陳楨 高麗萍

CKD 是指由于各種原因引起的腎臟結(jié)構(gòu)和功能異常的一種慢性疾病,其主要由各種原發(fā)性或繼發(fā)性的腎小球炎、腎小管損傷或腎血管病變等原因?qū)е?。通常CKD 患者會(huì)有惡心、嘔吐、食欲不振等臨床癥狀［1］。臨床上根據(jù)患者體內(nèi)的腎小球過濾率(GFR)不同可將其分為5 期,分期越高標(biāo)明患者病情越嚴(yán)重,但患者病情發(fā)展至CKD5 期時(shí)若不及時(shí)采取早期診斷和治療,對(duì)其預(yù)后有著嚴(yán)重的消極影響。本文主要分析CKD5 期患者血清鐵調(diào)素-25、SCr、血磷、ALP 及PTH 等實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)水平變化對(duì)其臨床診斷的價(jià)值,具體報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2019 年10 月～2020 年10 月本院收治的60 例CKD 患者,按其病理分期分為實(shí)驗(yàn)組(CKD5 期)與參照組(CKD5 期以下),各30 例。另選擇同期到本院進(jìn)行健康檢查的人員30 例為正常組。其中,實(shí)驗(yàn)組男女比例為16 ∶14；年齡25～75 歲,平均年齡(50.22±8.41)歲；病程1～4 年,平均病程(3.75±0.92)年。參照組男女比例為17 ∶13；年齡24～74 歲,平均年齡(49.36±8.22)歲；病程2～6 年,平均病程(3.03±0.99)年。正常組男女比例為12 ∶18；年齡26～76 歲,平均年齡(51.41±8.20)歲。三組研究對(duì)象性別、年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理會(huì)批準(zhǔn),所有研究對(duì)象自愿參與本研究。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn) ①納入標(biāo)準(zhǔn)：實(shí)驗(yàn)組和參照組中所有患者均符合《慢性腎臟病查診斷及防治指南》中對(duì)于慢性腎臟病的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)［2］,即均有>3 個(gè)月的腎臟損害病史,且GFR 正?；虬橛胁徽５牟±頁p傷,經(jīng)血常規(guī)尿常規(guī)檢查后發(fā)現(xiàn)成分異常,經(jīng)影像學(xué)檢查后結(jié)果異常,且出現(xiàn)不明原因的GFR<60 ml/min 持續(xù)3 個(gè)月的情況,參考美國腎臟病基金會(huì)K/DOQI 專家組對(duì)CKD 的分期方法提出的新建議［3］,以GFR<15 ml/min為標(biāo)準(zhǔn),將患者列為CKD5 期和CKD5 期以下。②排除標(biāo)準(zhǔn)：近3 個(gè)月內(nèi)曾出現(xiàn)過隱匿性出血癥狀的患者、合并有其他血液系統(tǒng)疾病者、以往有惡性腫瘤患者、近1 個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)過感染癥狀者和1 個(gè)月內(nèi)有服用過糖類皮質(zhì)激素進(jìn)行治療者均不納入此次研究。

1.3 方法 所有患者均采集肘正中靜脈空腹血樣5 ml并低溫保存,所有指標(biāo)均在2 h 內(nèi)進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)。檢測(cè)指標(biāo)及方法：①血清鐵調(diào)素-25：采用酶聯(lián)免疫法試劑盒對(duì)分離出的血清進(jìn)行檢測(cè),在含有標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品及樣本的微孔中加酶復(fù)合物后充分混勻,在室溫下溫育1 h 以上,洗掉孔內(nèi)反應(yīng)液后再加入酶復(fù)合物,溫育30 min 后洗去反應(yīng)物,后加入底物液,溫育20 min 之后洗凈,最后加入終止液,10 min 內(nèi)使用酶標(biāo)儀對(duì)吸附情況進(jìn)行檢測(cè),后記錄檢測(cè)結(jié)果。②SCr：采用肌氨酸氧化酶法催化樣本生成肌酸,后由肌酸分解產(chǎn)生氨酸和尿素,經(jīng)肌氨酸氧化酶催化后生成甘氨酸、甲醛和過氧化氫,最后經(jīng)偶聯(lián)反應(yīng)進(jìn)行比色法測(cè)定,并記錄結(jié)果。③血磷：采用酶法將反應(yīng)中的糖原磷酸化酶、磷酸葡萄糖變位酶等使用氧化型輔酶Ⅱ(NADP+)還原成還原型輔酶Ⅱ(NADPH),以形成340 nm 的波長對(duì)吸光度進(jìn)行測(cè)定后并記錄結(jié)果。④ALP：采用偶氮偶聯(lián)法準(zhǔn)備20 mg 的萘酚AS-BI 磷酸鹽、50 ml 濃度為0.2 mol/L 的巴比妥醋酸緩沖液、0.5 ml 六偶氮副品紅以及1 mol/L 氫氧化鈉充分混合和作為孵育液,將細(xì)胞爬片制定好后使用磷酸緩沖液沖洗,后置入濃度為10%的甲醛中固定10 min,使用蒸餾水進(jìn)行沖洗后使用孵育液進(jìn)行滴加,在室溫下靜置45 min 后將其沖洗干凈并晾干,后觀察其細(xì)胞質(zhì)中的紅色顆粒并進(jìn)行記錄。⑤PTH：采用免疫化學(xué)熒光法將配制好的磷酸沖洗液滴于待檢標(biāo)本上10 min 后洗去,將適當(dāng)稀釋過后的熒光標(biāo)記體溶液滴于沖洗后的標(biāo)本將其覆蓋,于室溫下保存30 min,后將玻片多余水分吸干,并滴加緩沖甘油,將玻片立即覆蓋后使用熒光顯微鏡觀察并記錄結(jié)果。

1.4 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn) 分別觀察三組研究對(duì)象的血清鐵調(diào)素-25、SCr、血磷、ALP 及PTH 等各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的水平,并進(jìn)行對(duì)比。血清鐵調(diào)素-25 的正常范圍：成年男為11～30 μmol/L(600～1700 μg/L),成年女性為9～27 μmol/L(500～1500 μg/L)；SCr 正常范圍：成年男性為56～106 μmol/L,成年女性為44～97 μmol/L；血清磷的正常范圍為0.74～1.39 mmol/L(2.3～4.3 mg/dl)；ALP 正常范圍：成年男性為45～125 U/L,成年女性為50～135 U/L；免疫化學(xué)熒光法下PTH 的正常范圍為1～10 pmol/L。觀察CKD 患者各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)與患者病情的相關(guān)性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。采用Pearson相關(guān)分析CKD 患者病情與各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)水平變化情況的相關(guān)性,當(dāng)r<0 且P<0.05 時(shí)為負(fù)相關(guān),當(dāng)r>0 且P<0.05 時(shí)為正相關(guān)。P<0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)對(duì)比 實(shí)驗(yàn)組與參照組血清鐵調(diào)素-25、SCr、血磷、ALP、PTH 水平均高于正常組,且實(shí)驗(yàn)組高于參照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 三組實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)指標(biāo)對(duì)比()

表1 三組實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)指標(biāo)對(duì)比()

注：與正常組對(duì)比,aP<0.05；與參照組對(duì)比,bP<0.05

2.2 CKD 患者各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)與患者疾病進(jìn)展的相關(guān)性 Pearson 相關(guān)分析結(jié)果顯示,血清鐵調(diào)素-25、SCr、血磷、ALP、PTH 與CKD5 期患者疾病進(jìn)展均呈正相關(guān)(r=0.589、0.621、0.702、0.647、0.571,P<0.05)；血清鐵調(diào)素-25、SCr、血磷、ALP、PTH 與CKD5 期以下患者疾病進(jìn)展呈正相關(guān)(r=0.561、0.553、0.629、0.667、0.593,P<0.05)。見表2。

表2 CKD 患者各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)與患者疾病進(jìn)展的相關(guān)性

3 討論

CKD 患者在不同分期其表現(xiàn)出來的臨床癥狀有所不同,患者在CKD3 期之前可能沒有任何癥狀,可能只會(huì)出現(xiàn)一些乏力、腰酸等輕微癥狀,多數(shù)患者并不會(huì)引起重視,但當(dāng)其癥狀加重且出現(xiàn)高血壓、高鉀血癥、甲狀旁腺功能障礙時(shí)往往病情已經(jīng)發(fā)展得較為嚴(yán)重,甚至可能給患者的生命造成威脅［4］。鐵調(diào)素是人體中由肝臟合成并分泌的抗菌多肽,可參與人體內(nèi)免疫反應(yīng),調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)的鐵平衡,有研究認(rèn)為,當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)感染或炎癥反應(yīng)時(shí),巨噬細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞中產(chǎn)生的Toll 樣受體4(TLR-4)可使得機(jī)體內(nèi)的血清鐵調(diào)素水平上升,而CKD 患者由于自身免疫功能下降,身體出現(xiàn)各種炎癥反應(yīng)時(shí)其體內(nèi)的血清鐵調(diào)素水平也會(huì)顯著升高［5］。SCr 是人體內(nèi)肌肉代謝所產(chǎn)生的,與人體內(nèi)肌肉總量有著密切關(guān)系,可通過腎小球過濾后隨尿液排出,是臨床上常用于了解腎功能損害程度的主要指標(biāo)之一［6］。

血磷是人體血液中的無機(jī)磷,其與人體血漿中的鈣濃度存在一定數(shù)量關(guān)系,當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)甲狀旁腺功能減退或腎功能不全時(shí),其血磷水平會(huì)出現(xiàn)顯著變化［7］。而ALP 主要存在于人體的肝臟和骨骼中,主要可用于診斷肝膽疾病與骨骼系統(tǒng)疾病,對(duì)于CKD 患者腎功能損害情況而言也是一項(xiàng)重要的臨床指標(biāo)［8］。PTH 是甲狀旁腺主細(xì)胞分泌的堿性單鏈多肽類激素,可通過調(diào)節(jié)體內(nèi)鈣和磷的代謝功能以提高機(jī)體內(nèi)血鈣水平,同時(shí)降低機(jī)體內(nèi)的血磷水平,主要可幫助檢測(cè)患者的甲狀旁腺功能情況,對(duì)甲狀旁腺功能異常的CKD 患者來說也有重要的臨床意義［9］。本研究通過對(duì)CKD 患者和正常人員體內(nèi)的以上各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)后發(fā)現(xiàn),實(shí)驗(yàn)組與參照組血清鐵調(diào)素-25、SCr、血磷、ALP、PTH水平均高于正常組,且實(shí)驗(yàn)組高于參照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。血清鐵調(diào)素-25、SCr、血磷、ALP、PTH 與CKD5 期、CKD5 期以下患者疾病進(jìn)展均呈正相關(guān)(P<0.05)。

綜上所述,測(cè)定CKD5 期患者血清鐵調(diào)素-25、SCr、血磷、ALP 及PTH 等實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)水平可有效反應(yīng)其肝功能受損情況及病情嚴(yán)重程度,可通過對(duì)CKD5期患者進(jìn)行以上各項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)而實(shí)現(xiàn)對(duì)其的早期診斷,可有效改善患者預(yù)后情況,臨床診斷價(jià)值較高,建議加以推廣。