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        小兒顱內(nèi)膠質(zhì)瘤組織中B淋巴細(xì)胞瘤-2基因(BCL-2)蛋白和膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)檢測的臨床價(jià)值及意義

        2021-11-02 03:10:46強(qiáng)
        實(shí)用癌癥雜志 2021年10期
        關(guān)鍵詞:室管膜組織學(xué)膠質(zhì)

        呂 強(qiáng) 李 濤 裴 航 齊 林

        膠質(zhì)瘤是大腦和脊髓膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)生癌變而產(chǎn)生的原發(fā)性顱腦內(nèi)的惡性腫瘤,其發(fā)病率約占中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤的40%以上[1]。早發(fā)現(xiàn)早診斷早治療是提高該腫瘤患者生存率的唯一途徑[2]。顱內(nèi)膠質(zhì)瘤也是小兒時(shí)期常見腫瘤,其發(fā)病率在兒童群體中僅次于白血病[3]。該腫瘤早期診斷和預(yù)后評估的生物靶標(biāo)仍是其相關(guān)研究的熱點(diǎn)內(nèi)容[4-5]。本研究主要分析B淋巴細(xì)胞瘤-2基因(B cell lymphoma 2 protein,BCL-2)蛋白和膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)在不同臨床特征膠質(zhì)瘤患兒病理組織中的表達(dá)及與其預(yù)后的相關(guān)性。

        1 資料與方法

        1.1 臨床資料

        選擇2015年1月至2020年1月于鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院行手術(shù)切除的96例顱內(nèi)膠質(zhì)瘤患兒病理組織標(biāo)本作為研究對象,切除后均置于-80 ℃冰箱保存。所有患者中,男性54例,女性42例,年齡2~14歲,平均(9.06±3.12)歲。組織學(xué)分類:星形膠質(zhì)瘤44例,室管膜瘤32例,膠質(zhì)母細(xì)胞瘤20例;WHO病理分級:Ⅰ級34例,Ⅱ級24例,Ⅲ級20例,Ⅳ級18例。所有患兒術(shù)前均未接受過放、化療以及免疫治療;家屬均知情同意本研究內(nèi)容并簽署同意書。本研究獲得鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院倫理學(xué)委員會批準(zhǔn)。

        1.2 方法

        1.2.1 檢測指標(biāo) 取保存的膠質(zhì)瘤組織,根據(jù)石蠟切片制作流程進(jìn)行包埋、切片(切片厚度4 μm)、脫蠟和復(fù)水,采用鼠抗人BCL-2單克隆抗體(貨號:ab77566)和鼠抗人GFAP單克隆抗體(貨號:13-0300)及免疫組織化學(xué)染色試劑盒(貨號:ab64211)均購自英國abcam公司,用于檢測膠質(zhì)瘤患兒病理組織中BCL-2和GFAP的表達(dá),并嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

        1.2.2 陽性結(jié)果判定 采用雙盲法,由鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院病理科兩位醫(yī)師對免疫組化陽性結(jié)果進(jìn)行判定。然后參考張賀軍等[6]研究中的染色強(qiáng)度(Dyeing intensity)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評分:細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒樣染色定為陽性,0分:無色、1分:淺黃色、2分:黃色、3分:棕褐色;根據(jù)陽性細(xì)胞百分率(percentage of positive cells)進(jìn)行評分:0分:<25%、1分:25%~50%;2分:50%~75%;3分:>75%。組織化學(xué)評分(H-SCORE)=D×P,得分范圍:0~9分;≤1為陰性(-),2~3分為弱陽性(+),4~6分為陽性(++),>6分為強(qiáng)陽性(+++)。

        1.2.3 術(shù)后隨訪 所有患者術(shù)后出院后均進(jìn)行隨訪,記錄各個(gè)患兒預(yù)后及生存情況,并據(jù)其分為預(yù)后良好(A組)和預(yù)后差(B組)兩組,比較患兒膠質(zhì)瘤組織中BCL-2和GFAP蛋白的陽性表達(dá)率差異。

        1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

        2 結(jié)果

        2.1 不同臨床特征膠質(zhì)瘤患兒BCL-2陽性表達(dá)比較

        結(jié)果顯示:不同性別膠質(zhì)瘤患兒BCL-2表達(dá)陽性率和H-SCORE得分均無顯著差異(P>0.05);不同組織學(xué)分類膠質(zhì)瘤患兒BCL-2表達(dá)陽性率無顯著差異,但星形膠質(zhì)瘤和膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患兒H-SCORE得分顯著高于室管膜瘤患兒(P<0.05),而該兩組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);不同WHO病理分級膠質(zhì)瘤患兒BCL-2陽性表達(dá)率和H-SCORE得分均存在顯著差異,即Ⅲ~Ⅳ級BCL-2陽性表達(dá)率和H-SCORE得分均顯著高于Ⅰ~Ⅱ級(P<0.05),見表1。

        表1 不同臨床特征膠質(zhì)瘤患兒BCL-2陽性表達(dá)比較(例,%)

        2.2 不同臨床特征膠質(zhì)瘤患兒GFAP陽性表達(dá)比較

        結(jié)果顯示:不同性別膠質(zhì)瘤患兒GFAP表達(dá)陽性率和H-SCORE得分均無顯著差異(P>0.05);不同組織學(xué)分類膠質(zhì)瘤患兒GFAP表達(dá)陽性率無顯著差異,但H-SCORE得分則為:膠質(zhì)母細(xì)胞瘤>星形膠質(zhì)瘤>室管膜瘤患兒,且組間兩兩比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);不同WHO病理分級膠質(zhì)瘤患兒GFAP陽性表達(dá)率和H-SCORE得分均存在顯著差異,即Ⅲ~Ⅳ級GFAP陽性表達(dá)率和H-SCORE得分均顯著高于Ⅰ~Ⅱ級(P<0.05),見表2。

        表2 不同臨床特征膠質(zhì)瘤患兒GFAP陽性表達(dá)比較(例,%)

        2.3 不同預(yù)后患者BCL-2和GFAP的表達(dá)

        與A組相比,B組BCL-2和GFAP的表達(dá)陽性率及H-SCORE得分均顯著增加,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表3。

        表3 不同預(yù)后患者BCL-2和GFAP的表達(dá)情況

        3 討論

        膠質(zhì)瘤是神經(jīng)系統(tǒng)惡性腫瘤之一,占比約30%,具有生長速度塊、治愈率低一級預(yù)后差等特點(diǎn),且患者術(shù)后除了容易復(fù)發(fā)還易出現(xiàn)顱內(nèi)壓增高、癲癇以及嘔吐等不良反應(yīng),對患者日常生活及生命健康造成嚴(yán)重不良影響[7-9]。因此目前腦膠質(zhì)瘤術(shù)后復(fù)發(fā)的分子標(biāo)志物表達(dá)差異是其早期診斷及預(yù)后評估的研究重點(diǎn)內(nèi)容。

        膠質(zhì)瘤的發(fā)生、進(jìn)展與癌基因的激活、抑癌基因失活以及凋亡基因異常表達(dá)密切相關(guān),BCL-2屬于細(xì)胞凋亡調(diào)控蛋白,在多種癌癥中均有表達(dá),其可通過抑制引起細(xì)胞凋亡的相關(guān)因子從而發(fā)揮生物學(xué)功能,研究顯示:該蛋白高表達(dá)可促進(jìn)癌細(xì)胞對化療藥物的耐藥性從而抵抗腫瘤的凋亡,且其高表達(dá)也是腫瘤細(xì)胞增殖及發(fā)展的關(guān)鍵因素[10-11]。本研究結(jié)果顯示:不同性別膠質(zhì)瘤患兒BCL-2表達(dá)陽性率和H-SCORE得分均無顯著差異(P>0.05);不同組織學(xué)分類膠質(zhì)瘤患兒BCL-2表達(dá)陽性率無顯著差異,但星形膠質(zhì)瘤和膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患兒H-SCORE得分顯著高于室管膜瘤患兒(P<0.05),兩組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);不同WHO病理分級膠質(zhì)瘤患兒BCL-2陽性表達(dá)率和H-SCORE得分均存在顯著差異,即Ⅲ~Ⅳ級BCL-2陽性表達(dá)率和H-SCORE得分均顯著高于Ⅰ~Ⅱ級(P<0.05)。表明BCL-2蛋白的表達(dá)與患兒不同組織學(xué)分類有關(guān),其原因可能在于星形膠質(zhì)瘤和膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的較室管膜瘤惡性程度高[12];另外該蛋白與患兒和病理分級也密切相關(guān),說明其參與膠質(zhì)瘤的發(fā)生和進(jìn)展。除此以外,本研究結(jié)果顯示:與A組相比,B組BCL-2的表達(dá)陽性率及H-SCORE得分均顯著增加(P<0.05),表明:BCL-2的表達(dá)與膠質(zhì)瘤患兒預(yù)后情況有關(guān),可能對患兒預(yù)后具有一定預(yù)測價(jià)值。

        GFAP是1種星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志蛋白,通常其表達(dá)量雖中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷程度增加而增加,且在膠質(zhì)瘤組織中表達(dá)量也顯著增加[13]。研究顯示:GFAP可作為腦膠質(zhì)瘤與腦轉(zhuǎn)移瘤鑒別診斷的檢測指標(biāo),尤其是組織學(xué)診斷較為困難的患者[14]。而在本研究中,不同組織學(xué)分類膠質(zhì)瘤患兒GFAP表達(dá)陽性率無顯著差異,但H-SCORE得分則為:膠質(zhì)母細(xì)胞瘤>星形膠質(zhì)瘤>室管膜瘤患兒,且組間兩兩比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);不同WHO病理分級膠質(zhì)瘤患兒GFAP陽性表達(dá)率和H-SCORE得分均存在顯著差異,即Ⅲ~Ⅳ級GFAP陽性表達(dá)率和H-SCORE得分均顯著高于Ⅰ~Ⅱ級(P<0.05),說明GFAP蛋白與膠質(zhì)瘤患兒組織學(xué)分類和WHO病理分級均密切相關(guān),其在膠質(zhì)瘤的分化和進(jìn)展過程中具有重要調(diào)控作用,與相關(guān)研究結(jié)論類似[15]。另外本研究存在不足之處——該兩個(gè)蛋白的表達(dá)對膠質(zhì)瘤的影響之間是否具有互相調(diào)控作用,本研究為針對該問題進(jìn)行深入分析,后續(xù)將展開進(jìn)一步討論。

        綜上所述,BCL-2和GFAP的表達(dá)與膠質(zhì)瘤患兒組織學(xué)分類、病理分級以及預(yù)后情況均密切相關(guān),在膠質(zhì)瘤的發(fā)生、分化以及進(jìn)展的調(diào)控方面具有重要作用。

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