喻 莉，許益萌，楊一帆

1.西北大學(xué)附屬醫(yī)院/西安市第三醫(yī)院口腔科，陜西西安 710000；2.空軍軍醫(yī)大學(xué)附屬口腔醫(yī)院口腔正畸科，陜西西安 710032

現(xiàn)如今，種植義齒技術(shù)被臨床廣泛應(yīng)用于改善口腔功能和外觀的治療中[1]。由于細(xì)菌感染、患者自身的適應(yīng)性、種植體設(shè)計(jì)不合理等將導(dǎo)致種植體周圍炎的發(fā)生，種植體周圍炎是宿主對(duì)種植體的炎性反應(yīng)并能夠進(jìn)一步導(dǎo)致種植體脫落、周圍組織破壞、骨結(jié)合失敗，其支持骨的喪失[2-3]。種植體周圍炎與種植體周圍齦溝液(PICF)中白細(xì)胞介素(IL)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、氧化應(yīng)激指標(biāo)的變化有關(guān)[4-5]，本研究通過比較種植體周圍炎患者、健康種植體者PICF中IL-6、CRP與氧化應(yīng)激標(biāo)志物超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GP-Phx)及丙二醛(MDA)等指標(biāo)水平，探討這些指標(biāo)與牙周探診深度(PD)、菌斑指數(shù)(PLI)、齦溝出血指數(shù)(SBI)的關(guān)系，進(jìn)一步探討種植體周圍炎的發(fā)病原理，明確種植體周圍炎發(fā)生過程中的炎癥因子表達(dá)情況，為早期診斷和治療種植體周圍炎提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年10月至2020年10月西北大學(xué)附屬醫(yī)院口腔門診實(shí)施種植修復(fù)的100例(141個(gè)種植牙位)患者為研究對(duì)象，種植完成后12個(gè)月復(fù)查，其中32例(48個(gè)種植牙位)患者發(fā)生種植體周圍炎(炎癥組)、68例(93個(gè)種植牙位)患者為健康種植體(對(duì)照組)。炎癥組男20例，女12例；年齡23.0～65.0歲，平均(41.5±12.0)歲；平均體質(zhì)量指數(shù)(BMI)為(23.7±2.3)kg/m2。對(duì)照組男44例，女24例；年齡27.0～65.0歲，平均(43.0±11.6)歲；平均BMI為(23.5±2.0)kg/m2。兩組患者年齡、性別、BMI比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)患者在西北大學(xué)附屬醫(yī)院接受種植體治療；(2)種植體周圍炎的PD>3.0 mm、SBI>2.0；(3)患者接受隨訪時(shí)間至少6個(gè)月。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)有凝血功能疾病者；(2)有免疫系統(tǒng)疾病者；(3)吸煙、口腔衛(wèi)生狀況較差者；(4)有嚴(yán)重的肝、腎功能疾病者；(5)惡性腫瘤者；(6)近3個(gè)月使用抗菌藥物或非甾體類抗炎藥物者。本研究經(jīng)西北大學(xué)附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2PICF的采集及指標(biāo)檢測(cè)

1.2.1PICF的采集 將醫(yī)用濾紙剪成2 mm×10 mm的濾紙條，經(jīng)高溫、高壓滅菌后置于無菌微量離心管中，稱重后做好標(biāo)記待用。清潔口腔后，用消毒棉球隔濕，吹干牙面后等待1 min。將裁剪好的濾紙條插入PICF中，當(dāng)濾紙條遇阻力后停止，隨后取出濾紙條放入原始離心管中稱重。記錄后加入200 μL 磷酸鹽緩沖液(pH=7.4)，將離心管置于搖動(dòng)震蕩機(jī)上震蕩1 h，低溫離心，離心后取上清液并保存于-80 ℃冰箱內(nèi)待測(cè)。

1.2.2檢測(cè)指標(biāo)及方法 檢測(cè)炎癥組和對(duì)照組PICF中IL-6、CRP、SOD、MDA、GP-Phx水平。

1周內(nèi)從-80 ℃冰箱中分別取炎癥組、對(duì)照組的PICF 2 mL，先放置在-20 ℃冰箱中待測(cè)，準(zhǔn)備好標(biāo)本后檢測(cè)IL-6及CRP水平，使用電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析儀進(jìn)行檢測(cè)，操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，檢測(cè)所用試劑盒購自福建新大陸生物技術(shù)有限公司。

將凍存的離心管從-80 ℃冰箱取出，在室溫下解凍，搖晃1 h，4 ℃下離心(2 000 r/min，20 min)后取上清液，使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)標(biāo)本中SOD、MDA和GP-Phx的吸光度值，根據(jù)試劑盒說明書計(jì)算出相應(yīng)水平并記錄。

1.3牙周健康指標(biāo)檢測(cè)[6-7](1)PD測(cè)定：使用牙周探針檢查種植體和健康牙的4個(gè)位點(diǎn)的PD值，分別是近中頰側(cè)、遠(yuǎn)中頰側(cè)、近中舌側(cè)和遠(yuǎn)中舌側(cè)，使牙周探針平行于與種植體長(zhǎng)軸，并輕輕貼緊牙根減輕患者的疼痛感，再將牙周探針深入齦溝底，記錄此刻探針?biāo)究潭取?2)PLI測(cè)定：分別檢測(cè)種植體與健康牙，評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)為表面無斑點(diǎn)為0分，表面輕劃可見斑點(diǎn)為1分，肉眼可見菌斑為2分，表面有大量軟垢沉積為3分。(3)SBI測(cè)定：分別檢查種植體和健康牙的SBI值，評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)為牙周探診無出血現(xiàn)象為0分，探針處出血呈點(diǎn)狀為1分，齦溝內(nèi)成線狀出血2分，沿齦緣擴(kuò)展出血或溢出齦緣為3分。

2 結(jié) 果

2.1炎癥組和對(duì)照組的PD、PLI、SBI比較 炎癥組患者種植體的PD、PLI、SBI測(cè)定值均明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 炎癥組和對(duì)照組的PD、PLI、SBI比較

2.2炎癥組和對(duì)照組的PICF中IL-6、CRP、SOD、MDA、GP-Phx水平比較 炎癥組PICF中的IL-6、CRP水平均高于對(duì)照組(P<0.05)，SOD、GP-Phx水平均低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 炎癥組和對(duì)照組的PICF中IL-6、CRP、SOD、MDA、GP-Phx水平比較

2.3相關(guān)性分析 炎癥組患者種植體的PLI、PD、SBI與PICF中IL-6、CRP水平均呈正相關(guān)(P<0.05)，與PICF中SOD、GP-Phx水平呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)，見表3。

表3 相關(guān)性分析結(jié)果

3 討 論

口腔種植體的應(yīng)用一方面可以使人們口腔更為美觀，另一方面可以使患者的口腔功能得到改善。然而臨床上種植體的成功率不甚理想，種植體周圍炎往往是由細(xì)菌感染直接導(dǎo)致的[8]。目前臨床上主要通過兩種方法獲得患者種植體周圍組織情況，一是臨床醫(yī)師肉眼直接觀察，另一個(gè)是采用影像學(xué)來檢查?？谇会t(yī)生的主觀判斷不夠科學(xué)，容易造成誤診、漏診，缺乏客觀性數(shù)據(jù)證明，而影像學(xué)檢查雖然更為精確，但是缺乏即時(shí)性[9]。為了了解患者種植體周圍炎的情況，收集患者的PICF，分析影響種植體周圍炎的指標(biāo)，如IL-6、CRP、SOD、MDA、GP-Phx等，成為近年口腔醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。

IL-6作為促炎因子，可引起炎癥因子水平紊亂，誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞或細(xì)菌產(chǎn)生膠原酶活性，從而導(dǎo)致牙骨質(zhì)磷酸鹽的分解、鈣鹽沉積紊亂，加劇骨質(zhì)的吸收[10]。CRP是一個(gè)重要的反映炎癥的生物學(xué)指標(biāo)，CRP水平的升高往往提示炎癥細(xì)胞的富集，PICF中CRP水平有可能成為預(yù)測(cè)種植體周圍炎嚴(yán)重程度的重要指標(biāo)之一[11]。SOD、MDA和GP-Phx屬于抗氧化酶體系，研究報(bào)道MDA是氧化應(yīng)激產(chǎn)物，其水平會(huì)隨著牙周炎癥程度的增加而升高，可以反映炎癥對(duì)組織的損傷程度[12-13]。SOD是自由基O2-的清除酶，GP-Phx可清除體內(nèi)儲(chǔ)存或生成的過氧化物，SOD和GP-Phx均可作為機(jī)體氧化應(yīng)激的生物標(biāo)志物[14]。

為了研究PICF中IL-6、CRP及氧化應(yīng)激標(biāo)志物水平變化與種植體周圍炎的關(guān)系，本研究將在西北大學(xué)附屬醫(yī)院口腔門診實(shí)施種植修復(fù)的100例患者分為兩組進(jìn)行隨訪研究，檢測(cè)兩組患者PICF中IL-6、CRP、SOD、MDA、GP-Phx水平與PD、PLI、SBI的關(guān)系。結(jié)果發(fā)現(xiàn)炎癥組患者種植體的PD、PLI和SBI的測(cè)定值明顯高于對(duì)照組。IL-6、CRP、SOD、MDA、GP-Phx的水平跟種植體周圍炎的活動(dòng)期具有相關(guān)性：炎癥組患者種植體的PLI、PD、SBI與PICF中IL-6、CRP水平均呈正相關(guān)，這說明種植體周圍部位IL-6和CRP水平可以在一定程度上反映該部位的炎癥程度；炎癥組患者種植體的PLI、PD、SBI與PICF中SOD、GP-Phx水平均呈負(fù)相關(guān)，說明PICF中SOD、GP-Phx持續(xù)維持在較低水平，局部炎性反應(yīng)越明顯。炎癥組PICF中IL-6、CRP水平比對(duì)照組高，這是由于IL-6參與種植體周圍炎的發(fā)生，在種植體周圍炎組織中高表達(dá)，IL-6還是刺激機(jī)體產(chǎn)生CRP的重要細(xì)胞因子，IL-6等因子在種植體周圍炎中的表達(dá)水平比牙周組織更高，從而刺激CRP的合成，導(dǎo)致炎癥狀態(tài)下CRP水平升高。

炎癥組SOD、GP-Phx水平較對(duì)照組低，而MDA水平較對(duì)照組高。這可能是炎癥狀態(tài)下，種植體周圍會(huì)產(chǎn)生較多的自由基，機(jī)體會(huì)大量消耗抗氧化酶來清除自由基及其累積產(chǎn)物，導(dǎo)致被大量消耗的自由基的數(shù)量急劇減少，水平降低。當(dāng)機(jī)體內(nèi)氧化反應(yīng)發(fā)生紊亂時(shí)，體內(nèi)活性氧攻擊細(xì)胞膜上的不飽和脂肪酸，產(chǎn)生脂質(zhì)過氧化物，這些脂質(zhì)過氧化物最終反應(yīng)變成MDA，造成種植體周圍的MDA水平升高。推測(cè)氧化應(yīng)激標(biāo)志物SOD、MDA和GP-Phx水平的改變與種植體炎癥程度具有相關(guān)性，種植體周圍炎存在氧化應(yīng)激現(xiàn)象，可以為種植體周圍炎的早期預(yù)防和診治提供相關(guān)的理論基礎(chǔ)。不過究竟是炎性反應(yīng)導(dǎo)致的氧化應(yīng)激現(xiàn)象，還是氧化應(yīng)激加速了炎性反應(yīng)仍有待進(jìn)一步求證，為種植體周圍炎的預(yù)防和診治提供更詳細(xì)的理論依據(jù)。

趙國(guó)強(qiáng)等[15]的研究表明，炎癥種植體組PLI、SBI、PD及PICF中炎癥因子水平高于健康種植體組和對(duì)照組；SBI、PLI、PD與炎癥因子IL-6、IL-1β、TNF-α、MMP-8水平呈正相關(guān)。本研究不僅探討了種植體周圍炎與具有代表性的炎癥因子IL-6、炎癥早期生物標(biāo)志物CRP的水平變化關(guān)系。還探討了PICF中氧化應(yīng)激標(biāo)志物SOD、GP-Phx和MDA的水平變化，結(jié)果表明種植體周圍炎的發(fā)生一定程度依賴于氧化應(yīng)激標(biāo)志物水平的變化，種植體周圍炎存在氧化應(yīng)激現(xiàn)象。本研究雖然說明了PICF中IL-6、CRP及氧化應(yīng)激標(biāo)志物水平與種植體周圍炎的關(guān)系，但研究也存在不足之處：沒有明確氧化應(yīng)激反應(yīng)與炎癥作用的機(jī)制，尚不明確兩者是如何相互影響的。在接下來的研究中，需要深入地探討兩者之間的關(guān)系，為早期預(yù)防、診斷及臨床治療種植體周圍炎提供一定的理論依據(jù)。

綜上所述，種植體的PICF中炎癥指標(biāo)及氧化應(yīng)激標(biāo)志物水平變化可反映炎癥程度。