魏連會，董 艷，石 杰，孫興榮

（1.黑龍江省科學(xué)院大慶分院，黑龍江大慶 163319；2.黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院大慶分院，黑龍江大慶 163316）

0 引言

蔓越莓又名蔓越橘，在我國大興安嶺、遼寧、吉林等地常見[1]，是越橘屬水果。蔓越莓營養(yǎng)價值高，富含多種功能活性成分[2-5]，具有抗氧化、抗炎、抗癌、延緩衰老、抗腫瘤、防治消化系統(tǒng)疾病等多種保健功效[6-7]。近年來，隨著大健康產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展，蔓越莓的營養(yǎng)價值得到普遍關(guān)注，以蔓越莓為主要成分的各種食品以出現(xiàn)在餐桌上。國外針對蔓越莓抗氧化、抗菌、抗尿路感染和抗腫瘤等方面的功能性質(zhì)都進(jìn)行了研究。我國學(xué)者對于蔓越莓相關(guān)的研究主要集中在花青素提取條件的優(yōu)化及氧化性的初步分析，尚無從蔓越莓揮發(fā)性物質(zhì)成分角度探討蔓越莓的保健功效。

采用同時蒸餾萃取法萃取蔓越莓中的揮發(fā)性物質(zhì)，同時蒸餾萃?。⊿DE）具有操作簡便、提取物質(zhì)成本低、香味物質(zhì)提取率高、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)，因此被廣泛應(yīng)用于食品風(fēng)味物質(zhì)分析的前處理[8-10]。將同時蒸餾萃取得到的揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行氣質(zhì)色譜儀（GC-MS）分析，確定蔓越莓中揮發(fā)性物質(zhì)，為蔓越莓的保健功效及其功能因子提供重要的理論依據(jù)，為蔓越莓產(chǎn)品的開發(fā)奠定基礎(chǔ)。

1 材料與儀器

1.1 材料與試劑

蔓越莓，大興安嶺北極冰公司提供；氯化鈉（分析純），國藥集團(tuán)提供；二氯甲烷（分析純），天津市精細(xì)化工研究所提供；無水硫酸鈉（分析純），國藥集團(tuán)提供。

1.2 儀器與設(shè)備

ME204E型分析天平，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司產(chǎn)品；同時蒸餾萃取裝置，鄭州興華玻璃儀器廠產(chǎn)品；HH-1型恒溫水浴鍋，金壇市盛藍(lán)儀器制造有限公司產(chǎn)品；電熱套，山東鄄城華魯電熱儀器有限公司產(chǎn)品；R201型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海申勝生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品；Thermo ISQ GC/MS型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，美國Thermo Fisher公司產(chǎn)品。

2 試驗(yàn)方法

2.1 蔓越莓中揮發(fā)性成分的萃取

采用同時蒸餾萃取法萃取蔓越莓中的揮發(fā)性成分。在萃取有效成分之前，先進(jìn)行裝置的預(yù)清潔，在萃取裝置的兩端分別加入300 mL蒸餾水和60 mL二氯甲烷，蒸餾4 h，保證儀器清潔。將真空冷凍干燥好蔓越莓樣品用粉碎機(jī)打碎成粉。稱取蔓越莓樣品20 g（精確至0.1 mg），置于小燒杯中，同時加入適量的氯化鈉和蒸餾水溶解，倒入同時蒸餾萃取裝置的500 mL圓底燒瓶中，并加入適量蒸餾水和沸石，用可控溫的電熱套加熱。在100 mL圓底燒瓶中加入60 mL二氯甲烷，連接到裝置的另一端。浸泡在55℃恒溫水浴中。連續(xù)蒸餾萃取2 h。合并“U”型管和100 mL圓底燒瓶中的二氯甲烷萃取液，-40℃下低溫冷凍過夜，用無水硫酸鈉除去溶劑中殘存的水，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將提取的蔓越莓揮發(fā)物質(zhì)濃縮至1 mL，過0.22μm微孔濾膜，進(jìn)行GC-MS分析。

2.2 GC-MS分析條件

色譜條件：色譜柱為安捷倫DB-1701（60 m×250μm×0.25μm）；載氣為氦氣，1.0 mL/min；柱初溫60℃，保溫5 min，以30℃/min升溫速率升至270℃，用時12 min；進(jìn)樣口溫度250℃；分流比10∶1；進(jìn)樣量0.5μL。

質(zhì)譜條件：EI離子源，電子能量15 eV；質(zhì)量掃描范圍50~400 amu，離子源溫度220℃；傳輸線溫度270℃；四極桿溫度150℃。GC-MS檢測結(jié)果，經(jīng)人工解析并與標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖對照和檢索，確定各組分的化學(xué)結(jié)構(gòu)。

3 結(jié)果與分析

蔓越莓揮發(fā)性成分的總離子流見圖1，蔓越莓中揮發(fā)性物質(zhì)的GC-MS鑒定結(jié)果見表1。

圖1 蔓越莓揮發(fā)性成分的總離子流

由表1可知，通過對蔓越莓的揮發(fā)性物質(zhì)化學(xué)成分GC-MS分析，共鑒定出了23種化合物。其中，含量較高的成分為5-羥甲基糠醛、2-氨基-6-三氟甲氧基苯并噻唑、糠醛、5-氨基乙酰丙酸、D-阿洛糖、2-2-乙基己基-磷酸三酯、2,3-二氫-3,5-二羥基-6-甲基-4(H)-吡喃-4-酮、奎寧酸。

表1 蔓越莓中揮發(fā)性物質(zhì)的GC-MS鑒定結(jié)果

4 結(jié)論

通過對蔓越莓中的揮發(fā)性成分進(jìn)行GC-MS分析，共鑒定出了23種主要成分，主要含有烷烴、醇、醛、酮類，胺、有機(jī)酸、糖、酯類物質(zhì)。其中，很多物質(zhì)為具有藥物功效作用，如5-氨基乙酰丙酸為生物體合成葉綠素、血紅素、維B12的前體物質(zhì)。同時，醫(yī)學(xué)上可以用于膀胱癌、消化道癌、肺癌的診斷；蘿巴新具有調(diào)節(jié)腦代謝作用；2-氨基-6-三氟甲氧基苯并噻唑可用于肌萎偏側(cè)索硬化癥的治療；依氟鳥氨酸可以用于治療非洲昏睡病及癌癥的治療。