盧森威，王言之，李世芬,3，鄭曉杰，張靜姝,3*

(1.南京醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院，南京211166；2.南京醫(yī)科大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院，南京211166；3.江蘇省醫(yī)藥農(nóng)藥獸藥安全性評價與研究中心，南京211166；4.石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司，石家莊050035)

體力疲勞是亞健康狀態(tài)在運(yùn)動能力[1]方面的一種表現(xiàn)，是影響職業(yè)人群生命質(zhì)量的風(fēng)險因素之一，長期或過量運(yùn)動可造成機(jī)體內(nèi)分泌失調(diào)、免疫力降低，乃至患腫瘤、心腦血管等疾病風(fēng)險增高[2]。 基于對生命質(zhì)量的考量，疲勞相關(guān)病癥已逐步得到高度重視[3,4]。

抗疲勞處方由人參、黃精、枸杞子和?；撬峤M成，人參為五加科植物人參的干燥根和根莖，是治療“虛勞內(nèi)傷”[5]的首選，可補(bǔ)氣益肺；黃精為百合科植物黃精、滇黃精或多花黃精的干燥根莖，作為大宗藥材[6]其健脾益腎的藥食兩用價值得到廣泛認(rèn)可[7]；枸杞子為茄科植物枸杞的干燥成熟果實(shí)，常泡茶、泡酒以清毒明目[8]。牛磺酸是動物體內(nèi)分布廣泛、 含量豐富的一種非蛋白游離氨基酸[9]，在人體內(nèi)主要起到調(diào)節(jié)滲透壓、保護(hù)細(xì)胞膜穩(wěn)定的作用[10]，可幫助細(xì)胞抵抗氧化應(yīng)激反應(yīng)[11]。

現(xiàn)擬定8 種由人參、黃精、枸杞子、牛磺酸組成，但配比不同的抗疲勞組方， 設(shè)計實(shí)驗(yàn)對抗疲勞效果進(jìn)行檢驗(yàn)及比較。

1 材料與方法

1.1 樣品

人參黃精等中藥提取物及牛磺酸， 由石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司提供，其中提取物的制備方法為：取人參、黃精、枸杞子加水煎煮2 次，提取液濾過，濃縮，干燥，粉碎，即得，每克提取物含生藥為2.13g。

1.2 實(shí)驗(yàn)動物

選用SPF 級CI/F1 代健康雄性小鼠360 只， 生產(chǎn)許可證號SCXK （ 滬）2018 -0006， 合格證編號：20180006015005。

1.3 組方、劑量設(shè)定和樣品配制如表1 所示。

表1 組方、劑量設(shè)定和樣品配制

1.4 試驗(yàn)方法

將小鼠按體重隨機(jī)分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四個大組，其中每大組90 只小鼠，再分為抗疲勞1 至8 組和溶劑對照組，共9 個小組，每小組10 只小鼠。 I 組進(jìn)行負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)；II 組進(jìn)行血漿尿素測定； Ⅲ組進(jìn)行肝糖原測定；Ⅳ組進(jìn)行血乳酸測定。連續(xù)灌胃一個月后測定各項緩解體力疲勞指標(biāo)。

2 結(jié)果

2.1 小鼠負(fù)重游泳時間

由表2 可見， 抗疲勞1、2、3、4、5 組小鼠負(fù)重游泳時間顯著長于0g/kg·bw/d 組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

表2 小鼠負(fù)重游泳時間()

表2 小鼠負(fù)重游泳時間()

注：“*” 表示與0g/kg·bw/d 比較，P＜0.05, 以下同。

組別劑量 動物數(shù) 負(fù)重游泳時間(g/kg·bw/d) (只) (秒)抗疲勞1 1.00 10 652±165*抗疲勞2 0.57 10 633±153*抗疲勞3 0.97 10 636±140*抗疲勞4 0.53 10 621±119*抗疲勞5 0.93 10 622±266*抗疲勞6 0.50 10 590±281抗疲勞7 0.87 10 546±166抗疲勞8 0.43 10 495±134對照組 0 10 387±106

2.2 小鼠游泳后血漿尿素水平

由表3 可見， 抗疲勞1、2、3、4 組小鼠血漿尿素水平顯著低于0g/kg·bw/d 組， 差異有統(tǒng)計學(xué)意義 （P＜0.05）。

表3 小鼠游泳后血漿尿素水平()

表3 小鼠游泳后血漿尿素水平()

組別劑量 動物數(shù) 血漿尿素(g/kg·bw/d) (只) (mmol/L)抗疲勞1 1.00 10 6.02±0.57*抗疲勞2 0.57 10 6.16±0.52*抗疲勞3 0.97 10 6.11±0.61*抗疲勞4 0.53 10 6.34±0.86*抗疲勞5 0.93 10 6.43±0.44抗疲勞6 0.50 10 6.67±0.46抗疲勞7 0.87 10 6.74±0.55抗疲勞8 0.43 10 6.89±0.52對照組 0 10 7.15±0.78

2.3 抗疲勞配方對小鼠肝糖原儲備量的影響

由表4 可見， 抗疲勞1、2 組小鼠肝糖原儲備量顯著高于0g/kg·bw/d 組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜0.05）。

表4 小鼠肝糖原儲備量()

表4 小鼠肝糖原儲備量()

組別劑量 動物數(shù) 肝糖原(g/kg·bw/d) (只) (mg/g 肝)抗疲勞1 1.00 10 23.0±1.7*抗疲勞2 0.57 10 22.9±3.8*抗疲勞3 0.97 10 22.8±6.8抗疲勞4 0.53 10 20.4±3.1抗疲勞5 0.93 10 20.8±3.3抗疲勞6 0.50 10 20.8±2.0抗疲勞7 0.87 10 19.9±2.5抗疲勞8 0.43 10 19.4±2.0對照組 0 10 18.9±4.3

2.4 小鼠游泳后血乳酸值及其曲線下面積

由表5 可見， 抗疲勞1、2 組小鼠游泳后血乳酸曲線下面積值顯著低于0g/kg·bw/d 組， 差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜0.05）。

表5 小鼠游泳后血乳酸(mmol/L)曲線下面積()

表5 小鼠游泳后血乳酸(mmol/L)曲線下面積()

組別劑量 動物數(shù) 安靜 運(yùn)動后0 分 運(yùn)動后休息20 血乳酸曲線(g/kg·bw/d) (只) 血乳酸值 鐘血乳酸值 分鐘血乳酸值 下面積值抗疲勞1 1.00 10 1.59±0.31 3.96±0.82 2.49±0.45 92±14*抗疲勞2 0.57 10 1.57±0.26 4.12±0.66 2.53±0.73 95±16*抗疲勞3 0.97 10 1.60±0.30 4.15±0.86 2.91±0.89 99±16抗疲勞4 0.53 10 1.16±0.26 4.79±0.76 2.30±0.68 101±12抗疲勞5 0.93 10 1.33±0.32 5.20±0.94 1.65±0.30 101±16抗疲勞6 0.50 10 1.41±0.41 5.41±0.62 1.71±0.40 105±7抗疲勞7 0.87 10 1.49±0.28 5.26±0.83 2.35±0.30 110±10抗疲勞8 0.43 10 1.63±0.30 5.05±0.61 2.82±1.21 112±14對照組 0 10 1.50±0.31 5.54±0.63 2.53±1.38 116±18

3 結(jié)論與討論

參照《保健食品檢驗(yàn)與評價技術(shù)規(guī)范》（2003 版）有關(guān)條例，在本試驗(yàn)條件下，抗疲勞組方研究中抗疲勞1、2具有緩解體力疲勞作用。通過1、3、5、7 組的比較以及2、4、6、8 組的比較，可以發(fā)現(xiàn)，當(dāng)三種中藥提取物含量一定時，抗疲勞效果隨著牛磺酸配比的增加而增強(qiáng)，或與牛磺酸對自由基的清除效果有關(guān)。牛磺酸可顯著提高體內(nèi)SOD 活性，有效降低體內(nèi)MDA 濃度，通過增強(qiáng)抗氧化防御功能而在一定程度上緩解疲勞產(chǎn)生[12]。

從活性成分功效分析角度出發(fā)， 人參可調(diào)節(jié)多個核心基因進(jìn)而調(diào)節(jié)TNF 及IL-17 等一系列信號通路， 從而發(fā)揮抗疲勞作用[13]。 黃精的提取成分黃精多糖（PCP1）通過調(diào)節(jié)糖和脂質(zhì)的攝取及代謝， 增加小鼠體內(nèi)能量物質(zhì)（肝糖原、肌糖原、ATP）的儲備，降低代謝物（乳酸、尿素氮）堆積，減少代謝物對細(xì)胞及器官的損傷，同時可降低MDA 的含量，提高SOD、GSH-Px 的酶活力，抑制氧化過程，減輕氧化應(yīng)激所導(dǎo)致的疲勞[14]。 枸杞多糖是枸杞子的一種主要的提取物， 可增加肌糖原儲備并改善吞噬細(xì)胞的吞噬功能， 從而提升小鼠抗缺氧能力[15,16]。 鑒于復(fù)方制劑的不同成分間可能存在協(xié)同或拮抗關(guān)系， 如何尋求不同藥物間的最佳配比以增強(qiáng)藥效仍是目前應(yīng)探索的重要課題。