丁 婧，羅 云，汪宏梅

（江蘇省泰興市人民醫(yī)院輸血科 江蘇 泰興 225400）

血型不規(guī)則抗體是指不包括A、B、O型系統(tǒng)的其他抗體，常見的有Rh、MNSs、Lewis等血型系統(tǒng)的抗體。注射、母嬰血型不合妊娠等途徑是這些抗體的主要形成渠道，可導(dǎo)致免疫溶血性輸血反應(yīng)，也會(huì)使交叉配血難度變大。同時(shí)，也是引發(fā)新生兒溶血?。℉DN）的常見原因之一。胎兒血型基因來自于母親與父親，占比均為50%[1]。若來自父親的基因正好是母親所沒有的，胎兒紅細(xì)胞上父本基因編碼的抗原可能會(huì)對(duì)母體產(chǎn)生刺激作用，母體會(huì)生成相應(yīng)抗體，而這類抗體經(jīng)過胎盤與胎兒紅細(xì)胞作用便會(huì)導(dǎo)致溶血發(fā)生。此病可造成胎兒貧血、水腫、早產(chǎn)，嚴(yán)重的可導(dǎo)致新生兒死亡。為此，有必要加強(qiáng)產(chǎn)前篩查，做好對(duì)此病的防范工作，確保輸血安全與母嬰安全?；诖?，本次研究選取2018年6月—2020年6月在本院行產(chǎn)前檢查孕產(chǎn)婦7 808例，均接受不規(guī)則抗體檢測(cè)，回顧性分析其臨床資料，觀察不規(guī)則抗體檢測(cè)在產(chǎn)前檢查中的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)告如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2018年6月—2020年6月收治的孕產(chǎn)婦中選取7 808例為研究對(duì)象，年齡22～42歲，平均年齡（28.6±5.3）歲；產(chǎn)次1～4次，平均為（2.0±0.4）次。2018年6月—12月有2 306例，Rh（-）22例；2019年1月—12月有3 862例，Rh（-）共30例；2020年1月—6月有1 640例，Rh（-）共12例，參與研究的孕產(chǎn)婦均知情且同意并簽署同意書。

1.2 方法

1.2.1儀器與試劑 不規(guī)則抗體檢測(cè)中使用的儀器包括TD-3A型血型血清學(xué)離心機(jī)，F(xiàn)YQ型免疫微柱孵育器，均來自長春博德生物技術(shù)有限責(zé)任公司。使用的抗人球蛋白檢測(cè)卡，由長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司生產(chǎn)。不規(guī)則抗體篩選紅細(xì)胞由長春博訊生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。不規(guī)則抗體鑒定譜細(xì)胞來自上海血液中心。

1.2.2檢測(cè)方法 （1）試管鹽水法。在3個(gè)試管內(nèi)分別滴入一滴相應(yīng)的濃度為2%～5%不規(guī)則抗體篩選紅細(xì)胞懸液，將待檢者的血漿各兩滴滴入3個(gè)孔內(nèi)。混勻后進(jìn)行15 s離心處理，速率為3 400 r/min，輕輕晃動(dòng)試管觀察有無發(fā)生凝集。如果凝集說明不規(guī)則抗體呈陽性。孕婦血型為Rh陰性血的，還需接受抗人球蛋白檢測(cè)，用于確定不規(guī)則抗體的檢查結(jié)果[2]。（2）微柱凝膠抗人球蛋白卡法：準(zhǔn)備一張抗人球蛋白凝膠卡，從3支試管中分別取50μL濃度為0.8%～1%不規(guī)則抗體篩選紅細(xì)胞懸液，將其倒入對(duì)應(yīng)的3個(gè)凝膠孔內(nèi)。將待檢者的血漿滴入3個(gè)孔內(nèi)，分別為50μL，然后，微柱凝膠卡需保持垂直豎立狀態(tài)，輕輕敲動(dòng)加樣槽，使血漿與紅細(xì)胞懸液混合均勻，將其放入FYQ型免疫微柱孵育器中，溫度為37℃，約15 min后再放入TD-3A型血型血清學(xué)離心機(jī)中進(jìn)行離心處理5 min，觀察記錄結(jié)果。若抗原抗體復(fù)合物凝集在微柱凝膠孔的表面或膠中說明為陽性；若紅細(xì)胞凝聚在微柱凝膠孔的尖底部則說明為陰性[3]。（3）鑒定不規(guī)則抗體：孕婦血型為Rh陰性血的，還需接受抗人球蛋白檢測(cè)，用于確定不規(guī)則抗體的檢查結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。正態(tài)分布的計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用頻數(shù)和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 分析孕產(chǎn)婦不規(guī)則抗體檢測(cè)結(jié)果

2018年6月—2020年6月不規(guī)則抗體檢出情況，7 808例孕產(chǎn)婦中共檢出64例陽性，陽性檢出率為0.820%，見表1。

表1 2018年6月—2020年6月Rh（-）檢出情況

2.2 孕產(chǎn)婦不規(guī)則抗體陽性分布情況

本次所檢出的64例陽性紅細(xì)胞不規(guī)則抗體孕產(chǎn)婦中，包括的抗體系統(tǒng)有Rh系統(tǒng)、MNS系統(tǒng)、Lewis系統(tǒng)、P血型系統(tǒng)等。檢出率最高的是Rh系統(tǒng)，檢出率為34.375%，見表2。

表2 64例孕產(chǎn)婦不規(guī)則抗體陽性分布情況

3.討論

不規(guī)則抗體常常導(dǎo)致溶血性輸血反應(yīng)、新生兒溶血病。此類抗體也易增加血型鑒定難度，影響配血成功[4]。此類抗體多見于有輸血史的人、有妊娠史的女性以及新生兒，可導(dǎo)致嚴(yán)重的免疫性溶血反應(yīng)，包括孕婦流產(chǎn)、死胎，新生兒膽紅素腦病、貧血、黃疸、智力低下[5]。因此，我國衛(wèi)生部明確規(guī)定對(duì)于需要輸血的患者及產(chǎn)婦，都應(yīng)在輸血前接受相關(guān)抗體篩查檢測(cè)。目前，臨床上主要采用紅細(xì)胞血型抗體檢測(cè)技術(shù)，不僅操作簡單、迅速，而且干擾因素少，結(jié)果便于觀察與保存。如果孕婦屬于O型血，丈夫需進(jìn)行A、B、AB型血特異性抗體篩查，結(jié)果為陽性說明已被致敏，若Rh血型不合抗體效價(jià)大于1:32,說明病情嚴(yán)重，ABO血型不合抗體效價(jià)大于1:512說明病情嚴(yán)重。針對(duì)疑似有溶血病的胎兒應(yīng)盡快采取相應(yīng)的干預(yù)措施，盡量防范溶血病的發(fā)生，減小對(duì)孕婦與胎兒的不利影響。

抗體篩選細(xì)胞難以將全部抗原篩查都覆蓋到，因此，無法篩查出所有的抗體。一個(gè)試驗(yàn)結(jié)果為陰性并不代表血清內(nèi)不存在不規(guī)則抗體，只能說明運(yùn)用相關(guān)檢測(cè)技術(shù)時(shí)，缺少與篩查細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)的抗體。因此，在檢測(cè)不規(guī)則抗體的時(shí)候，孕婦血型抗體性質(zhì)的差異性決定了必須選取恰當(dāng)?shù)臋z測(cè)方法。如果發(fā)生漏檢，將直接給孕婦以及胎兒造成威脅。有研究顯示，對(duì)589例孕婦采用兩種不同檢測(cè)方法檢測(cè)不規(guī)則抗體，結(jié)果顯示，傳統(tǒng)試管抗人球蛋白法的陽性檢出率只有0.17%，說明此法的敏感性較低，而微柱凝膠法的陽性檢出率達(dá)到0.85%[6]。雖然兩種方法的陽性檢出率相差5倍，但二者的差異不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。造成這一結(jié)果的原因主要是專科醫(yī)院的性質(zhì)所決定。婦產(chǎn)科醫(yī)院極少存在反復(fù)輸血的病例，大多數(shù)孕婦只有一胎，不規(guī)則抗體檢出率不高。

本次研究中64例不規(guī)則抗體為陽性的孕產(chǎn)婦中，主要包括Rh系統(tǒng)、MNS系統(tǒng)以及Lewis系統(tǒng)，大多數(shù)為Rh系統(tǒng)。由于Rh系統(tǒng)中D抗原免疫原性是最高的，在人群體中的陽性率非常高，為99.7%。本次研究中發(fā)現(xiàn)Rh血型系統(tǒng)中檢出最多的屬于抗-E抗體，而抗-D抗體僅有3例，說明抗-D抗體的檢出率比抗-E抗體的檢出率明顯更低。原因可能是近年來國家已經(jīng)把D抗原作為輸血前的常規(guī)血型檢測(cè)，特別是對(duì)RhD陰性的患者采用同型輸注的方法。RhD陰性的女性在懷孕后，若胎兒為RhD陽性，則需注射抗D免疫球蛋白，用于封閉進(jìn)入母體的RhD陽性血，進(jìn)而可以防止母體在輸血時(shí)或懷孕期間產(chǎn)生抗-D抗體。此外，E抗原檢測(cè)與同型輸注不易受到關(guān)注，常常被忽視。Rh血型不規(guī)則抗體是除ABO血型系統(tǒng)抗體之外最典型的一類紅細(xì)胞血型抗體，易導(dǎo)致新生兒溶血病與免疫性溶血性輸血反應(yīng)。有研究顯示，孕婦中Rh不規(guī)則抗體檢出的陽性率較高，比例為52.12%[6]。本研究64例孕婦中共檢出Rh抗體22例，陽性檢出率為34.375%。因此，需要輸血的患者應(yīng)盡量做常規(guī)Rh抗原表型檢測(cè)，并采用Rh抗原同型輸注，從而防止不規(guī)則抗體的形成。MNS系統(tǒng)中主要為抗-M，多數(shù)為天然抗體，在37℃下沒有反應(yīng)，也不會(huì)導(dǎo)致溶血性輸血反應(yīng)或新生兒溶血病，但要注意在術(shù)中患者體溫過低麻醉狀態(tài)中，也可能出現(xiàn)輸血反應(yīng)。因此，如果患者檢測(cè)出有特異性抗體，不管抗體的性質(zhì)屬于IgG，還是IgM，建議都選用對(duì)應(yīng)抗原陰性的紅細(xì)胞進(jìn)行輸注。

綜上所述，伴隨二胎政策的推出，多次妊娠的孕婦數(shù)量有所增加，不規(guī)則抗體陽性率也隨著提高。對(duì)于孕產(chǎn)婦建議在產(chǎn)前接受常規(guī)ABO與RhD血型檢測(cè)的同時(shí)，還應(yīng)接受不規(guī)則抗體檢測(cè)，盡量確保輸血安全與母嬰安全。