吳瑩
現(xiàn)如今,隨著社會大眾生活質(zhì)量與水平的不斷提升,食品安全問題越來越受到重視,尤其是微生物污染問題,因為其普遍性、嚴重性得到了社會大眾的廣泛關注,因此,微生物檢測技術成為行業(yè)研究的重點。本文主要通過闡述近些年來幾種常用食品微生物檢驗技術,為相關檢驗人員提供參考,方便他們更好地選擇合適的檢測技術,為社會大眾的生命健康安全保駕護航。
一、生化檢測技術在微生物檢測中的應用
在對食品中病原菌進行檢測時,通常情況下會利用生化技術來進行最終的確認?,F(xiàn)如今已經(jīng)生產(chǎn)出很多比較微型的生化試劑盒,以此來盡可能地節(jié)省樣品的分析時間與投入成本。除了生化試劑盒,還有機構(gòu)進行了細菌生化檢測儀器的開發(fā),利用這些儀器能夠檢測出細菌的具體種類。
二、免疫技術在微生物檢測中的應用
免疫技術中比較常用的方法有免疫擴散法、免疫沉淀法等等。相關領域的科學研究者們通常使用的都是電化學發(fā)光免疫學技術,通過與生物素等技術結(jié)合在一起,可以在較短的時間內(nèi)取得比較顯著的效果。另外,這種方法下生產(chǎn)出來的檢測試劑盒,也可以檢測出一些病原菌。盡管免疫檢測方法有很多的優(yōu)勢,但是在應用的過程中還有很多問題,有很多地方都需要改善,比如靈敏度比較低、假陽性較多。
三、代謝檢測技術在微生物檢測中的應用
1.微熱量計檢測技術。微熱量計檢測技術主要就是通過測定細菌在生產(chǎn)過程中熱量出現(xiàn)的變化,從而對細菌進行檢測。微生物在實際生長的過程中會產(chǎn)生熱量,可以利用相應的儀器來測量具體的熱量數(shù)據(jù),并將其存儲在計算機中,通過信號數(shù)字模擬界面在紀錄器上繪制對應的熱曲線圖。根據(jù)具體的實驗所得的熱曲線圖對細菌進行鑒別,從而能夠更好地抑制細菌的生長。
2.放射測量檢測技術。這種技術主要是根據(jù)細菌在生長過程中代謝的碳水化合物的基本原理,將待檢測的細菌樣本放入碳水化合物,或者是鹽類等分子中進行檢測。細菌在生長的過程中,這些底物會被利用,并且釋放出相應的碳水化合物。隨后通過自動化的方式測定,測量內(nèi)部化合物的一氧化碳含量,進一步來判斷細菌的數(shù)量。這種方法測定食品中的細菌,具有精準度較高、便捷、速度較快等優(yōu)點。
3.接觸酶檢測技術。接觸酶測定技術的原理是通過計算一個含有接觸酶的紙盤,在盛有過氧化氫的試管中根據(jù)漂浮時間來估計菌數(shù)。接觸酶與過氧化氫發(fā)生反應放出氧氣,樣品接觸酶陽性細菌含量越高,放出的氧氣越多,紙盤上浮的時間越短;反之,紙盤上浮的時間就越長。接觸酶多數(shù)腐敗微生物是嗜冷性細菌,多數(shù)嗜冷細菌接觸酶呈陽性,所以可以用接觸酶反應來測定食品中的嗜冷性細菌。
四、分子生物學技術在微生物檢測中的應用
1.核酸探針檢測技術。核酸探針能夠與微生物中全部的生物分子發(fā)生一部分反應,對于食品的細菌種類、細菌特性有明顯的探查作用,整體的敏感度較高。但是該技術在實際檢測中也存有一定的問題,比如在檢測每一種細菌時就要自備特定的探針,而且還要對樣品進行一定時間的培養(yǎng),這樣一來,投入的成本相對來說就比較大。
2.PCR技術。PCR全稱聚合酶鏈式反應,是目前主要的檢測手段之一,被廣泛應用于微生物檢測。和傳統(tǒng)檢測技術相比,該技術的檢測精度更高。
3.基因芯片技術。作為現(xiàn)代生物技術發(fā)展的產(chǎn)物,基因芯片技術可以進行靶向微生物檢測。檢測人員借助基因芯片技術對待檢樣本進行檢測時,可以檢測出不同微生物種類的具體數(shù)量。
4.DNA檢測技術。作為定向檢測技術,DNA檢測技術主要是通過提取一種或幾種微生物的DNA,將其進行處理或者標記后進行檢測,當待檢樣本中檢測出被標記的DNA,則可以證明樣本中有對應微生物存在。
五、儀器檢測方法在微生物檢測中的應用
隨著食品微生物檢測技術的不斷成熟發(fā)展,很多檢驗技術都越來越完善,這些檢測技術也被相關行業(yè)領域的專家逐漸研制成了自動或者是半自動的微生物檢測儀器。
1.旋轉(zhuǎn)平板技術以及激光掃描儀。旋轉(zhuǎn)平板技術主要是一種可以將液體樣品進行螺旋轉(zhuǎn)動的分布方式,使整體樣品液體分布比較均勻,能夠應用于細菌、酵母等樣品的檢測中。等到樣品倒入平板中后,可以利用激光掃描儀來進行探測,從上至下進行自動掃描,降低光的強度,以此來精確地檢驗出食品中是否存在細菌。這種方法的檢驗質(zhì)量與效率比較高,結(jié)果也比較精準。
2.流式細胞檢測技術。流式細胞檢測技術主要是對細胞懸液進行自動、快速地分析和選擇,具有檢測速度較快、精確度比較高、記錄的細胞數(shù)量大、分析比較全面等優(yōu)點,因為檢測到的熒光強度的大小與基因片段的大小成比例,所以通過具體的圖形,就能夠知道細菌中基因指紋的具體圖譜,并進一步明確細菌的種類。目前來說,這種技術已經(jīng)能夠檢測比較高精度的基因,也能夠在很短的時間內(nèi)完成對數(shù)據(jù)信息的收集與分析,近些年來在相關的臨床醫(yī)學實驗中主要用于對病毒細菌的檢測。
3.免疫磁性微球檢驗。因為食品中檢測的樣本大多數(shù)都是固體液體混合的樣本,如果只是采用傳統(tǒng)、常規(guī)的檢驗方法,很難將一些病原生物分離,利用免疫磁性分類技術,可以達到快速分離微生物的主要目的。這種技術如今在食品衛(wèi)生檢測與研究中取得了比較良好的成效,而且與常規(guī)方法相比,該技術分離速度較快,在大量的懸液中可以進行有選擇性的分離,節(jié)約了微生物檢驗的時間。
總的來說,在眾多的微生物檢測方法中,每一種方法都有其明顯的優(yōu)勢和不足之處。隨著社會經(jīng)濟的不斷發(fā)展、科學技術水平的不斷提升,諸如基因芯片檢測技術以及自動化的微生物檢測系統(tǒng)等紛紛面世,它們彌補了以前那些微生物檢測技術的缺點,使得食品微生物檢驗技術朝著更加精確、靈敏的方向發(fā)展,檢驗的質(zhì)量與效率不斷提升,為保障消費者“舌尖上的安全”做出了突出貢獻。