王雅麗，王語同，孫 晶，盧運超，陳天楠，王于眾，舒 銳，吳叢迪，胡 鯤

（1.上海海洋大學，國家水生動物病原庫，上海 201306；2.上海海洋大學，水產(chǎn)科學國家級實驗教學示范中心，上海 201306；3.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部淡水水產(chǎn)種質(zhì)資源重點實驗室，上海 201306；4.廣州觀星農(nóng)業(yè)科技有限公司，廣州 510006）

可控集裝箱循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)（以下簡稱“集裝箱養(yǎng)殖”）由1個養(yǎng)殖集裝箱體和3個生態(tài)處理塘組成。養(yǎng)殖排出水在生態(tài)塘中經(jīng)過過濾、沉淀、增氧、凈化、殺菌等過程后，再重新抽入箱體用于養(yǎng)殖，從而實現(xiàn)生態(tài)循環(huán)水養(yǎng)殖［1］。與傳統(tǒng)土塘養(yǎng)殖模式相比，集裝箱養(yǎng)殖可節(jié)約用水95%以上，節(jié)省土地75%以上，養(yǎng)殖全程實現(xiàn)自動化控制和精細化管理，具有節(jié)約資源、綠色生態(tài)、智能高效等優(yōu)勢［2］。集裝箱養(yǎng)殖模式改變了傳統(tǒng)養(yǎng)殖過程中的一系列缺陷，為中國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)綠色發(fā)展、轉(zhuǎn)型升級注入新力量。

水產(chǎn)品的肉質(zhì)、口感及營養(yǎng)價值是決定其市場價值的重要因素，而不同養(yǎng)殖模式對水產(chǎn)品的生長、肌肉品質(zhì)和營養(yǎng)成分等影響顯著［3－4］。李俊偉等［5］比較了室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖和池塘養(yǎng)殖兩種養(yǎng)殖模式下四指馬鲅（Eleutheronema tetradactylum）的品質(zhì)，認為池塘養(yǎng)殖環(huán)境下的魚體變異系數(shù)較大，有利于良種選育，而室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖則規(guī)格較均勻，有利于生產(chǎn)。劉克明等［6］對循環(huán)水養(yǎng)殖、池塘養(yǎng)殖和全流水養(yǎng)殖3種模式下北極紅點鮭（Salvelinusleucomaenis）的肌肉品質(zhì)進行了分析，認為3種養(yǎng)殖模式下肌肉營養(yǎng)成分組成差異顯著，全流水養(yǎng)殖的北極紅點鮭肌肉蛋白質(zhì)和氨基酸含量最高，而循環(huán)水養(yǎng)殖北極紅點鮭的脂肪酸含量尤其是二十碳五烯酸（eicosapentaenoic acid，EPA）＋二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid，DHA）含量最高；周彬等［7］對循環(huán)流水槽養(yǎng)殖與池塘精養(yǎng)草魚（Ctenopharyngodonidellus）的營養(yǎng)品質(zhì)進行了對比，發(fā)現(xiàn)兩者肌肉中脂肪酸和部分微量元素含量存在顯著差異；高露姣等［8］研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過越冬養(yǎng)殖和海上網(wǎng)箱養(yǎng)殖的紅鰭東方鲀（Takifugu rubripes）肌肉品質(zhì)顯著好于土池養(yǎng)殖的個體。綜上所述，目前對于工廠化養(yǎng)殖模式下水產(chǎn)品的品質(zhì)研究較多，但對可控式集裝箱養(yǎng)殖模式下水產(chǎn)品的品質(zhì)研究尚較少見。

烏鱧（Channaargus）是中國特有的淡水養(yǎng)殖品種之一，因其骨刺少、肉質(zhì)鮮美、蛋白質(zhì)含量高、脂肪含量低，且具有生肌補血、促進傷口愈合等功效，深受消費者喜愛［8－9］。

本研究以傳統(tǒng)池塘養(yǎng)殖模式作為對照，比較了其與可控式集裝箱養(yǎng)殖模式下烏鱧的肌肉營養(yǎng)價值、組織形態(tài)及腸道菌群多樣性差異，以期對可控式集裝箱養(yǎng)殖模式做出綜合評價，為相關(guān)研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，并為傳統(tǒng)養(yǎng)殖向新型養(yǎng)殖技術(shù)轉(zhuǎn)型提供參考。

1 材料與方法

1.1 實驗材料及養(yǎng)殖處理

供試烏鱧幼魚購自廣東海洋與水產(chǎn)高科技園，烏鱧魚苗規(guī)格：體質(zhì)量50 g，體長5～7 cm，于廣東肇慶市鼎湖區(qū)沙浦鎮(zhèn)觀星農(nóng)業(yè)數(shù)字化水產(chǎn)養(yǎng)殖示范基地（集裝箱養(yǎng)殖，JW）和廣東肇慶市鼎湖區(qū)沙浦鎮(zhèn)烏鱧養(yǎng)殖塘（傳統(tǒng)池塘養(yǎng)殖，TW）開展不同養(yǎng)殖模式實驗研究。同批魚苗分為2組，每組3個重復，2018年7月18日投放到3個規(guī)格為（6.1 m長×2.4 m寬×2.8 m高）集裝箱和3個面積為1 800 m2、2 000 m2、2 000 m2，水深2.5 m的傳統(tǒng)池塘中。養(yǎng)殖密度均為6 kg·m－3，養(yǎng)殖水溫為25.5～29.5℃，溶解氧＞5 mg·L－1。集裝箱固定在池塘水源附近，養(yǎng)殖時抽取生態(tài)池塘中上層富氧水，經(jīng)適當濃度的臭氧殺菌后讓其流入集裝箱內(nèi)，進行流水養(yǎng)殖。養(yǎng)殖排出的尾水經(jīng)過固液分離后導入三級生態(tài)池塘，經(jīng)過生態(tài)凈化和臭氧消毒后再抽回集裝箱內(nèi)進行循環(huán)利用；傳統(tǒng)池塘水源為附近河水，進水前經(jīng)篩網(wǎng)過濾。

每天向兩種模式下的烏鱧投喂2次（9∶00、16∶00）同種膨化顆粒飼料（豆粕、魚粉、魚油、植物油等，粗蛋白質(zhì)50.15%、粗脂肪13.27%、灰分12.99%，廣州恒興飼料），最初日投喂量約占魚總體質(zhì)量的3%，養(yǎng)殖過程中按照魚體規(guī)格及前1 d的攝食量做適當調(diào)整，以投料后1 h內(nèi)吃完為適宜。次年10月11日結(jié)束養(yǎng)殖，準備進行實驗處理。

1.2 樣品采集及取樣

養(yǎng)殖烏鱧于實驗開始前饑餓處理24 h，從2個養(yǎng)殖模式隨機選取活力較好、大小均一的烏鱧個體，每個重復取2尾，每組6尾，共12尾，樣本活體運回實驗室。2組烏鱧在冰面上進行解剖，取長寬約1 cm左右的背部肌肉組織，用無菌水沖洗3遍后放入Bouin’s固定液（上海蘭拓生物有限公司）中保存待用；取背部兩側(cè)肌肉組織在冰浴條件下用FW100組織搗碎機（天津市泰斯特儀器有限公司）攪拌混合成魚糜，取10 g經(jīng)真空冷凍干燥后置于－20℃冰箱中保存用于氨基酸、脂肪酸和微量元素的測定；從每個集裝箱和池塘中隨機挑選1尾烏鱧，每組3尾，共6尾，在無菌條件下取出腸道組織，將腸道組織內(nèi)容物擠出并收集到2 mL無菌凍存管中，液氮預冷30 min后，－80℃保存，用于腸道菌群組成的測定；取前腸部分用無菌水沖洗3遍后放入Bouin’s固定液中保存待用。

1.3 肌肉常規(guī)成分檢測

氨基酸含量的測定參照GB／T5009.124-2016進行。脂肪酸含量的測定參照GB5009.168-2016進行。微量元素（鉛Pb、砷As、鎘Cd、銅Cu、汞Hg、鉻Cr、硒Se和鋅Zn）的測定分別參照GB5009.12-2017、GB5009.11-2014、GB5009.15-2014、GB5009.13-2017、GB009.17-2014、GB5009.123-2014、GB12399-1996和GB5009.14-2017進行。

1.4 組織切片

將肌肉組織和腸道組織取出，分別經(jīng)過濃度為70%、80%、90%、95%和100%的梯度乙醇脫水，并置于二甲苯（上海蘭拓生物有限公司）中透明，最后包埋于低熔點石蠟中使用Lecia-RM2235型切片機（上海隆合實業(yè)有限公司）切片機橫向連續(xù)切片，厚度為7μm，而后展片于清潔的載片上，采用蘇木精-伊紅（HE）染色，中性樹膠封片。使用OlympusBX51（上海普赫光電科技有限公司）顯微鏡進行組織形態(tài)觀察，用Image-pro plus 6.0（Media Cybernetics，Inc.，Rockville，MD，USA）圖像處理軟件進行比例尺和符號的添加。

1.5 腸道菌群的測定

1.5.1 DNA抽提和PCR擴增

微生物群落總DNA的提取參照E.Z.N.A.?soil DNA kit（Omega Bio-tek，Norcross，GA，U.S.）的說明書方法進行，使用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA的提取質(zhì)量，用NanoDrop2000分光光度計（美國）鑒定DNA濃度和純度；對16S rRNA基因的V3～V4可變區(qū)進行PCR擴增，擴增引物為：338F：5′-ACTCCTACGGGAGCAGCAG-3′和806R：5′-GGACTACHVGGGTWCTAAT-3′。PCR總反應(yīng)體系為：DNA聚合酶0.4μL，模板10 ng，5μmol·L－1上游引物0.8μL，5μmol·L－1下游引物0.8μL，5×TransStart Fast Pfu緩沖液4 μL，2.5 mmol·L－1dNTPs 2μL，加滅菌水補足至20μL。PCR擴增條件為：95℃預變性3 min，95℃變性30 s，55℃退火30 s，72℃延伸30 s，進行27個循環(huán)，之后72℃穩(wěn)定延伸10 min。擴增產(chǎn)物置于4℃保存。

1.5.2 Illumina Miseq測序

用2%瓊脂糖凝膠回收PCR產(chǎn)物，用AxyPrep DNA Gel Extraction Kit（Axygen Biosciences，Union City，CA，USA）對回收產(chǎn)物進行純化，用2%瓊脂糖凝膠電泳對純化產(chǎn)物進行檢測，使用QuantusTMFluorometer（Promega，USA）對回收產(chǎn)物進行定量測試。用NEXTFLEX Rapid DNA-Seq Kit進行建庫：1）接頭鏈接；2）用磁珠自連片段對接頭進行篩選并去除；3）PCR擴增對文庫模板進行富集；4）用磁珠回收PCR產(chǎn)物并構(gòu)建文庫。樣品送至上海美吉生物醫(yī)藥科技有限公司進行測序。

1.6 數(shù)據(jù)處理與分析

實驗結(jié)果以平均值±標準差（mean±SD）表示。用Excel 2010對原始數(shù)據(jù)進行整理，并用SPSS 21軟件進行獨立樣本t檢驗，分析兩組間測量參數(shù)的差異顯著性，設(shè)置0.05為顯著性水平。用Trimmomatic軟件對原始測序序列進行質(zhì)控，用Flash軟件對去雜后的雙端數(shù)據(jù)進行拼接。用UPARSE軟件（version 7.1）按照97%的相似度標準對序列進行OTU聚類并剔除嵌合體。用RDP classifier（http：／／rdp.cme.msu.edu／）對每條序列進行物種分類注釋，最后比對Silva數(shù)據(jù)庫（SSU128），設(shè)置比對閾值為70%，對得到的菌群進行比對鑒定。

2 結(jié)果與分析

2.1 兩種養(yǎng)殖方式烏鱧肌肉營養(yǎng)成分對比

2.1.1 氨基酸組成和含量對比

兩種養(yǎng)殖模式的烏鱧肌肉氨基酸組成及含量檢測結(jié)果如表1所示。結(jié)果顯示，18種常見氨基酸中，未檢測到色氨酸和半胱氨酸，檢測到7種必需氨基酸（EAA）、2種半必需氨基酸（HEAA）及7種非必需氨基酸（NEAA）。TW組總必需氨基酸含量（∑EAA）顯著高于JW組（P＜0.05），總氨基酸含量（∑TAA）、總半必需氨基酸含量（∑HEAA）、總非必需氨基酸含量（∑NEAA）兩組之間無顯著差異（P＞0.05）。JW組中單個氨基酸谷氨酸（Glu）、脯氨酸（Pro）和甘氨酸（Gly）均顯著高于TW組（P＜0.05）；甲硫氨酸（Met）、賴氨酸（Lys）和天冬氨酸（Asp）顯著低于TW組（P＜0.05）。JW組總鮮味氨基酸（∑DAA）含量顯著高于TW組（P＜0.05），其中天冬氨酸（Asp）、谷氨酸（Glu）和甘氨酸（Gly）含量存在顯著性差異（P＜0.05），丙氨酸（Ala）含量無顯著差異（P＞0.05），說明JW組烏鱧更具鮮甜風味。TW、JW養(yǎng)殖模式的∑EAA／∑TAA和∑EAA／∑NEAA比值分別為41.59%、39.16%和84.59%、76.24%。

表1 兩種養(yǎng)殖模式的烏鱧肌肉氨基酸組成及含量比較Tab.1 Comparison of amino acid composition and content in muscle of C.argus under two cultivation modes

2.1.2 脂肪酸組成和含量比較

兩種養(yǎng)殖模式的烏鱧肌肉脂肪酸含量及組成如表2所示。結(jié)果顯示：TW組烏鱧肌肉中檢測到脂肪酸10種，包括3種飽和脂肪酸、3種單不飽和脂肪酸和4種多不飽和脂肪酸；JW組烏鱧肌肉中檢測到脂肪酸11種，包括3種飽和脂肪酸、3種單不飽和脂肪酸和5種多不飽和脂肪酸。比較兩組魚的總飽和脂肪酸（∑SFA）、總單不飽和脂肪酸（∑MUFA）和總多不飽和脂肪酸（∑PUFA），發(fā)現(xiàn)∑SFA含量和∑MUFA含量無顯著差異（P＞0.05），∑PUFA含量TW組顯著高于JW組（P＜0.05）。TW組中只檢測到二十二碳六烯酸（DHA），未檢測到二十碳五烯酸（EPA）；JW組中EPA和DHA均被檢出，且JW組DHA顯著高于TW組（P＜0.05）。

表2 兩種養(yǎng)殖模式的烏鱧肌肉中脂肪酸組成與含量比較Tab.2 Comparison of fatty acid composition and content in muscle of C.argus under two cultivation modes

2.1.3 微量元素組成和含量比較

兩種養(yǎng)殖模式的烏鱧肌肉中微量元素含量檢測結(jié)果如表3所示。結(jié)果顯示：5種有害金屬（As、Cr、Cd、Hg、Pb）在TW組烏鱧肌肉組織中檢出4種（As、Cr、Cd、Hg），在JW組鱧肌肉組織中檢出5種（As、Cr、Cd、Hg、Pb）。根據(jù)食品安全國家標準（GB2762-2017），兩種養(yǎng)殖模式下5種有害金屬平均含量均低于標準限值，可以安全食用。3種微量元素（Cu、Se、Zn）在兩組烏鱧肌肉中均被檢出，其中JW組Se的含量顯著高于TW組（P＜0.05），Cu和Zn的含量在兩組中差異不顯著（P＞0.05），但兩組中Zn的含量均高于其他元素。

表3 兩種養(yǎng)殖模式的烏鱧肌肉中微量元素組成與含量比較Tab.3 Comparison of micro elemnets in muscle of C.argus under two cultivation modes

2.2 肌肉與腸道的微觀組織結(jié)構(gòu)分析

兩種養(yǎng)殖模式的烏鱧肌肉組織形態(tài)的比較見圖1-a，b。兩種模式烏鱧肌肉的肌纖維紋理清晰為不規(guī)則的多邊形，基本結(jié)構(gòu)無差異，肌漿中含有豐富的肌原纖維。TW肌間脂肪多于JW。JW肌纖維橫截面積和直徑大于TW。JW肌纖維出現(xiàn)明顯的彎曲現(xiàn)象，肌纖維之間有間隙，且間隙較大。

兩種養(yǎng)殖模式的烏鱧腸道組織形態(tài)的比較見圖1-c，d。兩組烏鱧的腸道組織切片可以看出，腸道絨毛結(jié)構(gòu)完整、清晰，上皮細胞排列整齊，細胞核大且都位于細胞基部，梳狀緣排列整齊。TW的杯狀細胞數(shù)量明顯少于JW，其梳狀緣排列更緊密，而JW的腸道皺壁厚度更厚，隱窩更深。

圖1 兩種模式養(yǎng)殖的烏鱧的肌肉、腸道組織結(jié)構(gòu)Fig.1 Muscle and intestinal tissue structure of C.argus under two cultivation modes

2.3 腸道菌群

2.3.1 Illumina測序結(jié)果及α-多樣性分析

高通量測序共獲得299 568條序列，各樣品獲得的序列數(shù)介于44 098～56 432，平均每個樣品有49 928條序列，覆蓋率＞99%，表明樣本的OTU足夠代表樣本的多樣性。JW組和TW組的OUT個數(shù)為1 071、1 131，共有OUT數(shù)728個（圖2）。

圖2 JW組和TW組Venn圖Fig.2 OTU Venn analysis of JW and TW

基于OTU計算樣品的α-多樣性（表4），采用Shannon指 數(shù)、ACE指 數(shù)、Chao1指 數(shù) 和Simpson多樣性指數(shù)對腸道菌群進行α-多樣性分析。其中JW組ACE指數(shù)、Chao1指數(shù)高于TW組，說明JW組烏鱧腸道中菌群總數(shù)最多。TW組OUT數(shù)和Shannon指數(shù)高于JW組，且Simpson多樣性指數(shù)顯著低于JW組（P＜0.05），說明TW組烏鱧腸道中菌群多樣性最好。

表4 兩種模式養(yǎng)殖的烏鱧腸道微生物統(tǒng)計分析Tab.4 Statistical analysis of intestinal microbial diversity in C.argus under two cultivation modes

2.3.2 微生物物種組成差異

在科的分類水平上，分析兩種養(yǎng)殖模式下烏鱧腸道微生物的組成差異。由圖3和圖4可見，消化鏈球菌科（Peptostreptococcaceae）、梭菌科（Clostridiaceae＿1）在JW組烏鱧腸道中豐度最高，是JW組的優(yōu)勢菌群；微桿菌科（Microbacteriaceae）、梭桿菌科（Fusobacteriaceae）在TW組烏鱧腸道中豐度最高，是TW組的優(yōu)勢菌群。這4個科的微生物在兩種模式養(yǎng)殖的烏鱧種均被檢測出，但占比差異明顯，表明不同養(yǎng)殖模式對烏鱧腸道中菌群的比例產(chǎn)生了巨大的影響。由圖4可見，TW組整體顏色偏紅，JW組整體顏色偏藍，說明TW組的烏鱧腸道中菌群豐度高于JW組。TW組烏鱧腸道中微桿菌科、分枝桿 菌科（Mycobacteriaceae）、莖桿菌科（Caulobacteraceae）等科豐度明顯高于JW組。

圖3 兩種養(yǎng)殖模式下烏鱧腸道微生物在科水平上的物種組成Fig.3 Species composition of intestinal microbial samples of C.argus at family level under two cultivation modes

圖4 兩種養(yǎng)殖模式下烏鱧腸道微生物樣品的物種表達譜Fig.4 Heapmap of species expression of intestinal microbial samples of C.argus at family level under two cultivation modes

3 討論

3.1 兩種養(yǎng)殖模式對烏鱧肌肉營養(yǎng)成分的影響

氨基酸的組成及其含量是水產(chǎn)品蛋白質(zhì)品質(zhì)優(yōu)劣的決定因素。在兩組烏鱧肌肉中均檢出16種常見氨基酸，氨基酸組成差別較小，且根據(jù)FAO／WHO的理想模式，質(zhì)量較好的蛋白質(zhì)，其組成氨基酸的∑EAA／∑TAA為40%左右，∑EAA／∑NEAA的比值在60%以上［10］。而兩種模式的烏鱧肌肉氨基酸組成與比例均符合指標要求，其氨基酸具有良好的平衡性，屬于優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)源。谷氨酸在人體組織代謝過程中起解除氨毒害的作用［11］，也是參與腦組織生化代謝和多種生理活性物質(zhì)合成的重要氨基酸［12］。研究發(fā)現(xiàn)，兩種模式下烏鱧肌肉中含量最高的氨基酸為谷氨酸（Glu），且JW組中谷氨酸（Glu）含量顯著高于TW組（P＜0.05），占JW組 氨 基 酸 總 量 的15.89%。魚類肌肉鮮味程度取決于鮮味氨基酸的總量［13］。在4種呈鮮味氨基酸中，JW組總鮮味氨基酸（∑DAA）含量顯著高于TW組（P＜0.05），同時天冬氨酸（Asp）、谷氨酸（Glu）和甘氨酸（Gly）含量存在顯著性差異（P＜0.05）。甘氨酸（Gly）能產(chǎn)生甜味，天冬氨酸（Asp）和谷氨酸（Glu）能產(chǎn)生咸味和鮮味［14］。由此可以看出，集裝箱模式的烏鱧的鮮美程度優(yōu)于傳統(tǒng)池塘模式且口感更加豐富。

食物的脂肪酸含量和組成是評價食物營養(yǎng)價值的重要指標，在TW組烏鱧肌肉中檢測到10種脂肪酸，在JW組烏鱧肌肉中檢測到11種脂肪酸。多不飽和脂肪酸是指含有2個或多個雙肩的長鏈脂肪酸，具有獨特生理功能，且不飽和程度越高，營養(yǎng)價值也越高［15］，尤其是ω-3系列多不

飽和脂肪酸（∑ω-3 PUFA），是人體生命活動必不可少的［16－17］。根據(jù)結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)，TW組總多不飽和脂肪酸（∑PUFA）含量顯著高于JW組（P＜0.05）。但從ω-3系列多不飽和脂肪酸上看，JW組有較高的二十碳五烯酸（EPA）和二十二碳六烯酸（DHA），而TW組中只檢測到DHA，且JW組DHA顯著高于TW組（P＜0.05），此外JW組和TW組中EPA＋DHA含量占脂肪酸總量的比例分別為：10.96%和5.71%。EPA和DHA是人體必需脂肪酸，在防治心腦血管疾病、抗癌、抗炎癥、促進兒童大腦發(fā)育、治療老年癡呆以及維持人體細胞功能和基因表達等方面有較好的功效［18］。因此對比之下，集裝箱模式烏鱧具有更強的保健功能?！芇UFA與∑SFA的比值（＞0.4）［19］以及∑ω-6與∑ω-3的比值（＜4）［20－22］是衡量脂肪酸營養(yǎng)價值的重要指標，而JW和TW組的烏鱧肌肉的∑PUFA／∑SFA分別為73.08%和41.95%，∑ω-6／∑ω-3分別為6.07、1.98，因此集裝箱模式的烏鱧肌肉的脂肪酸組成與比例更為均衡，營養(yǎng)價值更好。

兩種養(yǎng)殖模式的烏鱧肌肉中檢出的5種有害重金屬As、Cd、Cr、Hg和Pb的平均含量均低于標準限值，符合國家食品安全標準，3種微量元素（Cu、Se、Zn）中，只有Se的含量存在差異（JW＞TW，P＜0.05）。Se含有豐富的人體細胞的活性因子，具有防癌、抗癌、抗氧化等功效［18］，因此，集裝箱模式養(yǎng)殖的烏鱧保健功能更好。在各微量元素之間，兩組中Zn的含量均顯著高于其他元素（P＜0.05）。Zn對兒童的生長及智力發(fā)育起到至關(guān)重要的作用，同時有調(diào)節(jié)人體免疫功能的作用［23］。因此，兩種模式養(yǎng)殖的烏鱧均可為人類提供豐富的Zn。

3.2 兩種養(yǎng)殖模式對烏鱧組織形態(tài)的影響

徐家歡等［24］研究表明，每束肌纖維數(shù)量越多、肌纖維細，則肉質(zhì)越細嫩，即肌纖維密度大、直徑小可以使肌肉保持其營養(yǎng)、水分適中，從而有良好的適口性。肌肉內(nèi)脂肪含量則直接影響肉質(zhì)的風味和多汁性，隨著肌肉內(nèi)脂肪含量的增加，肉質(zhì)的嫩度和口感相應(yīng)會得到改善［25－26］。本研究中根據(jù)烏鱧肌肉切片結(jié)果發(fā)現(xiàn)，TW組烏鱧的肌纖維比JW組的更細，體現(xiàn)為密度大、直徑??；TW組的肌間脂肪高于JW組。因此，傳統(tǒng)池塘養(yǎng)殖模式的烏鱧肉質(zhì)口感更好。肌纖維橫截面積是描述肌肉組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的重要參數(shù)，營養(yǎng)狀況和運動量對肌纖維橫截面積的大小有重要影響［27－29］。本研究中JW組烏鱧肌肉的肌纖維橫截面積更大，說明集裝箱養(yǎng)殖模式的烏鱧運動量較大，而魚體的生長與肌纖維橫截面積成正比例關(guān)系［27－29］，說明集裝箱養(yǎng)殖模式的烏鱧生長更快。

腸道在水生動物的營養(yǎng)消化吸收過程中起重要作用，其組織結(jié)構(gòu)是否完整對魚類消化能力具有決定性作用［30］。腸道黏膜層的上皮由單層柱狀上皮細胞構(gòu)成，其中散布不少杯狀細胞。杯狀細胞能分泌消化酶，且分泌黏液，借以保護上皮細胞［31］。TW組烏鱧腸道的杯狀細胞數(shù)量明顯少于JW，說明集裝箱養(yǎng)殖模式的烏鱧腸道對營養(yǎng)的吸收更好，且能更好的保護腸道健康。腸道隱窩是腸壁凹陷的結(jié)構(gòu)，隱窩深度影響動物對營養(yǎng)物質(zhì)吸收的能力，皺襞越高越寬越濃密，說明腸道吸收表面積越大，越有利于提高營養(yǎng)物質(zhì)的吸收效率［32］。JW組烏鱧的腸道皺壁相比TW組更寬，隱窩更深，說明集裝箱養(yǎng)殖模式的烏鱧腸道對營養(yǎng)的吸收效率更高。

3.3 兩種養(yǎng)殖模式對烏鱧腸道菌群的影響

腸道有益菌屬可通過改善宿主免疫調(diào)節(jié)功能、營養(yǎng)吸收能力和內(nèi)環(huán)境調(diào)節(jié)能力來促進宿主生長［33］，而有害菌屬則會增加腸道黏膜層的通透性，從而導致細菌和其他大分子穿過黏膜屏障［34］。因此，建立良好的腸道微生態(tài)系統(tǒng)對于魚類健康生長至關(guān)重要。

上述烏鱧腸道菌群多樣性研究結(jié)果表明，兩種模式下養(yǎng)殖的烏鱧腸道細菌優(yōu)勢菌群種類和數(shù)量方面差異顯著，TW組烏鱧腸道內(nèi)細菌的菌落種類多樣性和OUT豐富度均高于JW組，而JW組烏鱧腸道中菌群總數(shù)最多。GHANBARI等［35］認為，魚類腸道微生物的構(gòu)成不僅與宿主特性密切相關(guān)，還與飲食、環(huán)境和生態(tài)因素（如水環(huán)境中的細菌）等有關(guān)，是多種因素共同作用的結(jié)果。本研究中，投喂飼料在整個實驗過程中保持一致，因此水環(huán)境是導致兩組腸道菌群差異的主要因素。梭菌科的普拉梭菌（Faecalibacterium prausnitzi）具有抗炎效應(yīng)，可明顯改善腸道炎癥；消化鏈球菌科主要起促進腸道吸收養(yǎng)分的作用［36］。本研究發(fā)現(xiàn)，消化鏈球菌科、梭菌科是JW組烏鱧腸道中豐度最高的2個科。張植強等［37］研究表明，烏鱧的活動對底層水體的攪動作用較大，池塘沉積物中存在大量的微生物，水體攪動帶動沉積物中大量微生物進入水體，而集裝箱養(yǎng)殖模式由于使用循環(huán)水且會自動沉于箱體底部物質(zhì)排出而水質(zhì)更優(yōu)。所以兩種養(yǎng)殖模式水環(huán)境會有差異，推測可能是這種差異造成TW組和JW組烏鱧腸道菌群豐富度和多樣性的差異。

4 小結(jié)

本研究表明，兩種模式下養(yǎng)殖的烏鱧肌肉蛋白質(zhì)含量豐富且脂肪含量相對適中，氨基酸種類齊全且平衡性好，必需氨基酸組成符合FAO／WHO的理想模式，說明本研究中的兩種模式養(yǎng)殖的烏鱧是營養(yǎng)價值高的優(yōu)質(zhì)蛋白源。但集裝箱模式的烏鱧的鮮美程度更高，脂肪酸組成和比例方面更好，且有較強的保健功能。集裝箱模式養(yǎng)殖的烏鱧肌纖維橫截面積更大，表明魚體生長更快，腸道隱窩更深，表明腸道對營養(yǎng)的吸收效率更高。根據(jù)微生物多樣性檢測結(jié)果，集裝箱模式養(yǎng)殖的烏鱧因為水質(zhì)較好可能擁有更少的微生物，其中消化鏈球菌科、梭菌科是JW腸道菌落中的優(yōu)勢菌，具有改善腸道消化吸收、免疫等功能，能更好的適應(yīng)集裝箱養(yǎng)殖模式。綜上所述，集裝箱養(yǎng)殖的烏鱧與傳統(tǒng)池塘養(yǎng)殖的烏鱧相比具有一定優(yōu)勢，但也存在一些不足，本研究結(jié)果可為進一步改善可控式集裝箱養(yǎng)殖模式提供理論依據(jù)。