清除，對人們的生命安全做出全面保障[9]。所以，開展蔬菜中有機磷農(nóng)藥殘留監(jiān)測工作，及時、準確地檢測殘留農(nóng)藥，對蔬菜安全生產(chǎn)及提高蔬菜品質(zhì)具有重要意義[10-11]。日常檢測中，農(nóng)殘監(jiān)測的任務(wù)繁重，當(dāng)前我國農(nóng)藥殘留監(jiān)測的方法主要為GC、GC-MS 等[12-14]，隨著氣相色譜三重四級桿質(zhì)譜的普及，GC-MS 的檢測方法以其高選擇性、高靈敏度、高通量等特點，應(yīng)用越來越廣泛[15-19]。

本研究以蘋果基質(zhì)作為實驗材料，選擇本區(qū)域果農(nóng)常用的7 種農(nóng)藥，建立使用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)法同時檢測7 種農(nóng)藥殘留的分析方法，主要是優(yōu)化樣品前處理過程，提高檢測效率，從而降低檢測成本。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

蘋果超市自購；7 種農(nóng)藥標(biāo)準品1 000 μg/mL（中國農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護科研監(jiān)測所）；乙腈（色譜純）、正己烷（色譜純）、氯化鈉（優(yōu)級純），上海安普；無水硫酸鈉（分析純），天津化工。

Trace1300-ISQ7000 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，賽默飛；IKA 混勻器；N-EVAP111 氮吹儀；80-1 電動離心機。

1.2 實驗方法

1.2.1 樣品提取

準確稱取勻漿好的樣品5 g，于50 mL 具塞離心管中，加2 g 氯化鈉，渦旋混勻，加10 mL 乙腈震蕩提取30 min，加無水硫酸鈉8 g，渦旋混勻1 min，4 000 r/min，離心5 min，取上清液于離心管中，加10 mL 乙腈重提一遍。

1.2.2 QuEChERS 凈化

將上述乙腈提取樣品的合并的10 mL 提取液轉(zhuǎn)移至50 mL 離心管中，加入1.5 g 無水硫酸鈉和0.5 g 的PSA 粉末，渦旋后5 000 r/min 離心2 min。取上清液用氮吹至近干，之后加1 mL 正己烷混勻，過有機膜，上機用GC-MS 分析。

1.2.3 氣相色譜-質(zhì)譜條件

（1）色譜條件。進樣口溫度：290 ℃；不分流進樣；進樣體積：1 L；載氣（高純氦氣）流速：1 mL/min；程序升溫：初始溫度60 ℃（保持1 min），以25 ℃/min升至150 ℃保 持（1 min），再以15 ℃/min 升至290 ℃。

（2）質(zhì)譜條件。傳輸線溫度：280 ℃；離子源溫度250 ℃；電離方式：EI；電離能量：70 eV；采集方法設(shè)置：SIM 模式和SCAN 模式；溶劑延遲：6 min。

1.2.4 標(biāo)準溶液的配制及標(biāo)準曲線的繪制

（1）農(nóng)藥單一標(biāo)準中間液的配制。吸取1 mL 標(biāo)準溶液于10 mL 容量瓶中，用丙酮稀釋并定容，配制成濃度為100 μg/mL 的農(nóng)藥中間液。

（2）混合農(nóng)藥標(biāo)準使用液溶液的配制。分別準確移取0.1 mL（馬拉硫磷、甲拌磷、樂果、甲基對硫磷、敵敵畏、內(nèi)吸磷）和1 mL（久效磷）單一標(biāo)準中間液于10 mL 容量瓶中，用丙酮稀釋并定容，配制成濃度為（馬拉硫磷、甲拌磷、樂果、甲基對硫磷、敵敵畏、內(nèi)吸磷）1 μg/mL，（久效磷）10 μg/mL 的農(nóng)藥標(biāo)準混合溶液，用正己烷配制標(biāo)準系列。馬拉硫磷、甲拌磷、樂果、甲基對硫磷、敵敵畏、內(nèi)吸磷濃度為0 μg/mL、0.025 μg/mL、0.050 μg/mL、0.100 μg/mL、0.250 μg/mL、0.500 μg/mL、1.000 μg/mL；久效磷濃度為0 μg/mL、0.25 μg/mL、0.50 μg/mL、1.00 μg/mL、2.50 μg/mL、5.00 μg/mL、10.00 μg/mL。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準曲線線性范圍

標(biāo)準曲線線性和特征離子見表1。

2.2 SIM 和SCAN 掃描確定特征離子和出峰時間

先在50～650 范圍內(nèi)采用SCAN 模式，對0.5 μg/mL的農(nóng)藥標(biāo)準溶液進行掃描，確定每種農(nóng)藥的特征離子和保留時間，根據(jù)每種物質(zhì)的出峰順序，分別為每種化合物選擇一個定量離子，2 個定性離子，再采用SIM 模式進行檢測。根據(jù)各物質(zhì)的保留時間和離子豐度比來定性，根據(jù)各物質(zhì)定量離子的峰面積進行定量。各物質(zhì)出峰時間：馬拉硫磷12.07 min、甲拌磷10.29 min、樂果10.64 min、甲基對硫磷11.76 min、敵敵畏6.95 min、內(nèi)吸磷9.63 min、久效磷10.02 min。圖1 為SIM 掃描下各物質(zhì)的出峰時間。

圖1 SIM 掃描下各物質(zhì)的出峰時間

2.3 加標(biāo)回收和精密度實驗

本實驗采用外標(biāo)法對農(nóng)藥進行定量測定，準確稱取9 個平行樣品作為加標(biāo)樣品，選擇3 個加標(biāo)濃度，每1 個加標(biāo)濃度做3 個平行，稱取10 個樣品，1 個作空白試驗，9 個加入0.5 μg/mL 混標(biāo)測相對標(biāo)準偏差。該方法測定蘋果中7 種農(nóng)藥組分在3 個水平上的回收率均在74.2%～102.4%，相對標(biāo)準偏差（RSD）在2.1%～11.5%，證明該檢測技術(shù)有良好的準確度、精密度和重復(fù)性。

3 結(jié)論

建立QuEChERS-GC-MS 法測定蘋果中7 種有機磷農(nóng)藥殘留的快速檢測分析方法，該方法具有經(jīng)濟、快速靈敏和足夠精確等優(yōu)勢；線性關(guān)系良好、加標(biāo)回收率均在74.2%～102.4%，9 個加標(biāo)樣品回收率的相對標(biāo)準偏差在2.1%～11.5%，與氣相色譜農(nóng)藥殘留檢測方法比，其具有提取效率高、溶劑用量少、操作簡單等優(yōu)勢，能滿足蘋果中有機磷農(nóng)藥殘留的檢測要求。