孫季

（河南省南陽市第一人民醫(yī)院 檢驗科，河南 南陽 473000）

妊娠期糖尿病作為糖尿病的特殊類型，妊娠期糖尿病屬于2 型糖尿病的后備狀態(tài)［1-2］。當(dāng)前，在糖尿病孕婦中，妊娠期糖尿病發(fā)病概率達(dá)到78.64%以上［3］。妊娠期糖尿病患者糖代謝功能異常通常在產(chǎn)后，可以逐步恢復(fù)至正常狀態(tài)，但是日后會在某種程度上使2 型糖尿病的患病概率升高。為了分析妊娠期糖尿病患者糖化血紅蛋白及SFTPD 基因表達(dá)與糖代謝異常的聯(lián)系，將選取78例河南省南陽市第一人民醫(yī)院收治的孕婦作為研究主體，將研究過程展開如下概述。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2018 年6 月至2020 年6 月河南省南陽市第一人民醫(yī)院收治的78 例孕婦為研究主體，結(jié)合孕婦是否患有妊娠期糖尿病，將其劃分為實驗組48 例與參照組30 例。所有孕婦孕齡為24～28周，均接受口服葡萄糖耐量測試。納入指標(biāo)：年齡22～40 歲；滿足國際妊娠期糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］；無糖尿病病史。排除標(biāo)準(zhǔn)：存在糖尿病家族史；近日服用過影響自身碳水化合物代謝的藥物。本研究通過醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，參與臨床研究調(diào)查的對象均知情同意。

1.2 方法

1.2.1 檢驗指標(biāo) 醫(yī)務(wù)工作者對兩組患者的孕前人體質(zhì)量指數(shù)等臨床資料。分娩之前，收集兩組孕婦空腹軸靜脈血，運(yùn)用全自動糖化血紅蛋白分析儀設(shè)備，實施高效液相色譜方法，檢驗糖化血紅蛋白。血清C 反應(yīng)蛋白利用全自動分析儀器，通過免疫比濁方法實施檢驗。

1.2.2 基因表達(dá)檢驗 利用引物溶液與逆轉(zhuǎn)錄酶試劑盒，對于cDNA 利用定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）檢驗方式，得出SFTPD 基因表達(dá)水平。根據(jù)GenBank 數(shù)據(jù)庫，設(shè)計引物序列，而GAPDH基因作為內(nèi)參基因，見表1。利用實時熒光定量PCR 系統(tǒng)軟件，擴(kuò)增研究引物序列情況。如若PCR 擴(kuò)增完畢后，可通過解鏈曲線分析手段，對PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物特異性加以檢測。除此之外，借助PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳干預(yù)，分析PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性。所有檢驗樣品都含有兩個腹孔，最終檢測結(jié)果等于2 次檢驗結(jié)果的平均值［5-6］。

表1 RCP 擴(kuò)增引物序列分布情況

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

所有資料均運(yùn)用SPSS 21.0 軟件展開數(shù)據(jù)分析。運(yùn)用Shapiro-Wilk 檢測手段，對計量資料是否符合正態(tài)分布進(jìn)行驗證，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，用t檢驗；利用Pearson 相關(guān)性分析系統(tǒng)，對兩組孕婦的糖化血紅蛋白與SFTPD mRNA 相對表達(dá)水平進(jìn)行相關(guān)性分析。統(tǒng)計學(xué)分析均運(yùn)用雙側(cè)檢測形式。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對比兩組孕婦臨床資料與相關(guān)檢驗指標(biāo)結(jié)果

實驗組與參照組的年齡、孕前BMI 等指標(biāo)比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。實驗組患者的空腹血糖和口服葡萄糖耐量實驗1 h、2 h 血糖以及糖化血紅蛋白相較于參照組明顯較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組孕婦臨床資料與檢驗指標(biāo)情況比較（）

表2 兩組孕婦臨床資料與檢驗指標(biāo)情況比較（）

2.2 兩組孕婦SFTPD mRNA 相對表達(dá)水平

根據(jù)實時熒光定量PCR 分析結(jié)果，相較于參照組，實驗組的SFTPD mRNA 相對表達(dá)水平較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=9.690,P=0.000）。見表3。

表3 兩組孕婦SFTPD mRNA 相對表達(dá)水平比較（）

表3 兩組孕婦SFTPD mRNA 相對表達(dá)水平比較（）

2.3 兩組孕婦糖化血紅蛋白和SFTPD mRNA 相對表達(dá)水平以及有關(guān)臨床指標(biāo)的相關(guān)性分析情況

根據(jù)相關(guān)性分析結(jié)果表明，糖化血紅蛋白與SFTPD mRNA 相對表達(dá)以及妊娠期血清C 反應(yīng)蛋白正相關(guān)（P＜0.05）；糖化血紅蛋白、SFTPD mRNA 相對表達(dá)水平和空腹血糖正相關(guān)（P＜0.05）；糖化血紅蛋白和SFTPD mRNA 相對表達(dá)正相關(guān)（P＜0.05）。見表4。

表4 兩組孕婦糖化血紅蛋白和SFTPD mRNA 相對表達(dá)水平以及有關(guān)臨床指標(biāo)的相關(guān)性分析情況

3 討論

現(xiàn)階段，臨床缺少與妊娠期糖尿病患者糖化血紅蛋白及SFTPD 基因表達(dá)與糖代謝異常相關(guān)的研究報道［7-8］。此次臨床研究將選取48 例存在妊娠期糖尿病的孕婦作為實驗組，并選取30 例非妊娠期糖尿病孕婦作為參照組，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，實驗組糖化血紅蛋白與SFTPD mRNA 相對表達(dá)相較于參照組明顯較高（P＜0.05）。由此可見，妊娠期糖尿病患者處于高血糖情況下，可促進(jìn)SFTPD 基因過表達(dá)，使糖化血紅蛋白升高，而糖化血紅蛋白與SFTPD 基因在妊娠期糖尿病的發(fā)病原因中，有著明顯的病理學(xué)意義。妊娠期糖尿病患者自身的胰島素抵抗、氧化應(yīng)激基因表達(dá)等存在異常變化情況，進(jìn)一步表明妊娠期糖尿病患者機(jī)體高血糖環(huán)境在轉(zhuǎn)錄水平方面，對SFTPD 基因表達(dá)進(jìn)行調(diào)節(jié)，糖化血紅蛋白升高可能與微血管病變有關(guān)［9-10］。

SP-D 是一種肺特異性蛋白，可增強(qiáng)人體清除病原體能力，緩解炎癥反應(yīng)情況，而SP-D 可能是一種炎癥、肥胖以及胰島素抵抗共同作用的關(guān)鍵因素［11-12］。此次臨床研究結(jié)果表明，實驗組SFTPD mRNA 相對表達(dá)水平與參照組相比明顯較高（P＜0.05）。由此可見，妊娠期糖尿病患者的白細(xì)胞SFTPD 基因表達(dá)水平進(jìn)一步提升，根本原因是高血糖環(huán)境作用，使患者機(jī)體出現(xiàn)氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)情況，促使抗氧化和抗感染特性SP-D 高表達(dá)能力得到提升［13-14］。本研究結(jié)果顯示，SFTPD mRNA 基因表達(dá)水平與空腹血糖、C 反應(yīng)蛋白正相關(guān)（P＜0.05），與WANG 等［14］研究結(jié)果相一致，說明此次臨床研究具有可行性。

綜上所述，糖化血紅蛋白與SFTPD 基因在妊娠期糖代謝異常的篩查診斷與并發(fā)癥監(jiān)測方面有著重要的價值。