時(shí)巖 臧艷靜 王素玉 劉樹理

急性腦梗死占所有腦卒中的87%，是腦血供突然中斷后導(dǎo)致的腦組織壞死，常伴有免疫炎癥和氧化應(yīng)激損傷、血管通透性增高和腦水腫等繼發(fā)性病變［1］。急性腦梗死后1年內(nèi)的死亡及殘疾率達(dá)45%，特別對于老年病人，預(yù)后更差［2］。深入分析急性腦梗死的發(fā)病機(jī)制，并尋找潛在的生物學(xué)標(biāo)志物，對改善病人預(yù)后有重要意義。越來越多的研究顯示，炎癥標(biāo)志物可能是急性腦梗死的生物學(xué)標(biāo)志物［3?4］。OX40是腫瘤壞死因子超家族成員之一，在B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞等免疫細(xì)胞中表達(dá)［5］。OX40及OX40配體（OX40 ligand，OX40L）是免疫應(yīng)答中重要的協(xié)同刺激分子，在免疫性疾病、哮喘［6?7］、腦出血［6］和癌癥［8］等疾病中表達(dá)增高。OX40和OX40L在急性腦梗死中的作用既往少有報(bào)道。本研究旨在分析OX40、OX40L與老年腦梗死病人神經(jīng)功能缺損及預(yù)后的關(guān)系，為臨床診治提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選取2018～2019年本院收治的146例老年急性腦梗死病人為研究對象（觀察組），其中男91例，女55例；年齡60～86歲，平均（72.87±8.24）歲；BMI為25.11±2.09；TOAST分型大動(dòng)脈粥樣硬化54例、心源性栓塞48例、小動(dòng)脈閉塞44例；有吸煙史43例，飲酒史34例，房顫史41例，高血壓史67例，糖尿病史52例，冠心病史58例。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南2018》診斷標(biāo)準(zhǔn)［9］；（2）年齡≥60歲；（3）病例資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）入組前1個(gè)月內(nèi)服用瑞舒伐他??；（2）合并急慢性感染性疾病；（3）出血性腦卒中；（4）腫瘤性疾?。唬?）免疫性疾病。另選取同期在本院體檢的50例健康老年人為對照組，其中男38例，女12例；年齡60～80歲，平均（70.12±12.73）歲；BMI為24.17±3.78；高血壓史14例，吸煙史9例，糖尿病史11例，飲酒史7例。2組年齡、性別、BMI、高血壓史、糖尿病史、吸煙史和飲酒史比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有受試者均簽署知情同意書。

1.2 神經(jīng)功能缺損評價(jià)方法 入院時(shí)采用NIHSS對老年急性腦梗死病人進(jìn)行評價(jià)，該量表總分為42分，評分4～7分為輕度缺損，8～14分為中度缺損，≥15分為重度缺損［10］。

1.3 預(yù)后評價(jià) 出院3個(gè)月時(shí)，采用改良Rankin量表（mRS）對老年腦梗死病人的預(yù)后進(jìn)行評價(jià)，mRS評分0～2分為預(yù)后良好，3～6分為預(yù)后不良［11］。

1.4 血清OX40和OX40L檢測 入院時(shí)采集所有研究對象肘靜脈血3 mL，2500 r／min離心15 min后收集血清。采用ELISA法檢測血清OX40和OX40L表達(dá)水平，試劑盒均購于上海科順生物科技有限公司，操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，2組間比較采用t檢驗(yàn)；多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD?t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用頻數(shù)和百分比表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；血清OX40、OX40L與NIHSS評分的相關(guān)性用Pearson相關(guān)系數(shù)描述；繪制ROC曲線分析血清OX40和OX40L預(yù)測老年急性腦梗死病人預(yù)后的價(jià)值，計(jì)算AUC、靈敏度和特異度。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清OX40和OX40L比較 觀察組血清OX40、OX40L水平分別為（76.12±12.13）pg／mL和（84.02±13.01）pg／mL，均高于對照組。神經(jīng)功能輕度缺損組、中度缺損組、重度缺損組血清OX40和OX40L水平均高于對照組（P＜0.05），且病情越重，OX40和OX40L水平越高（P＜0.05），見表1。

表1 2組血清OX40和OX40L水平比較（±s，pg／mL）

表1 2組血清OX40和OX40L水平比較（±s，pg／mL）

注：與對照組比較，?P＜0.05；與輕度缺損組比較，＃P＜0.05；與中度缺損組比較，△P＜0.05

組別 OX40 OX40L對照組（n＝50） 34.78±9.03 42.09±6.85輕度缺損組（n＝32） 63.09±12.02? 73.09±8.45?中度缺損組（n＝72） 73.23±6.34?＃ 80.34±6.03?＃重度缺損組（n＝42） 87.09±8.64?＃△102.89±20.12?＃△

2.2 血清OX40、OX40L與神經(jīng)功能缺損的關(guān)系 相關(guān)分析顯示，NIHSS評分與OX40、OX40L均呈正相關(guān)（r分別為0.578和0.701，P＜0.01）。

2.3 血清OX40、OX40L與預(yù)后的關(guān)系 預(yù)后不良組有49例病人，其血清OX40、OX40L蛋白表達(dá)水平均高于預(yù)后良好組（P＜0.01），見表2。單因素及多因素Logistic分析結(jié)果均提示，OX40和OX40L是老年急性腦梗死病人預(yù)后的獨(dú)立影響因素，見表3。ROC曲線分析結(jié)果顯示，OX40、OX40L預(yù)測病人預(yù)后的AUC分別為0.793和0.854，二者聯(lián)合檢測可將AUC提高至0.914，見表4。

表2 不同預(yù)后組血清OX40和OX40L水平比較（±s，pg／mL）

表2 不同預(yù)后組血清OX40和OX40L水平比較（±s，pg／mL）

注：與預(yù)后良好組比較，??P＜0.01

組別 OX40 OX40L預(yù)后良好組（n＝97） 68.34±10.10 76.20±17.37預(yù)后不良組（n＝49） 84.03±13.87?? 92.76±22.14??

表3 預(yù)后影響因素的單因素和多因素分析

表4 血清OX40、OX40L預(yù)測臨床預(yù)后的效能分析

3 討論

腦梗死發(fā)生后，組織和外周血炎癥因子發(fā)生變化，炎癥因子可能有助于急性腦梗死預(yù)后的判斷［12］。OX40及其配體在免疫炎癥損傷中起重要作用，本研究旨在分析OX40、OX40L與神經(jīng)功能缺損的關(guān)系及其預(yù)測急性腦梗死病人預(yù)后的價(jià)值。

T細(xì)胞是免疫應(yīng)答過程中的重要細(xì)胞，具有免疫監(jiān)視作用［13］。OX40和OX40L是一對重要的共刺激分子，能夠?yàn)門細(xì)胞活化提供刺激信號。OX40主要表達(dá)于活化的T細(xì)胞表面，而OX40L主要表達(dá)于抗原提呈細(xì)胞上，OX40／OX40L信號通路在T細(xì)胞增殖、活化和凋亡中起到重要作用，有助于放大自身免疫反應(yīng)，進(jìn)而影響疾病的發(fā)生和發(fā)展［14］。動(dòng)脈粥樣硬化是腦梗死發(fā)生的主要原因，有研究發(fā)現(xiàn)，OX40L與動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)［15］。本研究結(jié)果顯示，急性腦梗死病人血清中OX40和OX40L表達(dá)水平明顯高于健康人，提示OX40和OX40L可能參與了急性腦梗死的發(fā)生。另外，重度缺損組血清OX40、OX40L水平均高于輕度缺損組和中度缺損組，且相關(guān)分析提示NIHSS評分與OX40、OX40L水平呈正相關(guān)，說明OX40和OX40L與急性腦梗死病人的神經(jīng)功能缺損嚴(yán)重程度有關(guān)。

OX40和OX40L可能是疾病預(yù)后的評價(jià)指標(biāo)，有研究發(fā)現(xiàn)，OX40和OX40L高表達(dá)與進(jìn)展期肺腺癌及非小細(xì)胞肺癌病人的不良生存預(yù)后有關(guān)［6，16］。本研究結(jié)果顯示，預(yù)后不良組血清OX40、OX40L水平均高于預(yù)后良好組，OX40、OX40L預(yù)測病人預(yù)后的AUC分別為0.793和0.854，說明OX40和OX40L對急性腦梗死病人的臨床預(yù)后有一定早期預(yù)測價(jià)值。

綜上所述，老年急性腦梗死病人血清OX40、OX40L水平明顯高于健康人，OX40和OX40L與神經(jīng)功能缺損嚴(yán)重程度有關(guān)，并且有助于早期預(yù)測病人的臨床預(yù)后。本研究也存在一些局限性，例如未檢測病人血清OX40、OX40L水平的動(dòng)態(tài)變化，其表達(dá)特征在未來需要進(jìn)一步分析。OX40／OX40L在急性腦梗死中的具體作用機(jī)制也需要深入探討。