王璐，許巖

（大連市水產(chǎn)技術(shù)推廣總站，遼寧 大連 116023）

隨著社會經(jīng)濟的迅速發(fā)展，鉻及其化合物作為重要的化工原料廣泛應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)，鉻化合物的消費量每年都在增加。在生產(chǎn)過程中不可避免地產(chǎn)生大量含鉻廢水[1]。鉻含有多種價態(tài)，主要以三價和六價價態(tài)存在，其毒性與存在價態(tài)有關(guān)[2]，通常認為六價鉻的毒性比三價鉻高100 倍[3]。一方面，過量鉻進入海洋，會在海洋生物體內(nèi)聚集[4]，引起中毒或死亡，嚴重影響海洋產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，而且六價鉻對環(huán)境造成的危害具有持久性，很難消除；另一方面，過量鉻隨著食物鏈進入人體，危害人類健康[5]，損害肝腎循環(huán)，甚至嚴重損害神經(jīng)組織[6-9]，對于海洋生物體攝入量較高的沿海居民來說，風(fēng)險尤其大[10-11]。目前，六價鉻已作為水和廢水例行監(jiān)測中的一項重要指標，是第一類污染物。六價鉻的測定有多種方法，二苯碳酰二肼分光光度法因具備干擾少、操作簡單、靈敏度高、適用范圍廣和線性范圍寬等特點，被作為測定水體六價鉻的經(jīng)典方法和常用方法[12]，但方法適用范圍一般為地表水、地下水和工業(yè)廢水，不包括海水?，F(xiàn)采用二苯碳酰二肼分光光度法對海水中六價鉻含量的測定進行探討，以期為海水中六價鉻含量的測定提供技術(shù)支撐。

二苯碳酰二肼分光光度法的原理是在酸性溶液中，具有強氧化性的六價鉻會將二苯碳酰二肼氧化成為二苯縮二氨基脲，并進一步和六價鉻的還原產(chǎn)物三價鉻發(fā)生反應(yīng)，生成紫紅色絡(luò)合物，在540 nm 波長處有最大吸收，從而測定海水中六價鉻的含量。

1 研究方法

1.1 儀器與試劑

（1）儀器。上海光譜723 型可見分光光度計。

（2）試劑。硫酸（優(yōu)級純）、磷酸（優(yōu)級純）、二苯碳酰二肼（優(yōu)級純）和丙酮（優(yōu)級純）均購自天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司。測定過程中，除另有說明外，試驗中所使用的水均為超純水，所有試劑不含鉻。六價鉻單元素標準溶液［GBW（E）080257］來自中國計量科學(xué)研究院，水質(zhì)六價鉻標準樣品（GSB 07-3174-2014），質(zhì)量濃度為（0.075±0.004）mg/L，來自原環(huán)境保護部標準樣品研究院。

1.2 顯色劑配制

稱取0.2 g 二苯碳酰二肼，溶于50 mL 丙酮中，加水稀釋至100 mL，搖勻，貯存于棕色瓶，放置于冰箱中。若顏色變深，不能使用。

1.3 六價鉻含量測定

（1） 標準曲線。分別準確移取 0.0，0.1，0.2，0.5，1.0，2.0，4.0，6.0，8.0 和 10.0 mL 已 稀 釋 100倍的六價鉻單元素標準溶液于10 支50 mL 具塞比色管中，用水稀釋至標線，制備一系列濃度范圍的含六價鉻標準溶液。加入0.5 mL 硫酸溶液（1+1）和 0.5 mL 磷酸溶液（1+1），搖勻。加入 2.0 mL 顯色劑，搖勻5~10 min 后，在540 nm 波長處，分別用10 和30 mm 比色皿，以水為參比，測定吸光度（Abs），扣除空白試驗測得的吸光度后得到試驗標準曲線。

（2）樣品測試及加標回收率試驗。對六價鉻標準樣品和多份海水樣品進行測定，并選取實際樣品進行加標，加標量為 0.002，0.020 和 0.120 mg/L，重復(fù)試驗6 次，計算加標回收率。

（3）準確度、精密度和定量限。根據(jù)1.3（2）中得到的樣品測試值，與標準值進行比較，并計算相對標準偏差（RSD）。連續(xù)測定試劑空白10 次，依據(jù)測量值標準差3 倍與標準曲線斜率比值所對應(yīng)的濃度確定定量限。

（4）測定時間與穩(wěn)定性。選取1.3（1）中六價鉻標準溶液高、中、低3 個點進行連續(xù)測定，記錄吸光度值，觀察其波動情況，進一步確定標準溶液測定最佳時間和存放時長。

2 結(jié)果與討論

2.1 線性關(guān)系

10 和30 mm 比色皿測得的各六價鉻吸光度見表 1，兩組 ρ（六價鉻）為0.000~0.200 mg/L 時與吸光度均呈良好線性關(guān)系，10 mm 比色皿測得曲線方程為 y=0.614 1 x-0.000 7，r=0.999 2，30 mm 比色皿測得曲線方程為y=1.848 7 x-0.003 4，r=0.999 7。低濃度范圍內(nèi)，10 mm 比色皿測定靈敏度較低，同時最高濃度點吸光度值示數(shù)較低，考慮到海水中六價鉻含量一般較低，為方便試驗，選擇30 mm 比色皿進行測定，并利用測得的線性方程進行結(jié)果分析。

表1 六價鉻的吸光度及線性方程

2.2 準確度、精密度和定量限

按試驗方法測定了樣品，結(jié)果如表2 所示，9 份海水樣品的六價鉻質(zhì)量濃度為0.004 0~0.020 8 mg/L，均在2.1 所得的線性曲線范圍內(nèi)。所得準確度、精密度和定量限結(jié)果見表3 和表4，測定結(jié)果均在標準值范圍內(nèi)，其RSD 均不超過5%，方法定量限為0.001 3 mg/L。

表2 不同海水樣品試驗結(jié)果

表3 準確度和精密度試驗結(jié)果

表4 定量限試驗結(jié)果

2.3 回收率

回收率見表5，在樣品中加入低、中、高濃度標準源液，其整體回收率為85%~115%，3 個梯度的平均回收率分別為95%，97%和93%，在可接受范圍內(nèi)，說明試驗結(jié)果比較理想。

表5 回收率試驗結(jié)果

2.4 測定時間和穩(wěn)定性

標準曲線配置后進行連續(xù)吸光度值測定，結(jié)果如表6 所示。在標準曲線配置后15 min 內(nèi)，3個濃度均可達到最大吸光度值且比較穩(wěn)定，30 min 時高濃度標準點吸光度值略有下降，超過30 min 之后，吸光度值變化較為明顯。因此，為使試驗結(jié)果更準確，建議標準曲線在配置后15~30 min 內(nèi)完成測定，同時考慮到反應(yīng)充分性，以靜置5~10 min后測定為宜。

表6 標準測定時間和穩(wěn)定性試驗結(jié)果

3 結(jié)論

試驗表明，二苯碳酰二肼分光光度法測定海水中六價鉻含量，檢測成本低、操作簡單、準確度高、重現(xiàn)性好，此外，線性關(guān)系、定量限、精密度、準確度和回收率能夠得到保證，適用于海水中六價鉻測定，為今后對試驗條件的優(yōu)化提供了參考。