倪珂 回佳印 閆富全

摘要：目的：分析缺血性腦卒中后抑郁患者血清Pannexin-1水平變化及特點(diǎn)，明確血清Pannexin-1在缺血性腦卒中后抑郁臨床診療中的價(jià)值，為缺血性腦卒中后抑郁臨床診療提供新的思路和新的方向。方法：選取2019年1月-2021年10月我院收治的200例缺血性腦卒中后抑郁患者和50名健康體檢者為研究對(duì)象，根據(jù)HAMD評(píng)分將PSD患者分為輕度抑郁組、中度抑郁組、重度抑郁組，比較各組病人血清Pannexin-1含量，繪制ROC曲線評(píng)估Pannexin-1對(duì)PSD的診斷價(jià)值。結(jié)果：兩組研究對(duì)象的基線資料無(wú)差異;病例組血清Pannexin-1水平5.17±1.52 mg/ml，顯著高于對(duì)照組（P<0.05）;不同PSD患者血清Pannexin-1水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），Pannexin-1水平與抑郁嚴(yán)重性有正相關(guān)關(guān)系;血清Pannexin-1對(duì)PSD患者有診斷價(jià)值，AUC為0.979，靈敏度、特異性分別為91.50%、96.00%。結(jié)論：血清Pannexin-1表達(dá)上調(diào)參與了PSD發(fā)病，與患者病情嚴(yán)重性密切相關(guān)，且該指標(biāo)檢測(cè)具有無(wú)創(chuàng)、簡(jiǎn)便快捷等特點(diǎn)，早期檢測(cè)有望成為輔助判斷PSD病情的重要生化指標(biāo)。

關(guān)鍵詞：缺血性腦卒中;卒中后抑郁;Pannexin-1;中樞神經(jīng)系統(tǒng)

Abstract Objective： To analyze the changes and characteristics of serum Pannexin-1 levels in patients with post-ischemic stroke depression，and to clarify the value of serum Pannexin-1 in the clinical diagnosis and treatment of post-ischemic stroke depression，for the clinical diagnosis and treatment of post-ischemic stroke depression Provide new ideas and new directions. Methods： 200 cases of post-ischemic stroke depression patients and 50 healthy subjects who were admitted to our hospital from January 2019 to October 2021 were selected as the research objects. According to the HAMD score，the PSD patients were divided into mild depression group and moderate depression group. In the severely depressed group and the severely depressed group，the serum levels of Pannexin-1 in each group were compared，and the ROC curve was drawn to evaluate the diagnostic value of Pannexin-1 for PSD. Results： There was no difference in the baseline data of the two groups of subjects; the serum Pannexin-1 level of the case group was 5.17±1.52 mg/ml，which was significantly higher than that of the control group （P<0.05）; the difference of the serum Pannexin-1 level of patients with different PSD was statistically significant （P<0.05），Pannexin-1 level is positively correlated with depression severity; serum Pannexin-1 has diagnostic value for patients with PSD，AUC is 0.979，sensitivity and specificity are 91.50% and 96.00%，respectively. Conclusion： The up-regulation of serum Pannexin-1 expression is involved in the pathogenesis of PSD and is closely related to the severity of the patient's condition. The detection of this indicator is noninvasive，simple and fast. Early detection is expected to be an important biochemical indicator to assist in the diagnosis of PSD.

Key words：Ischemic stroke; post-stroke depression; Pannesin-1; central nervous system

【中圖分類號(hào)】R255.2?【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A?【文章編號(hào)】1673-9026（2021）13-02

急性缺血性腦卒中（acute ischemic stroke，AIS） 是各種原因?qū)е履X動(dòng)脈供血嚴(yán)重障礙甚至中斷，繼而引起腦組織缺血、缺氧性壞死，從而出現(xiàn)相應(yīng)神經(jīng)功能缺失的一組急性腦血管病，在全部腦卒中約占70%，是臨床常見(jiàn)的神經(jīng)系統(tǒng)多發(fā)病和常見(jiàn)病[1]。腦卒中后抑郁（post-stroke depression，PSD）是導(dǎo)致不良預(yù)后的主要因素[2-4]。臨床病人因病致殘或致死風(fēng)險(xiǎn)極高，及早預(yù)判病情或預(yù)后可為臨床醫(yī)師盡早開(kāi)展[5]。Pannexin-1（Panx-1）屬于脊椎動(dòng)物跨膜通道蛋白家族，其與無(wú)脊椎動(dòng)物縫隙連接蛋白（innexins）具有同源性，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中大量表達(dá)，參與了細(xì)胞對(duì)多種病理?yè)p傷的反應(yīng)[6-8]。本研究旨在分析缺血性腦卒中后抑郁患者血清Pannexin-1水平變化及特點(diǎn)，明確血清Pannexin-1在缺血性腦卒中后抑郁臨床診療中的價(jià)值，為缺血性腦卒中后抑郁臨床診療提供新的思路和新的方向。

1資料與方法

1.1病例選取及分組

選取2019年1月-2021年10月我院收治的200例缺血性腦卒中后抑郁（PSD）患者。納入標(biāo)準(zhǔn)符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)病學(xué)分會(huì)腦血管病學(xué)組制定的《 中國(guó)急性缺血性腦卒中診治指南（2014 版） 》、《中國(guó)精神疾病分類方案與診斷標(biāo)準(zhǔn)》第3版（CCMD-3）：①入院時(shí)典型臨床癥狀，如眩暈、頭痛、頭昏、惡心嘔吐等主觀癥狀，肢體不同程度偏癱、步態(tài)不穩(wěn)等軀體癥狀，吞咽困難、中樞性面癱和舌癱等神經(jīng)癥狀，并經(jīng)腦部CT或MRI、動(dòng)脈血管造影等檢查確診為AIS;②首次發(fā)病且發(fā)病至入院時(shí)間<24h;③患者年齡>18歲;④患者存活時(shí)間>3m者;⑤患者無(wú)重要臨床信息遺漏;⑥HAMD評(píng)分≥8分。排除標(biāo)準(zhǔn)： ①存在感覺(jué)、認(rèn)知功能障礙者;②既往有腦卒中史者;③合并惡性腫瘤者;④心臟功能不全的患者，肝、腎功能障礙的患者;⑤妊娠期、哺乳期的患者;⑥伴有血液、免疫等系統(tǒng)疾病者;⑦其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者。依據(jù)入院后HAMD評(píng)分分為輕度抑郁（HAMD評(píng)分8-16分）、中度抑郁（HAMD評(píng)分17-23分）、重度抑郁（HAMD評(píng)分≥24分）;選取行健康體檢的50例人群為對(duì)照組。

1.2資料收集

收集患者年齡、性別、血壓、BMI、吸煙史、飲酒史等基線資料。吸煙史定義目前吸煙或既往有吸煙史;飲酒史定義為每日飲酒精量>20g。

1.3實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)

所有患者于入院24h內(nèi)，清晨空腹抽取靜脈血5ml，完成相關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢查，詳細(xì)記錄空腹血糖（FBG）、糖化血紅蛋白（HbA1c）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）等指標(biāo)數(shù)據(jù)。

1.4血清Pannexin-1檢測(cè)

于入院24h內(nèi)抽取患者靜脈血，常規(guī)分離血清，以ELISA法測(cè)定血清Pannexin-1水平。實(shí)驗(yàn)操作嚴(yán)格按ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行（試劑盒購(gòu)自美國(guó)Sigma 公司）。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS20.0軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料用百分?jǐn)?shù)表示，組間比較用X2檢驗(yàn);計(jì)量資料用均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩組獨(dú)立樣本組間比較用t檢驗(yàn)，多組獨(dú)立樣本組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。繪制受試工作特征曲線（ROC曲線）評(píng)估Pannexin-1對(duì)PSD的診斷價(jià)值，計(jì)算曲線下面積（AUC）、敏感性、特異性及最佳截?cái)嘀怠<0.05代表差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 兩組研究對(duì)象的一般情況

表1為兩組研究對(duì)象的基線資料，兩組研究對(duì)象在年齡、性別、BMI、吸煙史、飲酒史、空腹血糖、糖化血紅蛋白、總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白等指標(biāo)數(shù)據(jù)均無(wú)差異（p>0.05），具有可比性。

2.2病例組與對(duì)照組血清Pannexin-1水平比較

表2為病例組與對(duì)照組血清Pannexin-1水平比較，經(jīng)統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，病例組血清Pannexin-1水平顯著高于對(duì)照組（t=14.076，P<0.05）。

2.3不同PSD患者血清Pannexin-1水平比較

不同腦卒中后抑郁患者血清Pannexin-1水平經(jīng)單因素方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=84.056，P<0.05），中度抑郁組、重度抑郁組血清Pannexin-1水平高于輕度抑郁組，且重度抑郁組高于中度抑郁組（數(shù)據(jù)見(jiàn)表3）。

2.4血清Pannexin-1對(duì)PSD患者的診斷價(jià)值

繪制ROC曲線，結(jié)果顯示血清Pannexin-1對(duì)PSD患者有診斷價(jià)值，AUC為0.979（95%CI0.964～0.994，P=0.000），截?cái)嘀禐?.255mg/ml，靈敏度、特異性分別為91.50%、96.00%。

3討論

腦卒中是嚴(yán)重影響人們健康的全球重大公共衛(wèi)生問(wèn)題，報(bào)道顯示，全球腦卒中每年增加約1500萬(wàn)例，我國(guó)占其中1/6，將近250萬(wàn)例[9]。流行病學(xué)研究顯示，腦卒中在我國(guó)發(fā)病率約為110～180/10萬(wàn)，年死亡率約80～120/10萬(wàn)，并呈北高南低趨勢(shì)。黑龍江省是我國(guó)人口大省，但卒中防治水平與經(jīng)濟(jì)發(fā)展水平并不匹配，防控形勢(shì)異常嚴(yán)峻。腦卒中后抑郁（post-stroke depression，PSD）是指缺血性卒中發(fā)生后兩年內(nèi)出現(xiàn)的一種情感障礙性疾病，主要表現(xiàn)為情緒低落、興趣減退、思維功能遲緩，甚至有自殺傾向，其發(fā)病機(jī)制與炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)、缺氧、缺血導(dǎo)致的腦組織損傷有關(guān)[9]。腦卒中后抑郁是導(dǎo)致不良預(yù)后的主要因素。

PSD與卒中損傷中樞神經(jīng)系統(tǒng)情感部位相關(guān)[12-13]。Pannexins屬于脊椎動(dòng)物跨膜通道蛋白家族 ，其與無(wú)脊椎動(dòng)物縫隙連接蛋白（innexins）具有同源性。Pannexin-1在脊椎動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)中大量表達(dá)，離子及大分子物質(zhì)可通過(guò)Pannexin-1通道跨膜流動(dòng)，導(dǎo)致細(xì)胞功能變化[14-15]。研究顯示，細(xì)胞膜機(jī)械拉伸刺激、細(xì)胞外K+高濃度、膜電位改變、細(xì)胞外pH值改變等內(nèi)環(huán)境紊亂或細(xì)胞狀態(tài)改變激活Pannexin-1通道并致其打開(kāi)，進(jìn)而參與多種疾病的發(fā)生發(fā)展[16]。劉美霞[17]等對(duì)比缺血性腦卒中與健康體檢者血清Pannexin-1水平，發(fā)現(xiàn)缺血性腦卒中組不同時(shí)間點(diǎn)血清Pannexin-1均高于對(duì)照組，不同腦梗死體積患者血清Pannexin-1水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，認(rèn)為缺血性腦卒中患者血清Pannexin-1水平與病情嚴(yán)重程度，神經(jīng)損傷程度及預(yù)后關(guān)系密切。同樣辛家厚[18]等研究也發(fā)現(xiàn)血清Pannexin1在AIS患者中呈高表達(dá)水平，并與病情嚴(yán)重性及預(yù)后密切相關(guān)，早期檢測(cè)可作為臨床輔助判斷病情嚴(yán)重性、預(yù)測(cè)預(yù)后不良的生化指標(biāo)。

本研究結(jié)果顯示，PSD患者血清Pannexin-1水平較健康體檢者明顯升高，推測(cè)Pannexin-1可能參與了PSD的發(fā)病過(guò)程，其機(jī)制可能為：①腦組織細(xì)胞因缺血受損時(shí)，在海馬錐體神經(jīng)元中，NMDA受體可以通過(guò)Src家族激酶介導(dǎo)的方式激活Pannexin-1，Src家族激酶在PANX1磷酸化激活中發(fā)揮作用，導(dǎo)致細(xì)胞外Ca+內(nèi)流和細(xì)胞內(nèi)ATP釋放，引起細(xì)胞毒性并致神經(jīng)細(xì)胞死亡;②缺血性腦梗死神經(jīng)元細(xì)胞釋放大量炎性因子活化星形膠質(zhì)細(xì)胞，引起細(xì)胞外K+濃度升高，導(dǎo)致Pannexin-1通道由關(guān)閉狀態(tài)打開(kāi)，使半胱氨酸蛋白酶-1活化而加重炎癥反應(yīng)，反過(guò)來(lái)又加重PSD病情;③Pannexin-1通道打開(kāi)，caspase3或者caspase7兩種酶作用于Pannexin-1的C端酶切位點(diǎn)，離子通道開(kāi)放后釋放核苷酸，從而吸引巨噬細(xì)胞來(lái)吞噬凋亡的細(xì)胞[19]。

研究還發(fā)現(xiàn)，隨著神經(jīng)功能缺損程度加重，血清Pannexin-1水平呈逐漸升高趨勢(shì)，提示血清Pannexin-1水平與HAMD評(píng)分相關(guān)性也進(jìn)一步證實(shí)?？赡艿脑騊SD患者病情越嚴(yán)重，細(xì)胞內(nèi)Ca+超載以及ATP釋放越顯著，同時(shí)炎癥反應(yīng)也越嚴(yán)重，腦缺血組織中大量Pannexin-1蛋白表達(dá)并釋放入血。該結(jié)果提示早期檢測(cè)血清Pannexin-1，可輔助臨床早期評(píng)估PSD患者病情嚴(yán)重性，為臨床制定針對(duì)性治療方案提供幫助。

繪制ROC曲線，結(jié)果顯示，血清Pannexin-1含量其對(duì)PSD患者的診斷有預(yù)測(cè)價(jià)值，AUC為0.979，靈敏度、特異性分別為91.50%、96.00%。表明臨床早期檢測(cè)血清Pannexin-1可診斷PSD患者。

綜上所述，血清Pannexin-1表達(dá)上調(diào)參與了PSD發(fā)病，與患者病情嚴(yán)重性密切相關(guān)，且該指標(biāo)檢測(cè)具有無(wú)創(chuàng)、簡(jiǎn)便快捷等特點(diǎn)，早期檢測(cè)有望成為輔助判斷PSD病情的重要生化指標(biāo)。

參考文獻(xiàn)：

[1] 張金枝，王麗娟，張瀟. 急性缺血性腦卒中患者血清Sestrin2水平與病情嚴(yán)重程度及預(yù)后的相關(guān)性分析[J]. 河北醫(yī)學(xué)，2019，25（2）： 259-262.

[2] 周榮，吳志敏，林梅瑟，等. 腦卒中后抑郁的研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育，2017，15（19）： 3.

[3] 馮建偉，張海生，邊雙義，等. 茯苓竹茹湯聯(lián)合鹽酸舍曲林治療腦卒中后抑郁狀態(tài)臨床觀察[J]. 陜西中醫(yī)，2017，08： 5-6.

[4] 孫娜. 抗抑郁治療對(duì)腦卒中后抑郁患者腦血流自動(dòng)調(diào)節(jié)功能的影響研究[C]. 2020.

[5] 馬遠(yuǎn)新，孫景存. 醒腦安神解郁湯治療腦卒中后抑郁60例療效觀察[J]. 四川中醫(yī)，2016（1期）： 141-143.

[6] 劉號(hào)峰，董淑英，苑敏，等. Pannexin1，2在小鼠睪丸癌I-10細(xì)胞和睪丸間質(zhì)細(xì)胞TM3中的表達(dá)及通道功能調(diào)控[J]. 中華男科學(xué)雜志，2018，24（9）： 6.

[7] 李盛龍，王喆，張曉晶，等. Pannexin1通道蛋白對(duì)微張力刺激下骨髓間質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的影響[J]. 中華骨科雜志，2017，37（1）： 44-51.

[8] Sáez P J，Vargas P，Shoji K，et al. ATP promotes the fast migration of dendritic cells through the activity of pannexin 1 channels and P2X7 receptors[J]. Science Signaling，2017，10（506）： h7107.

[9] 劉小曼，臧福才，郎明非，等. Pannexin-1在急性缺血性腦卒中中的研究進(jìn)展[J]. 卒中與神經(jīng)疾病，2020，27（4）： 542-545.

[10] 汪昆. 鹽酸帕羅西汀對(duì)治療腦卒中后抑郁的臨床作用研究[J]. 陜西醫(yī)學(xué)雜志，2016（4）： 2.

[11] 劉淑閣. 認(rèn)知護(hù)理干預(yù)對(duì)腦卒中后抑郁癥患者神經(jīng)和認(rèn)知功能的影響[J]. 世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘，2016.

[12] 宋建申，梁櫻. Pannexin1在慢性神經(jīng)病理性疼痛中的作用研究進(jìn)展[J]. 國(guó)際麻醉學(xué)與復(fù)蘇雜志，2021，42（8）： 4.

[13] 溫玉環(huán)，張?jiān)?，朱大衛(wèi)，等. 抑制Pannexin-1在三叉神經(jīng)節(jié)中的表達(dá)可緩解三叉神經(jīng)痛[J]. 安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2019，v.54（09）： 64-67.

[14] Weilinger N L，Lohman A W，Rakai B D，et al. Metabotropic NMDA receptor signaling couples Src family kinases to pannexin-1 during excitotoxicity[J]. Nature Neuroscience，2016.

[15] Wei L，Sheng H，Chen L，et al. Effect of pannexin-1 on the release of glutamate and cytokines in astrocytes[J]. Journal of Clinical Neuroscience，2016.

[16] Dong F，Yang X J，Jiang T B，et al. Ischemia triggered ATP release through Pannexin-1 channel by myocardial cells activates sympathetic fibers[J]. Microvascular Research，2016，104： 32-37.

[17] 劉美霞，周龍. 缺血性腦卒中患者血清Pannexin1水平及其臨床意義[J]. 中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2020，v.30（08）： 116-119.

[18] 辛家厚，楊玲玲，俞明明，等. 急性缺血性腦卒中患者血清Pannexin1水平變化及其與病情嚴(yán)重程度和預(yù)后的關(guān)系[J]. 中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志，2021，38（3）： 4.

[19] Cheung W Y，F(xiàn)ritton J C，Morgan S A，et al. Pannexin-1 and P2X7-Receptor Are Required for Apoptotic Osteocytes in Fatigued Bone to Trigger RANKL Production in Neighboring Bystander Osteocytes[J]. Journal of Bone and Mineral Research，2016.