石曉麗，閆婧，唐波，寶山，那松巴乙拉

（1 包頭市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心，內(nèi)蒙古 包頭；2 內(nèi)蒙古自治區(qū)國(guó)際蒙醫(yī)醫(yī)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特）

0 引言

由內(nèi)蒙古國(guó)際蒙醫(yī)醫(yī)院提供的處方制劑額勒吉根·綽斯-25 丸。處方含驢血粉、木棉花、楓香脂、決明子、紅花、梔子、苦參、杜仲、丁香、人工牛黃等，共25 味藥材。功能與主治：燥協(xié)日烏素，消腫；主治陶賴、赫如虎、巴木病、關(guān)節(jié)疼痛及各種皮膚病。

本研究分別對(duì)不同生產(chǎn)日期的3 個(gè)批次的額勒吉根·綽斯-25 丸劑做了鑒別和檢查項(xiàng)。

1 材料和方法

1.1 顯微鑒別

取本品研成粉末，制片，置智能顯微鏡[ 智能顯微鏡（型號(hào)：DM30008B，生產(chǎn)廠家：德國(guó)徠卡儀器有限公司）]下觀察。

1.2 薄層鑒別

1.2.1 材料

對(duì)照藥材、對(duì)照品來(lái)源：人工牛黃對(duì)照藥材（批號(hào)：121197-202002）、苦參堿對(duì)照品（批號(hào)：110805-201907）、膽酸對(duì)照品（批號(hào)：100078-202014）、決明子對(duì)照藥材（批號(hào)：121011-201904），以上均從中國(guó)食品藥品檢定研究院內(nèi)選購(gòu)。

薄層板信息：自制氫氧化鈉硅膠G 板、硅膠H、硅膠G板，預(yù)制高效硅膠G 板。

其他試劑：均為分析純，水為離子交換高純水。

1.2.2 方法

苦參：選取本品共6g，將其研成細(xì)末，并在其中加入濃氨試液0.5ml 和三氯甲烷30ml。將溶液放置過夜后進(jìn)行濾過處理，將濾液進(jìn)行蒸干處理，在殘?jiān)屑尤?ml 三氯甲烷進(jìn)行溶解，最終得到的溶液作為供試品溶液。另外，將苦參堿作為對(duì)照品，在其中加入乙醇，制成為溶液為每1ml 中含有0.2mg 的溶液，將其作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)[1]，吸取供試品溶液及對(duì)照組溶液，吸取量分別為5μl、4μl，并將其點(diǎn)在同一硅膠G 薄層板上，薄層板使用2%氫氧化鈉溶液制備而成[2]，展開劑為甲苯-丙酮-甲醇（8 ∶3 ∶0.5），以展距為8cm 展開，并取出后進(jìn)行晾干處理，再以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-水（2 ∶4 ∶2 ∶1）10℃以下放置的上層溶液為展開劑，將其展開后取出并晾干處理，依次噴以碘化鉍鉀試液和亞硝酸鈉乙醇試液。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的橙色斑點(diǎn)。

人工牛黃：取本品共2g，將其研成細(xì)末后加入甲醇進(jìn)行超聲處理，甲醇量為10ml，超聲處理時(shí)間為5min，將溶液進(jìn)行濾過處理得到的濾液為供試品溶液。另外，取人工牛黃對(duì)照的藥材0.5g，在其中加入5ml 的甲醇，以相同的方法制取對(duì)照藥材溶液。另取膽酸對(duì)照品，在其中加入甲醇制成每1ml 里含有1mg 的溶液，將制成的溶液作為對(duì)照品溶液[3,4]。照薄層色譜法試驗(yàn)，將供試品溶液、對(duì)照藥材溶液、對(duì)照品溶液分別吸取5μl、4μl、2μl，將其分別同時(shí)點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯-醋酸-甲醇（20 ∶25 ∶2 ∶3）的上層溶液作為展開劑，將其展開后取出進(jìn)行晾干處理，噴以10%磷鉬酸乙醇溶液，之后進(jìn)行加熱處理，溫度為105℃，直到斑點(diǎn)出現(xiàn)清晰的顯色，供試品色譜中在相同的位置上出現(xiàn)與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜上相同顏色的斑點(diǎn)[5]。

2 結(jié)果

2.1 顯微鑒別

橡膠絲的形態(tài)為條狀，或是出現(xiàn)扭曲狀的團(tuán)形，在表面呈現(xiàn)出顆粒（杜仲，見圖1）。花粉粒狀，形狀為類圓形、橢圓形或是橄欖形，直徑大概為60μm，具3 個(gè)萌發(fā)孔，在外壁上呈現(xiàn)出突起的齒狀（紅花，見圖2）。種皮柵狀細(xì)胞無(wú)顏色或是呈現(xiàn)出淡黃色，從側(cè)面看細(xì)胞1 列呈現(xiàn)為長(zhǎng)方形，排列不規(guī)矩，長(zhǎng)度范圍為42-53μm，壁較厚，光輝帶2條；表面觀呈類多角形，壁稍皺縮（決明子，見圖3）。

圖1 杜仲的橡膠絲

圖2 紅花的花粉粒

圖3 決明子?xùn)艩罴?xì)

2.2 薄層鑒別

勒吉根·綽斯-25 丸薄層色譜圖照片見圖4、圖5。

圖4 苦參薄層色譜圖

圖5 人工牛黃薄層色譜圖

3 檢驗(yàn)結(jié)論

3.1 顯微鑒別

杜仲：在顯微鏡下呈現(xiàn)為橡膠絲條狀，或是扭曲成團(tuán)狀，在表面有顆粒形成。

紅花：形狀為花粉粒的類圓形、橢圓形厚實(shí)橄欖形，直徑約為60μm，具3 個(gè)萌發(fā)孔，在外壁呈現(xiàn)出突起的齒狀[6]。

決明子：種皮柵狀細(xì)胞，顏色為無(wú)色或是淡黃色，在側(cè)面看細(xì)胞1 列呈現(xiàn)為長(zhǎng)方形，排列并不整齊，長(zhǎng)度范圍為42-53μm，外壁有一定的厚度，有2 條光輝帶；表面觀呈類多角形，壁稍皺縮[7]。

3.2 處方中苦參的TLC 鑒別

參照文獻(xiàn)[1]“苦參”項(xiàng)下的薄層鑒別方法，按照處方的比例進(jìn)行折算，分別取出供試品、陰性對(duì)照品6g、5.77g，按照一定的方法制取供試品溶液及陰性對(duì)照溶液，對(duì)照品為苦參堿，進(jìn)行薄層色譜實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示在相應(yīng)的色譜位置上供試品色譜與對(duì)照品色譜顯示出的斑點(diǎn)顏色相同，而相同制備工藝下的陰性對(duì)照色譜中并沒有出現(xiàn)相應(yīng)的斑點(diǎn)，這就提示在處方中的其他組分對(duì)于苦參的鑒別并沒有產(chǎn)生干擾，具專屬性（見圖4）。

耐用性考察：按確定的方法將預(yù)制薄層板與自制薄層板的斑點(diǎn)分離情況進(jìn)行考察結(jié)果顯示出現(xiàn)的色譜結(jié)果并沒有較大的差異，均有較好的分離效果，沒有出現(xiàn)主斑點(diǎn)拖尾現(xiàn)象。

3.3 處方中人工牛黃的TLC 鑒別

參照文獻(xiàn)[1]“人工牛黃”項(xiàng)下的薄層鑒別方法，以甲醇為溶劑，超聲處理5min，提取效果較好；展開劑比較了①三氯甲烷-丙酮-甲酸（6 ∶3 ∶0.5）和②正己烷-乙酸乙酯-醋酸-甲醇（20∶25∶2∶3）的上層溶液的分離效果，結(jié)果第②種展開劑分離效果好；顯色劑比較了以10%硫酸乙醇溶液為顯色劑和藥典“人工牛黃”項(xiàng)下方法以10%磷鉬酸乙醇溶液為顯色劑，結(jié)果后者斑點(diǎn)清晰，效果較好。

專屬性考察：陰性對(duì)照品以相同的工藝制取，并稱取1.95g，按3.2 供試品溶液的制備方法制得陰性對(duì)照溶液，將人工牛黃對(duì)照藥材及膽酸對(duì)照品作為對(duì)照，將確定的色譜條件為提前進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果顯示在相應(yīng)的位置上，供試品色譜與對(duì)照藥材及對(duì)照品呈現(xiàn)出的斑點(diǎn)具有相同的顏色，而陰性對(duì)照色譜在相應(yīng)的位置上與其他試品并沒有呈現(xiàn)出相同的斑點(diǎn)。這一結(jié)果提示其他組分對(duì)于人工牛黃的鑒別并沒有造成干擾，具專屬性，結(jié)果見圖5。

耐用性考察：按確定的方法將預(yù)制薄層板與自制薄層板的斑點(diǎn)分離情況進(jìn)行考察結(jié)果顯示出現(xiàn)的色譜結(jié)果并沒有較大的差異，均有較好的分離效果，沒有出現(xiàn)主斑點(diǎn)拖尾現(xiàn)象[8]。