吳勇東，王元彬，曾 慧

廣東省深圳市康寧醫(yī)院/廣東省深圳市精神衛(wèi)生中心：1.檢驗(yàn)科；2.精神科，廣東深圳 518000

目前，檢測肌鈣蛋白I(cTnI)的方法有多種，其中微粒子化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)因其高特異度、高靈敏度、高準(zhǔn)確性、高穩(wěn)定性而被廣泛使用。工作中常常遇到肌鈣蛋白測定值與患者臨床表現(xiàn)、心電圖結(jié)果甚至臨床診斷不相符的情況，其主要由檢測過程中的干擾因素、生理因素及非急性冠狀動脈綜合癥因素3個方面所致[1 ]。本文就微粒子化學(xué)發(fā)光法檢測cTnI結(jié)果因受非特異反應(yīng)干擾出現(xiàn)假性增高的情況進(jìn)行分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 患者，女，21歲，因雙相情感障礙收入本院治療。既往史：否認(rèn)肝炎、心臟病史，否認(rèn)高血壓、糖尿病等慢性病史，否認(rèn)手術(shù)、創(chuàng)傷、輸血史。無化學(xué)性物質(zhì)、放射性物質(zhì)、有毒物質(zhì)接觸史，無吸毒史，無吸煙、飲酒史，無冶游史。無婚育史。否認(rèn)家族性遺傳病、傳染病史。相關(guān)檢查：腹部彩超示，(1)肝回聲不均，考慮脂肪肝；(2)膽囊、膽管、脾臟、胰腺未見明顯異常聲像。因胸痛查心電圖提示“竇性心律、T波異常?！?/p>

1.2儀器與試劑 微粒子化學(xué)發(fā)光法采用進(jìn)口全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)及其原廠配套的試劑盒、定標(biāo)液。生化指標(biāo)檢測采用日立全自動生化分析儀7600，英科新創(chuàng)試劑盒及配套的定標(biāo)液，美康生物試劑盒及配套的定標(biāo)液。質(zhì)控品：均采用英國朗道質(zhì)控品。所用試劑、定標(biāo)液及質(zhì)控品均在有效期內(nèi)使用。

1.3方法 真空采血管按要求定量采血檢測血常規(guī)、生化各項(xiàng)指標(biāo)、心臟標(biāo)志物及傳染病相關(guān)指標(biāo)，采血后立即送檢，標(biāo)本接收后經(jīng)3 500 r/min，離心5 min取血清檢測，無溶血、乳糜及黃疸等。開機(jī)質(zhì)控在控，批量進(jìn)行標(biāo)本檢測。

2 結(jié) 果

微粒子化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)檢測心臟標(biāo)志物兩項(xiàng)，cTnI結(jié)果為0.57 ng/mL(參考范圍<0.04 ng/mL),肌紅蛋白(MYO)結(jié)果為7.7 ng/mL(參考范圍<65.8 ng/mL),cTnI結(jié)果已超過廣東省深圳市康寧醫(yī)院制訂的危急值(>0.10 ng/mL)。日立生化分析儀7600檢測生化各項(xiàng)指標(biāo)，其中心肌酶3項(xiàng)，包括肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶-MB(CK-MB)、乳酸脫氫酶(LDH)均在正常參考范圍內(nèi)，其他結(jié)果均無明顯異常。分離血清，重新離心，復(fù)查cTnI結(jié)果為0.58 ng/mL,MYO結(jié)果為7.8 ng/mL，兩次結(jié)果無明顯變化。與臨床溝通后，6 h后重新送檢患者心臟標(biāo)志物兩項(xiàng)，檢測cTnI結(jié)果為0.56 ng/mL,MYO結(jié)果為8.7 ng/mL，結(jié)果均無明顯變化。綜合患者臨床表現(xiàn)、后期24 h動態(tài)心電圖正常、心肌酶3項(xiàng)和MYO結(jié)果均不支持患者心肌炎、早期心肌損傷的診斷。為了明確診斷，將患者標(biāo)本外送至其他實(shí)驗(yàn)室檢測cTnI，結(jié)果為<0.01 ng/mL(免疫熒光法，參考范圍：<0.01 ng/mL)，與患者臨床實(shí)際情況相符。綜合分析，本實(shí)驗(yàn)室微粒子化學(xué)發(fā)光免疫分析檢測系統(tǒng)檢測cTnI結(jié)果為假性增高。

在試劑廠家協(xié)助下，將患者標(biāo)本寄送至試劑廠家處理機(jī)構(gòu)進(jìn)行調(diào)查實(shí)驗(yàn)。該機(jī)構(gòu)對標(biāo)本在檢測cTnI過程中進(jìn)行干擾實(shí)驗(yàn)，在未添加阻斷劑的情況下，cTnI測試結(jié)果確認(rèn)顯示是高值。在測試中進(jìn)行如下阻斷劑添加的實(shí)驗(yàn)，阻斷劑包括堿性磷酸酶突變蛋白(AP-Mutein)、嗜異性抗體阻斷劑(HBR-1)、小鼠免疫球蛋白G(Mouse IgG)和山羊免疫球蛋白G(Goat IgG)等。當(dāng)標(biāo)本被添加了AP-Mutein、Mouse IgG 和Goat IgG后，所測得的cTnI水平與未添加的時候相比幾乎沒有下降，而添加了HBR-1的標(biāo)本的測試結(jié)果則下降了許多，干擾實(shí)驗(yàn)證實(shí)標(biāo)本中存在人源性干擾。該患者標(biāo)本cTnI檢測受到嗜異性抗體的干擾導(dǎo)致結(jié)果假性增高，檢測結(jié)果應(yīng)為正常，與患者臨床表現(xiàn)及其他相關(guān)檢查結(jié)果一致。

3 討 論

急性心肌梗死是冠狀動脈病變后血供急劇減少或中斷，心肌嚴(yán)重、持久缺血導(dǎo)致的急性心肌壞死，嚴(yán)重威脅患者生命，早期診斷、及時治療是降低患者病死率和改善預(yù)后的關(guān)鍵[2]。cTnI為心肌的一種特有成分，在健康人群血液中水平極低，幾乎無法被檢測到，但當(dāng)心肌受到損傷時cTnI便會在血液中得到釋放[3]。cTnI是公認(rèn)診斷急性心肌梗死的“金標(biāo)準(zhǔn)”，也是獨(dú)立于心電圖之外可用于判斷梗死灶范圍大小及預(yù)后的重要血清學(xué)指標(biāo)。因此，cTnI檢測的準(zhǔn)確性尤其重要，測定結(jié)果無論出現(xiàn)假性增高或假陰性都會影響診斷，耽誤患者的治療。

眾所周知，微粒子化學(xué)發(fā)光法基于抗原抗體反應(yīng)的原理，存在著非特異反應(yīng)干擾的可能性。經(jīng)常與動物有接觸或者使用過免疫球蛋白或免疫球蛋白碎片進(jìn)行免疫治療或診斷步驟的患者，可能會產(chǎn)生抗體，如人抗小鼠抗體，該抗體會干擾免疫測定。此外，其他的嗜異性抗體，如人抗山羊抗體，可能會存在于患者的標(biāo)本內(nèi)，正如本文cTnI檢測結(jié)果為假性增高被證實(shí)是由患者標(biāo)本內(nèi)嗜異性抗體的干擾所致。

2012年12月，本實(shí)驗(yàn)室引進(jìn)了微粒子化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)進(jìn)行心臟標(biāo)志物的檢測，偶爾會出現(xiàn)由于標(biāo)本因素造成cTnI檢測結(jié)果假性增高的情況，如標(biāo)本里含有纖維蛋白，肉眼不能發(fā)現(xiàn)，導(dǎo)致cTnI檢測結(jié)果出現(xiàn)假性增高，而檢測過程中因嗜異性抗體干擾而導(dǎo)致測定結(jié)果假性增高的情況很少見且不容易發(fā)現(xiàn)。當(dāng)心電圖無明顯異常或心電圖改變不足以診斷急性心肌梗死，且肌鈣蛋白僅略高于參考范圍上限時，可1～3 h后復(fù)查肌鈣蛋白，若相鄰兩個時間點(diǎn)的檢測值的變化<20%,可基本排除急性心肌梗死等急性心肌損傷；若變化≥20%,結(jié)合臨床表現(xiàn),可考慮非ST段抬高型心肌梗死的診斷[4]。此例患者cTnI水平明顯升高，而其他心肌酶指標(biāo)正常，心電圖結(jié)果無明顯異常，相鄰兩個時間點(diǎn)復(fù)查cTnI結(jié)果亦無明顯變化，可基本排除急性心肌梗死等急性心肌損傷。檢驗(yàn)科醫(yī)生與臨床醫(yī)生之間的溝通尤其重要，合理解釋cTnI檢測結(jié)果存在假性增高情況的不確定因素，醫(yī)生需參照該患者的整體臨床情況，包括：癥狀、病史、臨床檢查、心電圖及由其他測試所得的數(shù)據(jù)和其他相應(yīng)的信息，不應(yīng)僅憑單個cTnI測定結(jié)果就做出診斷。如有必要，可以對cTnI結(jié)果準(zhǔn)確性作進(jìn)一步驗(yàn)證或者委托其他實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行復(fù)查。因此，本實(shí)驗(yàn)室管理制度規(guī)定一旦發(fā)現(xiàn)cTnI檢測結(jié)果增高或者難以解釋的結(jié)果，應(yīng)通過分離血清，重新離心，復(fù)查標(biāo)本以排除標(biāo)本因素引起的假性增高，加強(qiáng)與臨床醫(yī)生溝通，了解患者既往史，分析患者初次胸痛發(fā)作后不同時間段cTnI檢測結(jié)果之間的變化是否跟心肌損傷后血液中cTnI的水平變化一致,對于與臨床表現(xiàn)不相符的cTnI測定結(jié)果，必須盡快將標(biāo)本送至本院坪山院區(qū)使用其他方法學(xué)儀器進(jìn)行復(fù)查，盡早發(fā)現(xiàn)并糾正假性增高的結(jié)果。